襄陽市規模化豬場豬圓環病毒2型抗體水平研究

程良保，周華林，楊玉瑩

(1.長江大學動物科學學院，湖北荊州 434023；2.襄陽正大有限公司，湖北襄陽 441104；3.襄陽職業技術學院/襄陽市動物醫學工程技術研究中心，湖北襄陽 441021)

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襄陽市規模化豬場豬圓環病毒2型抗體水平研究

程良保1，2，周華林3，楊玉瑩1*

(1.長江大學動物科學學院，湖北荊州 434023；2.襄陽正大有限公司，湖北襄陽 441104；3.襄陽職業技術學院/襄陽市動物醫學工程技術研究中心，湖北襄陽 441021)

摘要[目的] 了解襄陽市規模化豬場豬2型圓環病毒的免疫水平。[方法] 2013年1～12月對襄陽市27家規模化豬場已接種PCV2疫苗的母豬和保育豬采集1 150份血樣，采用ELISA方法對豬群血清中PCV2的抗體水平進行檢測。[結果] 在檢測的1 150份血樣中，陽性數814份，總體陽性率為 70.8%。其中，抗體弱陽性樣本456份，占39.7%；抗體強陽性樣本有358份，占31.1%。[結論] 應對襄陽市豬群PCV2免疫程序進行優化，提高PCV2的血清抗體濃度，從而控制豬群PCV2的疫情。

關鍵詞規模化豬場；圓環病毒2型；抗體水平

豬圓環病毒病是由豬圓環病毒2 型(Porcine circovirus type 2，PCV2)引起的豬的多種疾病的統稱，包括豬皮炎與腎病綜合征(PDNS)、斷奶仔豬多系統衰竭綜合征(PMWS)、豬間質性肺炎(IP)、新生仔豬先天性震顫(CT)以及及懷孕母豬的繁殖障礙等。我國早在1991年就曾報道豬感染PCV2，研究表明目前所有地區均已遭受PCV2的感染[1]，PCV2感染所引發的各類相關疫病給養豬業帶來了巨大的經濟損失，近年來備受養豬業、動保行業和各國學者的關注。Sciencediret搜索顯示，截至2015年11月7日共有PCV2相關論文1 197篇，其中近5年發表的論文數量就達580篇。2009年我國引進對勃林格殷格翰動物保健(美國)公司的PCV2疫苗，截止2013年12月底我國已有16家企業6種PCV2疫苗通過農業部注冊，其中14家企業通過審批[2]。許多豬場在生產過程中也將PCV2疫苗納入豬場免疫計劃，然而豬場人員對疫苗免疫的劑量、免疫時間和免疫頻次大多憑借經驗，經常導致PCV2的免疫效果不夠理想。為了了解PCV2疫苗在襄陽市規模豬場的免疫狀況，并有效控制PCV2在豬場的疫情，筆者于2013年1～12月對襄陽市27家規模化豬場采集血樣，進行PCV2疫苗的免疫效果監測。

1材料與方法

1.1血樣采集2013年1～12月從老河口市、宜城市、南漳縣等襄陽市轄區3市3縣3區的27家規模豬場采集血樣。在免疫PCV2疫苗的豬場采集母豬血樣650份與保育豬血樣500份，共1 150份。隨機采集5 ml前腔靜脈血樣，靜置60 min，待血清析出后于4 ℃條件下冷藏保存送至實驗室。然后，2 000 r/min 離心10 min，取上層血清待檢。

1.2儀器與試劑

1.2.1儀器 。GF-M2000型酶標儀，購自山東高密彩虹分析儀器有限公司；單道微量可調移液槍，為德國Eppendorf產品，規格為10 μl和200 μl；37 ℃恒溫水箱，為金壇市儀都儀器有限公司產品。

1.2.2試劑。豬PCV2抗體ELISA檢測試劑盒購自深圳康百得生物有限公司，包含PCV2抗原包被板、酶結合物、20倍濃縮洗滌劑、底物、顯色劑和終止劑。

1.3抗體檢測

1.3.1檢測方法。豬PCV2 抗體ELISA檢測試劑盒，采用重組PCV2病毒CAP蛋白作為固相抗原，利用抗原抗體特異性反應和酶高度敏感性催化反應，檢測豬血清中的特異性PCV2抗體。具體檢測方法按照PCV 2 抗體的ELISA 檢測試劑盒說明書進行，在酶標儀上進行讀數。

1.3.2檢測結果判定。以空白對照調零，用酶標儀于450 nm(620 nm 作參比波長)處測定各孔OD450值。若檢測樣本OD值≥0.150，表明豬血清中存在PCV2抗體；若檢測樣本OD值≥0.400，表明豬血清中抗體水平高，免疫效果好。

2結果與分析

2.1血清中PCV2抗體陽性率從表1可以看出，2013年1～3月檢測 213份血清，其中陽性血清數149份，陽性率為70.0%；4～6月檢測270份血清，其中陽性數188份，陽性率為

69.6%；7～9月檢測372份血清，其中陽性數270份，陽性率為72.6%；10～12月檢測295份血清，陽性數207份，陽性率為70.2%。2013年1～12月共檢測1 150份血清，其中陽性數814份，總體陽性率為70.8%。

2.2血清中PCV2抗體濃度的分布情況由表2可知，1～3月88份樣品為弱陽性(OD值為0.15～0.39)，占41.3%；61份樣品為強陽性(OD值≥0.40)，占28.6%；4～6月，109份樣品弱陽性(占40.4%)，79份樣品呈強陽性(占29.3%)；7～9月，145份樣品呈弱陽性(占39.0%)，125份樣品強陽性(占33.6%)；10～12月，114份樣品呈弱陽性(占38.6%)，93份樣品呈強陽性(占31.5%)。總體來看，2013年1～12月檢測血清中456份樣品呈弱陽性(占39.7%)，358份樣品呈強陽性(占31.1%)。

從4個季度的PCV2抗體陽性率和強陽性率等免疫指標來看，各季度之間差異不大，說明PCV2的免疫效果全年比較穩定，與季節性因素無關。

表1　2013年豬圓環病毒2型血清抗體檢測結果

表2　2013年豬圓環病毒2型血清抗體OD值的分布　份

3結論與討論

該試驗結果表明襄陽市規模化豬場PCV2抗體無季節性差異，全年免疫效果比較穩定。PCV2抗體強陽性率為31.1%， PCV2抗體水平較低，因此應加強豬群PCV2免疫程序優化，提高血清PCV2抗體濃度和豬對PCV2的抵抗力。

(1)該試驗中襄陽市規模豬場PCV2抗體陽性率高達70%，但強陽性率僅為31.1%，說明豬群PCV2免疫形勢不容樂觀。該調查結果表明部分免疫PCV2疫苗的豬場仍然發生PCV2，可能與PCV2疫苗免疫產生抗體的濃度較低有關。國內外大量表明，PCV2的免疫效果與疫苗的類型、免疫時間和免疫劑量密切相關[3-5]。因此，應開展PCV2的優化免疫試驗，以提高PCV2疫苗在生產中的保護效果。

(2)此次檢測發現血清PCV2抗體陽性率為70.8%，高于王江輝等[6]的檢測結果(20.3%)，表明豬PCV2疫苗的免疫效果得到提高，這與近年來PCV2疫苗在襄陽地區規模化豬場的推廣應用密切相關。

(3)做好豬場PCV2的防控，除了加強PCV2的免疫外，改善飼養環境也是十分重要的措施。應加強飼養管理，降低飼養密度，保證圈舍通風良好，減少環境應激，合理分群與混養，實行全進全出制。避免將不同日齡的豬混群飼養，以減少和降低豬群之間 PCV2 及其他病原的接觸感染機會。

(4)在現代豬規模化生產中，完善的生物安全體系也有利于防控PCV2疾病。應將消毒衛生工作貫穿于養豬生產的各個環節，以最大限度地降低豬場內污染的病原微生物，減少或杜絕豬群繼發感染的機率[7]。

參考文獻

[1] GRAU-ROMA L，FRAILE L，SEGALéS J.Recent advances in the epidemiology，diagnosis and control of diseases caused by porcine circovirus type 2[J].Vet J，2011，187：23-32.

[2] 鄧秋紅，鄭杰，劉延亭，等.國內商品化豬圓環病毒疫苗的現狀及展望[J].中國獸藥雜志，2014，48(2)：67-69.

[3] CHAE C.Commercial porcine circovirus type 2 vaccines：Efficacy and clinical application[J].Vet J，2012，194：151-157.

[4] FRAILE L，GRAU-ROMA L，SARASOLA P，et al.Inactivated PCV2 one shot vaccine applied in 3-week-old piglets：Improvement of production parameters and interaction with maternally derived immunity[J].Vaccine，2012，30：1986-1992.

[5] 趙建樂，徐兆強，尤永君，等.豬圓環病毒2型滅活疫苗(ZJ/C株)免疫效果研究[J].養豬，2014(1)：116-117.

[6] 王江輝，王川慶，陳陸，等.2005 年河南省豬圓環病毒病血清學調查[J].河南畜牧獸醫，2006，27(5)：25-37.

[7] 劉正飛，陳煥春，琚春梅，等.豬圓環病毒研究進展[J].動物醫學進展，2002，23(2)：14-16.

The Antibody Level of Porcine Circovirus Type 2 of Swine in Large-scale Pig Farms in Xiangyang City

CHENG Liang-bao1, 2，ZHOU Hua-lin3, YANG Yu-ying1*(1. College of Animal Science, Yangtze University, Jingzhou, Hubei 434023; 2. Xiangyang Chia Tai Co., Ltd., Xiangyang, Hubei 441104; 3. Xiangfan Vocational and Technical College, Xinyang Research Center for Animal Medicine Engineering and Technology, Xiangyang, Hubei 441021)

Abstract[Objective] The aim was to investigate the immune level of porcine circovirus type 2 (PCV2) of swine in large-scale pig farms in Xiangyang City of Hubei Province. [Method] 1 150 blood samples were collected from sow and nursery pigs immunized with PCV2 vaccine in 27 large-scale pig farms in Xiangyang City from January to December of 2013. The antibody level of PCV2 in the serum was detected by using ELISA method. [Result] Among 1 150 detected serum samples, the detection results of 814 samples were positive, so the total positive rate was 70.8%. Among positive samples, 456 samples were weakly positive, which accounted for 39.7%. And 358 samples were strongly positive, accounting for 31.1%. [Conclusion] The immune procedure of PCV2 in swine in Xiangyang City should be strengthened and the serum antibody concentration of PCV2 should be improved so as to control the disease caused by PCV2 in pig herd.

Key wordsLarge-scale pig farms; Porcine circovirus type 2 (PCV2); Antibody level

收稿日期2015-11-25

作者簡介程良保(1982- )，男，湖北大冶人，碩士研究生，研究方向：預防獸醫學。*通訊作者，教授，從事動物病原微生物學與免疫學研究。

基金項目襄陽市科技局自然科學研究項目(20136704)；襄陽市動物醫學工程技術研究中心建設項目(20141612)。

中圖分類號S 858.28

文獻標識碼A

文章編號0517-6611(2015)36-085-01