胃癌患者血清及癌組織中MMP-3的表達及臨床意義

李　佳, 劉愛勇, 王　麗, 張美云, 李曉鳳

(1. 內蒙古自治區(qū)包頭市疾病預防控制中心 免疫規(guī)劃科, 內蒙古自治區(qū) 包頭, 014030;

內蒙古自治區(qū)包頭市腫瘤醫(yī)院, 2. 放療科; 3. 預保科; 4. 腫瘤綜合內科, 內蒙古自治區(qū) 包頭, 014030)

胃癌患者血清及癌組織中MMP-3的表達及臨床意義

李佳1, 劉愛勇2, 王麗3, 張美云4, 李曉鳳4

(1. 內蒙古自治區(qū)包頭市疾病預防控制中心 免疫規(guī)劃科, 內蒙古自治區(qū) 包頭, 014030;

內蒙古自治區(qū)包頭市腫瘤醫(yī)院, 2. 放療科; 3. 預保科; 4. 腫瘤綜合內科, 內蒙古自治區(qū) 包頭, 014030)

摘要:目的研究胃癌患者血清及癌組織中基質金屬蛋白酶-3(MMP-3)的表達特點，探討檢測血清MMP-3在臨床上反映胃癌病程變化的意義。方法選取胃癌患者45例為觀察組，同期健康體檢者30例為對照組，比較手術前觀察組與對照組血清MMP-3水平，分析觀察組MMP-3在胃癌組織、癌旁組織中的表達情況，及其與臨床病理因素的關系。結果胃癌組織MMP-3陽性染色率顯著高于癌旁組織(P<0.01)；觀察組血清MMP-3水平顯著高于對照組(P<0.01); 血清MMP-3水平與腫瘤浸潤深度、淋巴結轉移、臨床分期密切相關(P<0.01)。結論胃癌患者MMP-3于癌組織及血清中均高表達，血清MMP-3在預測胃癌侵襲轉移，評估胃癌惡性程度等可能具有重要的臨床應用價值。

關鍵詞:胃癌; 基質金屬蛋白酶-3; 酶聯(lián)免疫吸附測定; 免疫組織化學染色法

胃癌為常見的惡性腫瘤之一，嚴重威脅人類健康[1]，積極尋找胃癌新的防治手段，提高胃癌診斷治療水平，一直為臨床研究的熱點[2]。研究表明，腫瘤細胞是否發(fā)生侵襲、轉移嚴重影響腫瘤患者的預后[3]。腫瘤細胞的侵襲轉移過程為多環(huán)節(jié)級聯(lián)反應，腫瘤細胞通過破壞基底膜、降解細胞外間質實現(xiàn)浸潤和轉移過程[4]。基質金屬蛋白酶類(MMPs)為蛋白水解酶，降解細胞外基質和基底膜中的成分以促進白細胞浸潤周圍組織是其主要生物學功能[5-6]。本研究通過檢測胃癌患者血清和癌組織中基質金屬蛋白酶-3(MMP-3)的表達特點，擬探討血清MMP-3與胃癌臨床病理參數(shù)的關系及其潛在的臨床應用價值。

1資料與方法

1.1　一般資料

選取2009年9月-2011年8月收治的胃癌術前患者45例為觀察組，其中男25例，女20例；年齡30～72歲，平均(55.2±5.6)歲。按照世界衛(wèi)生組織(WHO)病理組織學分類和TNM分期標準[7]: Ⅰ～Ⅱ期15例，Ⅲ～Ⅳ期30例；伴有淋巴結轉移30例，無淋巴結轉移15例；腫瘤發(fā)生部位：賁門、胃底、胃體23例，胃角、胃竇22例；高、中分化腺癌11例，低分化腺癌34例；浸潤深度：未達漿膜12例，達到或超過漿膜33例。同期健康體檢者30例為對照組，其中男19例，女11例；年齡31～75歲，平均(53.2±3.6)歲。2組受試者年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性(P>0.05)。

1.2　方法

采集2組受試者空腹外周靜脈血5 mL，離心后分離血清, -70 ℃冰箱保存待測，酶聯(lián)免疫吸附測定(Elisa法)檢測血清MMP-3水平。收集觀察組術中胃癌組織，及距癌組織邊緣>5 cm的癌旁組織，免疫組織化學染色法檢測觀察組胃癌組織、癌旁組織中MMP-3表達情況：每張切片在200倍光鏡下，選5個不同視野，各視野計數(shù)200個癌細胞。陽性(+)判斷標準：染色陽性細胞比例≥30%。

1.3　觀察指標

分析觀察組MMP-3在胃癌組織、癌旁組織中的表達情況；比較手術前觀察組與對照組血清MMP-3水平；分析血清MMP-3水平與臨床病理因素的關系。

2結果

2.1　MMP-3在觀察組胃癌組織及癌旁組織中的表達

MMP-3免疫組織化學染色結果表明，觀察組胃癌組織MMP-3陽性染色率為68.9%(31/45)，癌旁組織MMP-3陽性染色率為13.3%(6/45)，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。

2.2　2組血清MMP-3水平比較

觀察組術前血清MMP-3水平顯著高于對照組(P<0.01)，見表1。

表1　2組血清MMP-3水平比較

與對照組比較，**P<0.01。

2.3　觀察組血清MMP-3水平與臨床病理因素的關系

觀察組腫瘤浸潤達到或超過漿膜的患者，其血清MMP-3水平顯著高于未達漿膜患者(P<0.01); 發(fā)生淋巴結轉移患者的血清MMP-3水平顯著高于未發(fā)生淋巴結轉移患者(P<0.01); TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的患者血清MMP-3水平顯著高于Ⅰ～Ⅱ期的患者(P<0.01); 血清MMP-3水平與患者年齡、性別、腫瘤直徑、部位、分化程度無關(P>0.05), 見表1。

表2　觀察組患者血清MMP-3水平與臨床病理

3討論

胃腫瘤細胞的侵襲轉移是一個多步驟、多環(huán)節(jié)的級聯(lián)反應過程[8]，除腫瘤細胞本身的侵襲力，腫瘤細胞還須通過對可分泌某些細胞外基質水解酶和基底膜降解酶，并通過多種途徑，降解細胞外基質，破壞屏障[9]。MMPs為一類具有鋅離子依賴性的內源性蛋白水解酶[10], 其在降解細胞外基質的同時，還能破壞基底膜的完整性，促進腫瘤細胞的轉移和浸潤[11]。有研究[12]表明, MMP-3作為MMPs家族一員，在某些癌癥癌細胞轉移和浸潤過程中發(fā)揮重要作用，除黏附軟骨蛋白多糖、多種膠原、纖維結合素、層黏蛋白等，還可激活多種細胞因子，參與腫瘤細胞的發(fā)生、發(fā)展過程。有研究[13]發(fā)現(xiàn)，抑制腫瘤細胞分泌MMP-3，可明顯削弱腫瘤細胞的浸潤和轉移能力。

廖如奕等[15]研究發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中MMP-3表達量明顯高于正常胃黏膜組織, MMP-3表達與胃癌的分化程度、浸潤深度及淋巴結轉移相關。許威等[14]報道，運用Elisa法檢測胃癌患者術前MMP-3含量，其血清MMP-3水平與浸潤深度、淋巴結轉移、遠處轉移、臨床分期密切相關。本研究結果顯示，與癌旁組織相比，胃癌組織中MMP-3表達率較高，胃癌患者血清MMP-3水平與正常對照組比較顯著升高，提示胃癌腫瘤細胞MMP-3活性增強, MMP-3在患者血清與癌組織中的水平存在一定的相關性，檢測血清MMP-3水平可能可用來判斷胃癌的活動性；隨著胃癌浸潤深度的增加，術前血清MMP-3水平增加明顯升高，且伴有淋巴結轉移的患者，其血清MMP-3水平顯著高于無淋巴結轉移者，提示MMP-3水平變化與胃癌的轉移和侵襲有關；MMP-3隨胃癌臨床病理分期升高而顯著增高，表明其不僅對于胃癌有較高的診斷價值，且對胃癌的分期也有較積極的檢測意義，與上述報道結果一致。

綜上所述，由于血清標本比胃癌組織標本更易獲得，因而通過檢測血清MMP-3水平來輔助診斷胃癌的早期發(fā)生，預測胃癌侵襲轉移，評估胃癌惡性程度等可能具有重要的臨床實用價值與應用前景。

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Expression and clinical significance of matrix metalloproteinases-3 level in serum and tumor tissue in patients with gastric cancer

LI Jia1, LIU Aiyong2, WANG Li3, ZHANG Meiyun4, LI Xiaofeng4

(1.DepartmentofImmunizationProgram,BaotouCenterforDiseaseControlandPrevention,

Baotou,InnerMongolia, 014030; 2.DepartmentofRadiotherapy; 3.Department

ofPreventionandHealthcare;DepartmentofMedicalOncology,BaotouCancer

Hospital,Baotou,InnerMongolia, 014030)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the expression of matrix metalloproteinases-3 (MMP-3) in serum and tumor tissue and to investigate the significance of serum level of MMP-3 in reflecting course of gastric cancer. MethodsForty five patients with gastric cancer were designed as observation group and 30 healthy people were designed as control group. The serum level of MMP-3 before operation was compared between two groups. The expression of MMP-3 in tumor tissue and tumor-adjacent tissue and its relationship with clinic pathological factors were observed and analyzed. ResultsThe rate of positive MMP-3staining in tumor tissue was significantly higher than that in tumor-adjacent tissue (P<0.01). The serum level of MMP-3 in the observation group was significantly higher than that in the control group (P<0.01). Serum level of MMP-3 was associated with depth of infiltration, lymphatic metastasis and clinical stage of cancer (P<0.01). ConclusionThe level of MMP-3 is highly expressed in serum and tumor tissue in patients with gastric cancer. Serum level of MMP-3 may be valuable in prediction of invasion and metastasis and assessment of malignant degree of gastric cancer.

KEYWORDS:gastric cancer; matrix metalloproteinases-3; ELISA; immunohistochemistry

通信作者:李曉鳳, E-mail: btlixiaofeng@126.com

基金項目:中國高校醫(yī)學期刊臨床專項資金(11321896)

收稿日期:2015-01-15

中圖分類號:R 735.2

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)05-038-03DOI: 10.7619/jcmp.201505012