89例兒童交叉配血不合原因分析
孫文杰,李萌,馮麗,楊海波*
(南京醫科大學附屬南京兒童醫院, 江蘇 南京210008)
輸血是一項復雜的、特殊的、高風險的治療方法,尤其在兒童臨床輸血中更加復雜。臨床中兒童用血遇到受血者與供血者交叉配血不合的原因有很多,其中由不規則抗體抗M抗體、自身IgG抗體和自身冷抗體等導致的交叉配血不合是常見原因[1]。作者回顧性分析南京兒童醫院2011年3月至2014年7月血液科、腦外科、腎內科、泌外科、心胸外科、ICU等89例交叉配血不合現象進行研究討論,并分析了其原因。
1材料與方法
1.1檢測對象
受血者為南京市兒童醫院2011年3月至2014年7月臨床各科室89名申請輸血患兒,年齡0-14歲,其中女41例,男48例,多數為反復輸血、自身免疫性疾病、新生兒溶血、血液病等患兒。供血者血樣均來自江蘇省南京市血液中心無償獻血者。
1.2主要試劑
血型鑒定中抗A抗B標清、A型和B型反定細胞、抗D(IgM、IgG/IgM)及譜細胞均為上海血液生物醫藥有限責任公司產品。改良凝聚胺試劑為中山市生科試劑儀器有限公司產品,抗球蛋白卡和微柱凝膠卡為達亞美試劑公司產品。
1.3實驗方法
1.3.1血型鑒定:微柱凝膠卡和試管法。
1.3.2抗體篩查和coombs實驗:抗球蛋白法,根據抗體篩查陽性的對照譜確定不規則抗體的特異性。
1.3.3交叉配血實驗:鹽水法、聚凝胺法采用標準試管,抗球蛋白法采用微柱凝膠卡法。
2結果
89例疑難交叉配血的標本中血型正、反定型不符3例,其中ABO亞型1例,該亞型含有不規則抗A1抗體,另外2例A型Rh陽性患兒檢出抗A抗體。檢出直接和間接抗人球蛋白實驗均呈陽性者17例,直接抗人球蛋白實驗陰性而間接抗人球蛋白實驗陽性的患者69例。見表1。

表1 交叉配血不合情況
對89例疑難配血標本進行抗體篩查和鑒定,Rh血型系統檢出抗D抗體2例,抗c抗體2例,抗E抗體8例,抗c E抗體2例,c E+自身抗體15例(此15例中有1例患兒因頭孢唑肟鈉引起藥物性溶血導致交叉配血不合,該患兒血清中檢出抗cE抗體和自身抗體)。自身IgG抗體14例,自身冷抗體18例。MNS系統中檢出抗M抗體25例。ABO血型系統A型Rh陽性患兒檢出抗A抗體2例,抗A1 抗體1例。根據統計結果顯示,89例兒童交叉配血不合的原因主要由MNS血型系統中M抗體和Rh血型系統c E+自身抗體、自身IgG抗體以及自身冷抗體等引起。同種抗體特異性檢出結果如表2所示。

表2 同種抗體特異性檢出結果
3討論
輸血是臨床挽救患者生命是不可替代的治療手段,輸血前進行準確的血型定型、不規則抗體篩查及交叉配血是保證臨床輸血安全和有效的重要措施。當交叉配血不合時,應當了解患者病史、用藥史、輸血史及其他因素,以便找出其配血不合的原因。當主側交叉配合試驗陽性,抗體篩選試驗陰性時若患者和供血者血型定型皆正確,可能是患者血清中存在與供血者紅細胞抗原發生反應的抗體,或者供血者紅細胞直接抗球蛋白試驗為陽性,應該重復患者血清抗體篩選試驗,選擇其他供者血液重復交叉配血試驗。當主側交叉配合試驗陽性,抗體篩選試驗也陽性時考慮患者血清中的同種抗體與供血者紅細胞上的抗原發生反應,應該對患者血清進行抗體鑒定,選擇抗原陰性的供者血液重復交叉配血試驗。若主側交叉配合試驗陽性,抗體篩選試驗陽性、自身對照試驗也陽性時,首先考慮患者血清中可能同時存在自身抗體和同種抗體,應對患者紅細胞進行自身吸收試驗去除血清自身抗體,再進行抗體鑒定試驗。其次,若為患者血清異常(如白/球比值比例異常,或含血容量擴張劑,或被污染等),應獲取新標本或者用鹽水稀釋等[2]。本實驗中檢出c E+自身抗體的15例患兒中有1例是因頭孢唑肟鈉引起藥物性溶血導致的交叉配血不合,所以在遇到交叉配血不合時與臨床溝通并了解患兒用藥史也是十分重要的。在新生兒中,新生兒溶血病也是引起交叉配血不合的原因。
從89例疑難配血原因分析來看,MNS血型系統中抗M抗體是導致兒童臨床配血不合的主要原因之一??筂 抗體是MNS 血型系統最常見的抗體,分為天然抗體和免疫性抗體,絕大多數的抗M抗體以IgM形式存在,少數為IgG和IgM同時存在,而且這些IgG類抗體能夠在鹽水介質中凝集紅細胞[3]。IgM性質的抗M抗體,在37℃情況下多不凝集,臨床意義不大,只有IgG性質的抗M抗體在37℃具有活性,可引起新生兒溶血病與溶血性輸血反應。由于酶可影響MNS血型系統抗原決定簇,因此,在輸血前交叉配血時,必須應用抗人球蛋白法,只有在結果陰性的情況下才能予以輸注,以確保臨床輸血有效性與安全性[4]。對于有多次輸血史、自身免疫溶血性貧血患兒而言,其體內容易產生ABO系以外不規則抗體。89例疑難配血標本中有25例檢出抗M抗體,標本主要來源于血液科、新生兒科、腎內科、普外科、PICU、SICU等科室,且這些患兒大多數有反復多次輸血史。反復輸血可能是引起患兒產生抗M抗體的主要原因,由于本研究病例數較少且皆是兒童,國內外關于抗M抗體的產生報道較少,所以其產生原因需進一步研究證實。
其次,Rh血型系統同種免疫性抗體也是造成兒童臨床配血不合的主要原因之一,Rh血型系統的抗原至今已發現了幾十個,但牽涉到臨床輸血問題的5個主要抗原是C、c、D、E、e。Rh抗原有很強的免疫原性,其抗原強弱順序為D>E>C>c>e[5]。
另外自身抗體和自身冷抗體的存在亦是引起交叉配血不合的原因。血液病、自身免疫性疾病和反復多次輸血患者體內易產生自身抗體,自身抗體和自身冷抗體可對血型、不規則抗體篩查、交叉配血等輸血前的所有實驗造成影響[6]。由于正常人血清中含有的冷凝集素效價很低,一般<4℃才有活性,20℃則不凝集,一般對交叉配血無影響,但某些患者血清中常含有高效價病理性的冷凝集素,如系統性紅斑狼瘡、自身免疫性溶血性貧血、支原體肺炎、陣發性睡眠性血紅蛋白尿、多發性骨髓瘤等,常給交叉配血帶來一定的困難[7]。此89例標本中檢測出自身冷抗體者多為自身免疫性溶血性貧血、支原體肺炎患兒。所以冷凝集素對ABO血型定型及交叉配血困難的影響也不容忽視。
當然,交叉配血不合原因中獻血者的原因也比較常見。因為健康獻血者也會通過“天然”途徑、妊娠、輸血等免疫途徑產生同種抗體,如服藥、病毒感染、自身免疫性疾病等因素也會導致抗人球蛋白實驗陽性[8]。這就要求所有輸血科從業人員認真篩查,快速準確的做出判斷,若出現供血者抗人球蛋白實驗陽性時應及時更換供血者血液。
總之,對于臨床疑難配血不合樣本,通過分析交叉配血不合的因素,采取合理恰當的實驗方法,確定引起交叉配血不合的抗體性質,是確保臨床輸血安全的重要手段。還應盡量給予患兒ABO、Rh、MN血型同型輸注,可有效解決臨床配血不合問題,也可更加有效的減少遲發性輸血不良反應的發生。
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(收稿日期:2014-12-11)
作者簡介:孫文杰,女,35歲,碩士,主管檢驗師,從事臨床輸血檢驗方向研究。
文章編號:1007-4287(2015)12-2127-03
*通訊作者