鼻炎清顆粒治療變應性鼻炎的免疫機制研究

胡紅芳

[摘要] 目的 觀察鼻炎清顆粒對大鼠變應性鼻炎免疫系統的影響。 方法 用卵清蛋白、氫氧化鋁致敏大鼠建立變應性鼻炎動物模型，鼻炎清顆粒灌胃給藥14 d后，觀察大鼠的行為學表現，檢測大鼠血清IL-4、IgE的水平，并進行比較。 結果 藥物治療后，鼻炎清顆粒組的行為學評分、血清IL-4、IgE的水平與模型組比較，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 鼻炎清顆粒通過調節大鼠的免疫系統，改善大鼠的體質，從而達到治療變應性鼻炎的目的。

[關鍵詞] 鼻炎清顆粒；變應性鼻炎；IL-4；IgE

[中圖分類號] R392.11 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2015）04-0017-03

[Abstract] Objetive To observe effect of Biyanqing granules on immune system of rats with allergic rhinitis. Methods Rats were sensitized by ovalbumin and aluminum hydroxide，Allergic rhinitis animal model had been successfully established. Rat stomachs were pumped into the Biyanqing granules， after 14 days， observed the behavior of rats. IL-4， IgE in the serum of rats were detected and compared. Results After treatment， behavior scores， IL-4， IgE levels of Biyanqing granules group were significantly improved （P<0.05）. Conclusion Biyanqing granules can regulates the rat's immune system， improve the health of them. So as to achieve the purpose of the treatment of allergie rhinitis.

[Key words] Biyanqing granules；Allergie Rhinitis；Interleukin-4；Immunoglobulin E

變應性鼻炎是臨床常見病和多發病，尤其是耳鼻喉科，其發病率更逐年上升，是全球患病率較高的疾病，約全球15%～20%人群均患有此病，空氣質量差的地區發病率更高。隨著我國大氣污染的加重，患病人數已超過0.5億[1-2]。變應性鼻炎的病變首先為個體接觸某種物質，然后發生以IgE為主介導的變態反應，局部黏膜組織中細胞因子、炎性介質及嗜酸性細胞的浸潤和肥大細胞增多等[1-2]，該病嚴重影響患者的生活質量，甚者能誘發或加重支氣管哮喘等疾病的病情，目前，全球都十分重視此病。中藥對此病的治療有著良好的療效，本研究分析自組方鼻炎清顆粒對變應性鼻炎大鼠的血漿中IL-4 和IgE影響，探討鼻炎清顆粒治療變應性鼻炎的免疫機制。

1 資料與方法

1.1 動物及分組

選擇2014年1～2月飼養的SPF級SD45只大鼠，雄性，體質量（150±20）g（由遼寧中醫藥實驗動物中心提供），隨機分為3組，每組15只。正常對照組（簡稱正常組）15只，變應性鼻炎模型組（簡稱模型組）15只，鼻炎清顆粒治療組（簡稱治療組）15只。動物飼養在空調房內，飼養房內保持清潔，避免變應原存在。

1.2 藥物及試劑

鼻炎清顆粒由我院制劑室加工。氫氧化鋁粉（濟南金盈泰試劑廠生產，批號：80321）；卵清蛋白（Sigma公司生產，A5253）；IL-4試劑盒及IgE試劑盒為美國bender公司生產（批號為BMS542和BMS614）。

1.3造模方法

根據文獻建立大鼠實驗模型，除正常對照組外的大鼠，每只大鼠均采用腹腔注射卵清蛋白混懸液1 mL方式造模，卵清蛋白液需新鮮配制的，卵清蛋白混懸液組成為：卵清蛋白0.3 mg+氫氧化鋁32 mg+生理鹽水1 mL，注射頻率為隔日1次，造模時間為14 d。再用2%卵清蛋白懸濁液滴鼻，劑量為每次50 μL，每日1次，共需滴鼻7次。檢測造模是否成功，成功后仍維持滴鼻至實驗結束[4]。

1.4給藥方法與劑量

自實驗開始卵清蛋白滴鼻起，正常組和模型組大鼠每天口飼生理鹽水3 mL；治療組大鼠每天口飼生理鹽水稀釋后的藥物溶液3 mL。給藥時間為每次滴鼻前，每日1次，共給藥14 d。治療組給藥濃度為5 g/（kg·d），模型組為5 g/（kg·d）。

1.5標本采集及指標檢測

末次給藥24 h后，用20%烏拉坦腹腔注射（5 mL/kg）麻醉大鼠，取各組大鼠頸靜脈血4 mL，室溫下靜置1 h，3000 r/min離心，離心10 min后，分離血清，按試劑盒說明書，采用酶聯試驗檢測每組大鼠血清IL-4、IgE含量，于酶標儀450 nm波長處讀取OD值，繪制曲線計算血清IL-4、IgE濃度值。

1.6 評價標準

每次滴鼻后30 min觀察動物噴嚏、搔鼻、流涕癥狀，打分標準如下：搔鼻：僅輕搔鼻幾次，為輕度，計1分；到處擦磨，抓搔鼻甚至面部不止為重度，計2分。噴嚏：1～3個計1分，4～10個計2分，10個以上計3分。流涕：以流液位置計算，流液最遠達前鼻孔計1分；流液最遠超過前鼻孔計2分；涕液遍布滿面計3分。

1.7 統計學方法

數據以SPSS13.0統計軟件分析處理，計量資料以（x±s）表示，多組間計量資料比較采用差分析，兩兩比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 治療前后行為學評分比較

給藥前，正常組的行為學評分為（1.28±0.81）分，模型組的行為學評分（7.42±1.85）分，兩組比較t=5.78，P<0.05，說明造模成功。正常組與模型組治療前、后行為學評分比較無差異（P>0.05）；治療組的治療后評分明顯較治療前改善（P<0.05）。模型組與治療組的治療前評分無差異（P>0.05）；治療組的治療后評分較模型組明顯改善（P<0.05），說明鼻炎清顆粒在治療大鼠變應性鼻炎方面顯示了較好的療效。

3討論

現代研究已經證實，變應性鼻炎患者主要是Th細胞反應，Th細胞由Th1和Th2二個亞群組成，Th1、Th2分別參與細胞免疫、體液免疫，它們之間的不同的免疫調節功能相互制約，處于動態平衡狀態[5]。當由于某些因素的作用，導致Th2細胞因子呈優勢發展狀態時，就打破了Th1/Th2平衡系統，導致變應性鼻炎的發生，也就是變應性鼻炎發作時T輔助細胞亞群功能是失衡的，T輔助細胞亞群釋放細胞因子，IgE的合成與分泌增加，炎性細胞的濕潤也增加[6]，可見Th1/Th2之間的失衡是變應性鼻炎發病的中心病理機制。在發病過程中釋放的細胞因子有IL-4、IL-5、IL-13、IL-10等多種，促進Eos生長、遷移和活化，同時促進MC分化和IgE產生[7]，其中起關鍵作用的是IL-4，其通過促進B細胞分化和增殖來增加合成IgE，同時促進嗜堿細胞活化，釋放組胺、白三烯等化學介質，引起變態反應的發生[8]。IL-4還可抑制Th1細胞因子IL-2、IFN-Y的表達，并誘導Th細胞以向Th2分化為主，因此，IL-4經常被作為檢測Th2細胞因子水平的指標[9]。

變應性鼻炎是多種免疫活性細胞和細胞因子參與的，由IgE介導的I型變態反應性疾病。血清總IgE水平的增高既是變應性鼻炎的重要識別標志，又是變應性鼻炎的主要特點[10]，在血清中的含量高低也反應了變態反應的嚴重程度，因此檢測血清中IgE的含量是診斷、治療變應性鼻炎的一個參考指標[11]。

變應性鼻炎屬于祖國醫學“鼻鼽”之范疇，又有“鼽鼻”、“鼽水”等稱。古人早就認識到鼽嚏與氣候的變化有密切關系，并提出了當四時季節的變化時，肺氣被郁而咳嗽、鼻流清涕。盡管眾多醫家認為變應性鼻炎以肺、脾、腎之虛損為主，大致分為肺虛、脾虛、腎陽虛三型，但目前卻沒有權威的、統一的辨證分型。而筆者據臨床實踐觀察，認為東北地區風寒之邪入侵為其最主要邪氣，邪氣引起肺失宣發，肺開竅于鼻，鼻竅不利是病機特點，治療當以宣肺、散寒、祛風、通竅為治則，鼻炎清顆粒正是基于此組方用藥的，方中麻黃性溫，味辛，可宣發肺氣；防風性辛微溫，祛風止癢，與麻黃配伍可祛邪外出；辛夷、蒼耳性溫味辛，散風寒、通鼻竅。

本實驗證實，鼻炎清顆粒可抑制Th2細胞的細胞因子IL-4的產生，抑制Th細胞向Th2細胞極化，促使Th1/Th2之間的動態平衡，抑制變應性鼻炎的啟動機制，從而抑制變應性鼻炎的發生。鼻炎清顆粒可明顯降低血清中總IgE含量，減輕變應性鼻炎的免疫反應程度，緩解變應性鼻炎的癥狀，改善患者的生活質量。實驗證明，鼻炎清顆粒通過調節患者免疫系統，改善患者體質，從而達到治療變應性鼻炎的目的。

[參考文獻]

[1] Jing Chen，Lin Weirong，Zhang Jiajia，et，al. Clinical Observations on the intervention effect of natural-moxibustion on allergic rhinitis symptoms[J]. International Journal of Clinical Acupuncture，2011，20（3）：187-189.

[2] 江滿杰，李澤卿，吳晉蓉，等. 抗原長期刺激致變應性鼻炎豚鼠模型鼻黏膜重塑的研究[J]. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2012，26（5）：218-222.

[3] 張藍方. Thn/Treg平衡調節與疾病的關系研究進展[J]. 濟寧醫學院學報，2011，34（1）：68-70.

[4] 錫林，張羅. 變應性鼻炎動物模型若干問題[J]. 國際耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2008，32（2）：87-89.

[5] 張成，洪蘇玲，胡國華. 變應性鼻炎患者Treg/Thl7細胞相關轉錄因子及細胞因子的失衡表達[J]. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2012，26（5）：209-211.

[6] Bayry J，Sibe ril S，Triebel F，et al. Rescuing CD4+ CD25+ regulatory T-cell functions in rheumatoid arthritis by cytokine-targeted monoclonal antibody therapy[J]. Drug Discov Today， 2007，12（13-14）：548-552.

[7] Evans HG，Suddason T，Jackson I，et al. Optimal induction of T helper 17 cells in humans requires T cell receptor ligation in the context of Toll-like receptor activated monocytes[J]. Proc Natl Acad Sci USA，2007，104（43）： 17034-17039.

[8] Giorgio Ciprandi，Gilberto Filad，et al. Peripheral Th-17 cells in allergic rhinitis： New evidence[J]. International Immunopharmacology，2010，36（10）：226-229.

[9] Jing Chen，Junqi Chen，Weixin Huang，et al. Observation of allergic rhinitis signed improvement upon San-Jiu days natural moxibustion treatment[J]. International Journal of Clinical Acupuncture，2011，20（3）：212-214.

[10] Bousquet J，Khaltaev N，Cruz AA，et al. Allergic rhinitis and its impact on asthma（ARIA）2008 update（in collaboration with the Word Health Organization）[J]. J Rev Alerg，2009，56（2）：56-63.

[11] Ciprandi G，De Amici M，Murdaca Q，et al. Serum interleukin-17 levels arerelated to clinical severity in allergic rhinitis[J]. Allergy，2009，64（9）：1375-1378.

（收稿日期：2014-07-21）