CD117、CD44在卵巢漿液性腫瘤中的表達及臨床意義

馬 琳，吳小華

（1.河北省邢臺市第三醫(yī)院婦科，河北 邢臺054001；2.中國人民解放軍白求恩國際和平醫(yī)院婦科，河北 石家莊050082）

卵巢漿液性囊腺癌是最常見的卵巢惡性腫瘤，浸潤和轉(zhuǎn)移是其最重要的生物學行為［1］。CD117是由原癌基因c-kit編碼的一種跨膜酪氨酸激酶的受體［2］。CD44是細胞表面蛋白，參與細胞的黏附和遷移［3］。另外，CD44是透明質(zhì)酸受體，通過激活絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）和磷酯酰肌醇3激酶（phosphoinositide-3-kinase，PI3K ）／絲氨酸／蘇氨酸 蛋 白 激 酶 （serine／threonine kinase phosphorylation，AKT）信號通路，促進腫瘤細胞的增殖和存活［4-5］。目前，國內(nèi)外關(guān)于 CD117和CD44同時在卵巢漿液性囊腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的研究及其相互關(guān)系尚未見報道。本研究采用免疫組織化學方法，檢測CD117和CD44在卵巢漿液性囊腺癌中的表達情況，并分析它們與臨床病理特征的關(guān)系及其相互之間的關(guān)系，以探討CD117和CD44在卵巢漿液性囊腺癌進展中的可能作用及與生物學行為的關(guān)聯(lián)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2008年1月—2013年3月河北省邢臺市第三醫(yī)院病理科手術(shù)切除45例卵巢漿液性囊腺癌和8例卵巢交界性積液性囊腺瘤存檔蠟塊，對全部病例的所有蠟塊重新切片，HE染色，由2位高年資病理醫(yī)師嚴格按照2000年WHO標準進行明確診斷復核。同時收集研究病例的臨床病理資料，包括患者的年齡、病理分級、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和FIGO分期等。本研究卵巢漿液性囊腺癌45例，年齡49～63歲，平均（55.0±2.0）歲；卵巢交界性漿液性囊腺瘤8例，年齡51～58歲，平均（54.0±2.0）歲；同時以10例正常卵巢組織作為對照，年齡48～58歲，平均（56.0±2.0）歲，均來自子宮肌瘤同時行卵巢切除、病理證實無異常者。所有病例術(shù)前均未進行放療和化療。3組年齡差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 實驗方法 所有新鮮標本固定，包埋，切片，一張進行HE染色，一張采用免疫組織化學ElivisionTMplus兩步法檢測組織中CD117和CD44的表達。CD117用已確定為陽性胃間質(zhì)瘤切片作為陽性對照，CD44用已確定為陽性扁桃體切片作為陽性對照，用PBS代替第一抗體作為陰性對照。

1.3 免疫組織化學結(jié)果判定 CD117和CD44染色主要定位于細胞膜和細胞漿，陽性判斷標準為細胞膜、細胞漿呈清晰棕黃色細顆粒。根據(jù)陽性細胞與染色強度對免疫組織化學結(jié)果進行半定量分析。首先將染色強度打分：0分為無色，1分為淡黃色，3分為棕褐色，2分為染色強度介于1分和3分之間；隨機選擇5個高倍視野（400）計數(shù)腫瘤細胞總數(shù)200個和陽性細胞個數(shù)，得出陽性細胞百分率，0分為陰性，1分為陽性細胞≤10%，2分為＞10%～50%，3分為＞50%～75%，4分為＞75%。將每張切片著色程度得分與著色細胞百分率得分相乘最后得分：≤3分為（-），＞3分為（＋）。

1.4 統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗；相關(guān)性采用Spearman等級相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同卵巢組織中CD117和CD44的表達 卵巢漿液性囊腺癌的CD117蛋白陽性率高于卵巢交界性漿液性囊腺瘤組織和正常卵巢組織（P＜0.05）；卵巢漿液性囊腺癌的CD44表達陽性率高于正常卵巢組織（P＜0.05）。見表1。

表1 不同卵巢組織中CD117和CD44的表達Table 1 Expression of CD117and CD44in different groups（例數(shù)，%）

2.2 不同病理特征CD117、CD44的表達陽性率比較 在CD117的表達上，年齡≥55歲者CD117陽性表達率高于＜55歲者（P＜0.05）；高級別病理分級CD177陽性表達率高于低級別病理分級（P＜0.01）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者CD177陽性表達率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0.01）；FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期CD177陽性表達率高于FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期者（P＜0.01）。在CD44的表達上，年齡≥55歲者CD44陽性表達率與＜55歲者差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；高級別病理分級CD44陽性表達率高于低級別病理分級（P＜0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者CD44陽性表達率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0.01）；FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期CD44陽性表達率高于FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期者（P＜0.05）。見表2。

表2 CD117、CD44的表達與卵巢漿液性囊腺癌臨床病理特征的關(guān)系Table 2 CD117，CD44expression and clinical pathological features（例數(shù)，%）

2.3 CD117與CD44在卵巢漿液性囊腺癌中表達的相關(guān)性 由Spearman等級相關(guān)分析可知CD117的表達與CD44表達呈正相關(guān)（rs=0.421，P=0.004）。

3 討 論

卵巢惡性腫瘤是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一，其中20%為惡性上皮性卵巢腫瘤。卵巢漿液性囊腺癌占卵巢上皮性惡性腫瘤的60%［6］。當卵巢癌細胞位于卵巢內(nèi)時，其5年生存率可≥90%，而實際上＞75%的患者被發(fā)現(xiàn)時已是晚期，且腫瘤已轉(zhuǎn)移到上腹部或腹腔外轉(zhuǎn)移，5年生存率僅為20%。卵巢癌預(yù)后較差的主要原因與卵巢組織的解剖位置、患者缺少早期臨床癥狀、早期診斷手段有限等有關(guān)［7］。

尋找腫瘤發(fā)生初期時的基因改變對腫瘤的早期診斷及后續(xù)治療極其重要。本研究檢測CD117和CD44在卵巢漿液性腫瘤和正常卵巢中的表達，初步探討二者在卵巢腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中的相互關(guān)系。

3.1 CD117在卵巢漿液性腫瘤中的表達 CD117又稱c-kit，是一種酪氨酸激酶，其配體為干細胞因子，常表達于造血干細胞、生殖細胞、黑色素細胞、胃腸道Cajal細胞及其對應(yīng)腫瘤［8-10］。

目前，國內(nèi)有關(guān)CD117在卵巢癌中表達的研究鮮見報道。國外研究表明，卵巢上皮性癌中CD117陽性表達率為0%～87%［11-13］。本研究結(jié)果顯示，卵巢漿液性囊腺癌中CD117蛋白陽性表達高于卵巢交界性漿液性囊腺瘤組織和正常卵巢組織（P＜0.05）。與Schmandt等［14］報道一致。本研究結(jié)果顯示，在卵巢漿液性囊腺癌中，F(xiàn)IGO分期Ⅲ～Ⅳ期CD177陽性表達率高于FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示卵巢漿液性囊腺癌的進展與CD117蛋白表達升高相關(guān)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者相比CD117蛋白陽性表達率顯著升高，說明CD117蛋白與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切相關(guān)。卵巢漿液性囊腺癌中CD117蛋白高表達的原因目前尚不清楚，可能原因是CD117基因突變后使CD117受體二聚體形成受阻，并且使不同底物蛋白磷酸化，刺激腫瘤細胞的惡性克隆。

3.2 CD44在卵巢漿液性腫瘤中的表達 本研究結(jié)果表明，卵巢漿液性囊腺癌中CD44蛋白表達高于正常卵巢組織（P＜0.05）。CD44蛋白表達量在高級別卵巢漿液性囊腺癌中明顯高于低級別者，提示CD44蛋白表達量與FIGO分期有相關(guān)性（P＜0.05）。表明卵巢漿液性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移均與CD44密切相關(guān)，并且CD44蛋白的表達與腫瘤的生物學行為之間存在正相關(guān)，因此部分低度惡性卵巢腫瘤中亦有較高CD44表達，提示為發(fā)生惡變的重要信號之一，該指標有望成為臨床預(yù)測卵巢瘤早期惡變的一個參考指標［15］。

3.3 CD117與CD44在卵巢漿液性囊腺癌中表達的相關(guān)性 本研究相關(guān)性分析顯示CD117和CD44在卵巢漿液性囊腺癌中表達呈正相關(guān)，該結(jié)果與宋楠等［16］在胸腺上皮腫瘤中的研究結(jié)果一致。CD117和CD44蛋白的聯(lián)合表達可能在卵巢漿液性囊腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中起協(xié)同作用：CD44的表達使癌細胞容易發(fā)生細胞黏附，CD117的異常表達促進腫瘤細胞增殖和抗凋亡信號的失調(diào)，便于腫瘤的惡性克隆，多因素的綜合作用使卵巢癌的轉(zhuǎn)移更容易發(fā)生［17］。

綜上所述，CD117、CD44蛋白在卵巢漿液性囊腺癌中高表達與病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及FIGO分期密切相關(guān)，可能成為判斷預(yù)后和指導治療的一個指標。近年來，針對特異分子的靶向藥物為臨床治療腫瘤開辟了一個新的天地。相信在不久的將來它們也能為卵巢漿液性囊腺癌的治療開辟一條新途徑。

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