人毛囊干細胞體外培養纖維連接蛋白鋪層最佳濃度的實驗研究

吳 巍，段惠川，曹誼林

(上海交通大學醫學院附屬第九人民醫院整復外科，上海 200011)

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·論 著·

人毛囊干細胞體外培養纖維連接蛋白鋪層最佳濃度的實驗研究

吳 巍，段惠川，曹誼林△

(上海交通大學醫學院附屬第九人民醫院整復外科，上海 200011)

目的 探討最適合人毛囊干細胞體外培養及擴增的纖維連接蛋白(FN)鋪層濃度。方法 將新鮮FN稀釋至所需要的4個濃度：5 μg/mL、200 ng/mL、10 ng/mL、0 ng/mL。使用酶消化法分離人毛囊細胞，將原代人毛囊干細胞在不同濃度鋪層的培養皿中的細胞增值能力和克隆形成率進行統計分析，獲得最適合人毛囊干細胞體外培養的鋪層濃度。結果 接種同一樣本相同數量細胞，做克隆效率測定，在原代培養第8天做Giemsa染色，結果顯示0 ng/cm2鋪層的培養皿中克隆團小，數量少；10 ng/cm2鋪層的克隆團大，數量多；200 ng/cm2和5 μg/cm2鋪層的克隆團較小，數量不多。取10個樣本，分別對4個FN鋪層濃度的克隆效率進行統計分析，10 ng/cm2鋪層的克隆效率最高。在不同FN鋪層濃度條件下，細胞擴增能力也不同，10 ng/cm2鋪層濃度細胞擴增能力最強，與其他3個濃度比較，差異均有統計學意義(P<0.05)，200 ng/cm2與其余3個濃度差異均無統計學意義(P>0.05)。結論 10 ng/cm2的FN鋪層濃度效果最佳。

毛囊干細胞； 外根鞘； 組織工程； 纖維連接蛋白； 細胞培養

毛囊具有循環更新的能力，這種能力是由毛囊組織中的干細胞，即毛囊干細胞(HFSC)所產生[1]。有研究報道，毛囊干細胞不僅對于皮膚及其附屬結構有著再生和修復作用，還能在體外被誘導成骨、軟骨、脂肪、肌肉和神經細胞，有望在未來被應用于各類組織的修復[2-3]。但是毛囊干細胞，尤其是其在體外的培養和擴增還無特別有效的方法；……