糖尿病及糖尿病并發冠心病患者血清sP-selectin、sE-selectin 水平變化及意義

劉艷秋 高美華 李紅林 解長銀 章海飛 (青島大學醫學院免疫學教研室，青島 266071)

近年研究顯示，我國糖尿病患者已超過9 200萬，此外尚有約1.48 億屬于糖尿病前期，將有發展為糖尿病的趨勢［1，2］。糖尿病血管并發癥是糖尿病患者致死致殘的主要原因［3］。在眾多的黏附分子中，選擇素家族備受關注。選擇素在糖尿病各種血管事件如動脈粥樣硬化、血栓形成、微血管損傷的病理生理過程中起著重要作用。本文對2 型糖尿病患者血清中sP 選擇素、sE-選擇素水平變化及相關因素進行研究，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 研究對象收集2014 年1 月～2014年6 月在本院就診的患者，按照2003 年美國糖尿病協會(ADA)關于糖尿病(DM)、空腹血糖異常(IFG)、糖耐量異常(IGT)的診斷標準分為:①糖尿病前期(PDM)組32 例，男15 例，女17 例，30～77歲，平均(62.55±14.76)歲。包括空腹血糖異常(Impaired fasting glucose，IFG)，5.6 mmol/L≤空腹血糖(FPG)＜7.0 mmol/L，并且餐后2 h 血糖(P2hBG)＜7.8 mmol/L;或者糖耐量異常(Impaired glucose tolerance，IGT)，FPG ＜ 5.6 mmol/L，且7.8mmol/L≤2hPG ＜11.1 mmol/L。②2 型糖尿病組(T2DM 組)32 例，男17 例，女15 例，42～84 歲，平均(57.77± 9.95)歲。FPG ≥7.0 mmol/L 和(或)2hPG≥11.1 mmol/L。③糖尿病合并冠心病組:34 例，男性17 例，女性17 例，30 歲～84 歲平均年齡(61.33±15.06)歲。冠心病組 經Judkins 法冠狀動脈造影檢查確診為冠心病者，即至少有一支冠脈內徑狹窄≥50%，其中根據冠狀動脈造影結果，疾病史上均先有糖尿病，后出現冠心病的患者。④選取同期在本院體檢的健康者32 例為正常對照組(NC 組)，男15 例，女17 例，40～73 歲，平均(55.73±9.97)歲。排除各種急慢性感染、甲狀腺功能異常、肝腎功能疾病和心功能不全、腫瘤、風濕等。

1.2 方法 采用Olympus(AU680)型自動生化分析儀測定空腹血清TG、CHOL、HDL-C LDL-C、FPG、HbA1C 含量，采用(MAGLUMI2000)全自動化學發光儀測定空腹血清FINS 含量，血清sP-選擇素、sE-選擇素用酶聯法。試劑盒是由美國Rapidbio(RB)公司提供，操作按說明書。主要儀器包括:北京普朗公司的DNM-9602 型酶標儀和天津通利信達儀器廠生產的DH3600A 型恒溫箱。

1.3 統計學處理 采用SPSS19.0 統計軟件對數據進行分析和處理。經過正態性檢驗，各組檢測結果均符合正態分布，以±s 表示;組間比較t 檢驗;各指標間相關性采用Pearson 相關分析。

2 結果

2.1 各觀察組例數、性別比、年齡、DBP、CHO、LDL均無統計學差異(P ＞0.05)。糖尿病前期組HbA1C、FINS、HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin 高于正常對照(P ＜0.01～0.05);單純糖尿病組SBP、FBG、TG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin 顯著高于正常對照組(P ＜0.01);單純糖尿病組FBG、HbA1c、FINS、HOMA-IR 高于糖尿病前期組(P ＜0.01～0.05);單純糖尿病組HDL-C 顯著低于健康對照組和糖尿病前期組(P ＜0.01);糖尿病合并冠心病組BMI、SBP、FPG、TG、HbA1C、FINS、HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin 均高于正常對照組(P＜0.01～0.05);糖尿病合并冠心病組BMI、SBP、FBG、TG、HbA1C、FINS、HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin 高于糖尿病前期組(P ＜0.01～0.05);糖尿病合并冠心病組BMI、FBG、FINS、HOMA-IR、sP-selectin 高于單純糖尿病組(P ＜0.01～0.05);糖尿病合并冠心病組HDL-C 低于健康對照組和糖尿病前期組(P ＜0.01～0.05)。見表1、2。

表1 各組觀察指標的比較(±s)Tab.1 Comparison with levels of each observation indexes (±s)

表1 各組觀察指標的比較(±s)Tab.1 Comparison with levels of each observation indexes (±s)

Note:1)vs NC P ＜0.01，2)vs NC P ＜0.05，3)vs PDM P ＜0.01，4)vs PDM P ＜0.05，5)vs DM P ＜0.01.

表2 各組空腹胰島素、胰島素抵抗指數、sP-selectin、sE-selectin 水平的比較(±s)Tab.2 Comparison with each observation levels of FINS，HOMA-IR，sE-selectin and sP-selectin(±s)

表2 各組空腹胰島素、胰島素抵抗指數、sP-selectin、sE-selectin 水平的比較(±s)Tab.2 Comparison with each observation levels of FINS，HOMA-IR，sE-selectin and sP-selectin(±s)

Note:1)vs NC P ＜0.01，2)vs NC P ＜0.05，3)vs PDM P ＜0.01，4)vs PDM P ＜0.05，5)vs DM P ＜0.01.

表3 sP-selectin、sE-selectin 與臨床資料的相關性Tab.3 Correlation between sP-selectin，sE-selectin and clinical data

2.2 Pearson 相關性分析結果 血清sP-selectin 與FBG、FINS、TG、HbA1C、HOMA-IR 呈正相關(P 均＜0.01);血清sE-selectin 與FBG、FINS、TG、HbA1C、HOMA-IR 呈正相關(P 均值為＜0.01)，與HDL-C負相關(P 均 ＜0.05)，sP-selectin 和sE-selectin 與BMI、SBP、DBP、CHO、LDL-C 無相關性(P 均值為＞0.05)。見表3。

2.3 sP-selectin 與sE-selectin 相關性分析(r=0.592 3，P ＜0.001)，見圖1。

3 討論

糖尿病是以血循環中葡萄糖水平持續升高為基本特征的臨床代謝綜合征，其主要特征為胰島素抵抗和(或)胰島素分泌不足。胰島素抵抗作為代謝綜合征的核心環節，可進一步誘導機體產生葡萄糖調節受損、高血壓、血脂紊亂等癥狀［4］。

近幾年來研究發現，2 型糖尿病微血管及大血管并發癥發生發展過程中慢性炎癥起重要作用，炎癥論被提了出來［5］。免疫調節因子在糖尿病尤其是糖尿病并發癥發病機制中所起的作用正逐漸為人們所關注［6］。研究發現，黏附分子家族的Ca2+依賴外源凝集素一族P-選擇素和E-選擇素在感染、創傷、缺血再灌注等病理生理過程中，特別是在炎癥早期發展過程中起重要作用［7］。

圖1 sP-selectin 與sE-selectin 之間的相關性Fig.1 Correlation between sP-selectin and sE-selectin

P-選擇素即CD62P，是一種高糖基化的糖蛋白，又被稱為跨膜單鏈糖蛋白，與E-選擇素及L-選擇素同屬于選擇素家族的成員。P-選擇素是相對分子質量約140 KU 的跨膜蛋白，是凝血酶活化的血小板和血管內皮細胞上的白細胞黏附受體。它包含1 個氨基末端的碳水化合物識別域、表皮生長因子、9 個重復區域、1 個跨膜結構域和胞質尾區。P-選擇素有兩種，即單體可溶性P-選擇素(TPS)和膜P-選擇素(MPS)［8］。近年來，隨著分子生物學發展，對P-選擇素的結構、功能、調控及病理生理作用進行了較為深入的研究。查閱文獻發現［9］，P-選擇素的表達受體內外許多調節因子的影響，靜息時，內皮細胞上的P-選擇素含量甚微，當受到炎性反應因子刺激后，P-選擇素的表達顯著增加。Gokularishnam 等［10］研究發現，胰島素抵抗的患者胰島素水平增高，同時伴隨血漿P-選擇素水平增高;孫曉軍等研究發現［11］，檢測可溶性P-選擇素，可作為2 型DM 病情判定以及治療效果觀察。Yngen 等［12］也進行了相關研究，他認為胰島素抵抗可以促進P-選擇素高表達，同時P-選擇素高表達也加重了胰島素抵抗，促進血小板活化;高血糖對脂肪代謝具有調節作用，血糖升高時常伴有高膽固醇血癥及高三酰甘油血癥，研究證實高膽固醇血癥可引起血漿P-選擇素水平升高，并且與LDL 具有相關性［13］。有研究證實P-選擇素在急性心肌梗死疾病的發生發展過程中擔負著重要角色［14］。冠心病發生涉及血管內皮功能、血小板、凝血、纖溶因子等一系列生物分子的參與。冠心病患者P-選擇素水平明顯升高，和冠狀動脈病變程度相關，可預測冠心病嚴重性［15］。糖尿病已被大量流行病學調查和臨床研究證實是心血管病變的危險因素。近年來隨著血栓形成和血小板聚集學說的深入研究，給冠心病的病因研究及早期預防和治療帶來了革命性的影響。P-選擇素作為上述學說的重要標志物和介導物［16，17］。本研究結果顯示sP-選擇素與FPG、FINS、HBA1C 呈高度正相關，提示血清sP-選擇素隨著血糖和胰島素的水平升高而升高。糖尿病并發冠心病組患者血清sP-選擇素水平明顯高于糖尿病前期和單純糖尿病組患者;血清sP-選擇素水平與HOMA-IR 呈高度正相關，提示血清sP-選擇素水平與胰島素抵抗密切相關，血清sP-選擇素水平的增高是2 型糖尿病及其并發冠心病發生發展的高危因素之一。

E-選擇素屬于人類白細胞分化抗原CD62E，為細胞因子激活血管內皮細胞表達的110 kD 跨膜糖蛋白，其相對分子量為115 000，由一系列蛋白區域片段構成，其結構的復雜性決定了功能的瞬時性和特異性。E-選擇素(LECAM-2、ELAM-1)有一個末端唾液酸殘基和至少一個巖藻糖殘基。對E 選擇素糖識別的結構調查顯示，有許多小分子和大分子的多糖結合到E 選擇素上，如唾液酸Lewisx 四糖域(α2-3)、半乳糖(β1-4)、葡萄糖。此外，對E 選擇素的生化結構進行觀察，確認E 選擇素含有的唾液酸化Lewisa 抗原表位的寡糖，是外源凝集素識別的最小低聚糖［18］。E-selectin 是黏附分子成員。黏附分子是一類調節細胞與細胞間、細胞與細胞外基質相互識別、相互黏著及信號傳遞，起黏附作用的糖蛋白分子。在細胞的生長發育、免疫調節、炎癥反應、組織修復和腫瘤轉移等生理、病理過程中起重要作用。血管內皮細胞、白細胞及其他多種細胞可表達黏附分子，細胞表面的黏附分子脫落后進入血液，成為可溶性黏附分子，二者成平行關系。有研究顯示，Eselectin 與心腦血管事件的發生相關［19］，許多研究證明，2 型糖尿病患者，甚至糖耐量降低，其血清各種黏附分子水平包括sE-selectin 顯著高于正常人群。Matsumoto 等［20］的研究發現，糖尿病合并大血管、微血管病變組血清sE-selectin 水平均明顯高于無血管病變組。sE-選擇濃度可以是一種生物標記，用于指示隨后的發展代謝性疾病，尤其是心血管疾?。?1］。E-選擇素及可溶性E 選擇素在全身性炎癥反應狀態下水平升高［22］，本研究結果顯示sE-選擇素與FPG、FINS、HBA1C 呈正相關，糖尿病并發冠心病組患者血清sE-選擇素水平高于糖尿病前期組，血清sE-選擇素水平與HOMA-IR 呈正相關，提示血清sE-選擇素參與胰島素抵抗，血清sE-選擇素水平的增高也是2 型糖尿病及其并發冠心病發生發展的高危因素之一。

綜上所述，sP-selectin、sE-selectin 與糖尿病的發生有關，同時在糖尿病的發生與發展中起重要作用。這二者高度相關(r=0.5923，P ＜0.001)，sP-selectin和sE-selectin 作為血小板、內皮細胞活化的標志物，在糖尿病前期階段就已經明顯升高，并隨著糖代謝紊亂程度的加重而逐漸升高。因此，有效監測sPselectin 和sE-selectin 對早期血管病變的診斷，對預防大血管并發癥的發生具有重要意義。

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