抗Dia合并抗E抗體致交叉配血不合的臨床分析

劉永霞

（西城區展覽路醫院，北京 100044）

抗Dia合并抗E抗體致交叉配血不合的臨床分析

劉永霞

（西城區展覽路醫院，北京 100044）

目的探討交叉配血中抗Dia合并抗E抗體致配血不合的原因。方法對該院1例因抗Dia合并抗E抗體致多次配血不合的患者進行分析。通過血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗、不規則抗體篩查、吸收放散實驗來確定患者的血型、可能的不規則抗體、細胞譜反應格局。結果患者血型正定型：抗A抗體（－）、抗B抗體（－）；反定型：Ac（＋＋＋＋）、Bc（＋＋＋＋）、RBC（－）、Oc（－）；Rh血型定型：抗c抗體（－）、抗C抗體（＋＋＋＋）、抗D抗體（＋＋＋＋）、抗e抗體（＋＋＋＋）、抗E抗體（－）。直接抗人球蛋白試驗（－）。患者血清中含有抗E、抗c抗體。結論患者血清中的不規則抗體是導致交叉配血不合的重要原因。

交叉配血； 抗Dia抗體； 抗E抗體

1 資料與方法

1.1 一般資料 患者，男，65歲，入院時的主訴為“反復嘔血，黑便15年，再發1d”。患者入院1d前患者出現心悸、頭昏、牙齦出血、氣促、腹痛等癥狀，同時排黑便約300mL，嘔血約200mL，無發熱，無暈厥。在患者當地醫院檢查，血紅蛋白（Hb）20g/L，給予“奧曲肽”治療病癥無好轉，然后轉入本院急診科，急診科以“肝硬化失代償期、上消化道出血”收入本院消化內科。患者睡眠、精神、飲食欠佳，大便情況如上所述。既往有多次輸血史，輸血液制品（包括洗滌紅細胞在內）均出現輸血不良反應，如寒戰、畏寒、Hb尿、皮疹等。查體情況如下：脈搏90次/分，體溫36.7℃，舒張壓58mm Hg、舒張壓102mm Hg，呼吸22次/分，眼瞼膜和全身皮膚黏膜蒼白，表現出極重度貧血貌。血常規檢查顯示，Hb 15g/L，RBC 0.85×1012/L，血細胞比容（HCT）8%。潛血試驗（＋＋）。臨床常采用輸血來改善患者的貧血癥狀。本科室對該患者血樣進行正、反定型的血型鑒定，結果顯示該患者紅細胞血型抗體篩選試驗Ⅰ號表現為陰性，Ⅱ、Ⅲ號均表現為陽性，血型O型，為Rh（D）陽性。對患者進行交叉配血試驗時發現，采用凝聚胺配血法時出現主側凝集現象，然而次側并沒有出現凝集現象，且進行鹽水配血法試驗的結果為陰性，與多個獻血者交叉配血均不合。

1.2 試劑 譜細胞、篩選細、抗A、B、D抗體標準血清以及抗人球蛋白試劑均由上海血液生物醫藥有限責任公司生產；凝聚胺試劑盒采用珠海貝索生物技術有限公司生產產品；血型不規則抗體篩選卡、Rh血型定型試劑卡均由長春博迅生物技術有限公司生產。本實驗自制A、B和O型的RBC，自制過程如下：用氯化鈉注射液將3個同型獻血者的血液進行3次洗滌，將壓積紅細胞的取出，采用0.9%氧化鈉生理鹽水配制3%～5%RBC懸液。

1.3 方法 （1）血型鑒定分別采用玻片法和試管法鑒定ABO血型的正定型反定型，采用卡式法對Rh血型進行鑒定。（2）直接抗人球蛋白試驗（ICT）按《輸血科（血庫）臨床技術操作規程與標準化管理實用全書》內容進行操作［5］。（3）對不規則抗體篩查利用微柱凝膠法進行試驗，依據微柱凝膠檢測卡所帶說明書進行操作。結果分析：用排除法確定陰性結果，可能包含法對陽性結果進行確定。（4）吸收放散試驗：對標準的CcDee、CCDEe紅細胞和標準的O型利用生理鹽水進行3次洗滌后與等量的患者血清混合，置37℃的恒溫箱中使吸收1h，每隔10 min搖動試管1次，使RBC對抗體進行充分吸收，對上層血清進行離心上層即為吸收后血清；將吸收的RBC采用37℃生理鹽水進行3次洗滌，采取乙醚放散法制備放散液。將患者放散液、血清吸收后的血清分別與自身RBC反應，進行ICT，與譜細胞在鹽水介質（NS）、凝聚胺（Poly）中反應，按各自的說明書進行操作。

2 結 果

2.1 血型鑒定 患者血型，Rh血型定型：抗D（＋＋＋＋）、抗C（＋＋＋＋）、抗c（－）、抗E（－）、抗e（＋＋＋＋）；正定型：抗A（－）、抗B（－），反定型：Ac（＋＋＋＋）、Bc（＋＋＋＋）、Oc（－）、RBC（－）。

2.2 DCT檢測結果為陰性。

2.3 不規則抗體篩查 從篩檢RBC與患者血清反應的格局初步判斷患者血清中可能存在著抗－c和抗－E抗體，見附表1（見《國際檢驗醫學雜志》網站主頁“論文附件”）。

2.4 吸收放散試驗 譜細胞中含有c、E抗原的RBC與患者血清在NS中出現陰性結果，而在凝聚胺法和抗人球蛋白法中均出現陽性結果，見表1。因此患者血清中含有IgG性質的抗－c和抗－E抗體。

2.5 輸血及效果 本科室對患者選用O型紅細胞懸液和Rh CCDee進行交叉配血操作，凝聚胺法和鹽水配血法主次側均無凝集和溶血現象。患者輸入4U紅細胞懸液并未出現輸血不良反應，且HCT由8%上升到15%，Hb由15g/L上升到40g/L，RBC由0.85×1012/L上升到1.65×1012/L。

3 結 論

接受輸血者自身血清中存在的不規則抗體是致使交叉配血出現不合現象的一個主要的原因［6］。除ABO血型系統以外的其他血型系統引發的交叉配血不合往往是由于妊娠或多次輸血是造成患者體內產生與供血者紅細胞相結合的IgG抗體［7］，使患者產生遲發型免疫反應。自身免疫性疾病患者會出現因自身抗體的原因導致交叉配血不合，在此種情況下，主側和次側均可凝集，出現這種情況是應盡量避免輸血。藥物、冷凝集素以及血漿蛋白紊亂等會使紅細胞聚集，使交叉配血結果受到影響，造成交叉配血不合。此種情況表現為主側凝集，可利用生理鹽水對紅細胞進行洗滌來消除影響。

交叉配血出現不合現象的原因，可以分為免疫性和非免疫兩大類［8］。免疫性致使出現交叉配血不合現象表現為主側和次側均凝集。血清蛋白紊亂、清蛋白和球蛋白比例倒置或部分藥品破壞紅細胞表面的zeta電位會引起非免疫性交叉配血不合［9］。非免疫原因導致的交叉配血不合主要表現為主側凝集。

當交叉配血試驗中出現有不配合現象時，首先應考慮供血者和受血者的ABO定型是否有錯，且必要時進行抗體篩查和Rh血型鑒定試驗。其次，應注意是否存在特異性未知的同種抗體或是特異性同種抗體。人類紅細胞膜上抗原性最強的兩種血型系統為ABO和Rh血型。Rh抗原中以D抗原為最強，僅次于A和B抗原的抗原強度，接下來依次為E、C、c、e［10］。Rh抗體中除天然的抗－C和抗－E外，多由外界的RBC免疫刺激所產生，其中多數為IgG。免疫早期也會出現少部分的IgM型。本例患者Rh血型為CCDee，缺乏c和E抗原，在長期的輸血過程中，由于含有c和E抗原的RBC被輸入患者體內，其自身機體產生了免疫性抗c和抗E抗體，當再次輸血時，就會出現交叉配血不合現象。在臨床治療中，當出現配血不合情況時，不能簡單地輸注O型洗滌RBC，因為，此種血液只對ABO血型系統具有較高的安全性，但對其他血型系統會產生免疫性血管外溶血性輸血反應。

綜上所述，由于血清中RBC抗原的復雜性和不規則抗體，建議對反復輸血患者進行Rh系統5種抗原配型和不規則抗體篩查試驗，以保證輸血的有效和安全。

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Case analysis of incompatibility in blood crossmatching induced by anti－Dia and anti－E antibodies

LiuYongxia
（Zhanlanlu Hospital of Xicheng District，Beijing100044，China）

ObjectiveTo investigate the reason of anti－Dia combined with anti－E antibodies inducing incompatibility in blood crossmatching.MethodsRetrospectively analyse a case of patient treated in the hospital，whose blood crossmatching failed for several times.Through blood typing，direct Coombs test，irregular antibody screening，adsorption and elution experiments to determine the patient′s blood type，possible irregular antibodies，cell spectral response pattern.ResultsForward blood typing：anti－A antibody（－），anti－B antibodies（－）；Reverse blood typing：Ac（＋＋＋＋），Bc（＋＋＋＋），RBC（－），Oc（－）；Rh blood grouping：anti－c antibody（－），anti－C antibody（＋＋＋＋），anti－D antibody（＋＋＋＋），anti－e antibody（＋＋＋＋），anti－E antibody（－），direct Coombs test（－）.Patient′s serum contained anti－E and anti－c antibodies.ConclusionIrregular antibodies in the serum of patients is an important cause of crossmatch discord.

crossmatching blood； anti－Dia antibodies； anti－E antibodies交叉配血是確定能否輸血的重要依據，在血型鑒定的基礎上，以交叉配血試驗來進一步證實供血者和受血者之間是否存在血型不合的問題，以保證受血者的輸血安全。進行交叉配血試驗時，兩側均不凝集可輸血；若獻血者紅細胞與受血者血清主側不發生凝集，但是次側凝集時，在必要情況下可慢速、少量輸血［1］；若獻血者紅細胞與受血者血清主側發生凝集就必須禁止輸血。導致交叉配血不合的原因主要有：受血者自身血清中存在免疫性疾病產生的抗體或是由于妊娠、反復輸血等產生不規則抗體；藥物、冷凝集素以及血漿蛋白紊亂等可致使紅細胞出現聚集現象，并對交叉配血結果產生干擾，導致交叉配血出現不合［2－4］。筆者回顧性分析了本院1例因抗－Dia合并抗E抗體致配血出現多次不合的患者，并對原因進行分析，以有效避免因交叉配血不合而導致的輸血治療延誤。

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.035

A

1673－4130（2015）03－0369－02

2014－08－15）

劉永霞，女，副主任檢驗醫師，主要從事臨床輸血與檢驗的研究。