微柱凝膠法檢出AxB亞型1例報告

姚文娟，周 軍，陳 琪

（湖北醫藥學院附屬人民醫院輸血科，湖北十堰442000）

·個案與短篇·

微柱凝膠法檢出AxB亞型1例報告

姚文娟，周 軍△，陳 琪

（湖北醫藥學院附屬人民醫院輸血科，湖北十堰442000）

白血病患者入院輸血，交叉配血時復查血型，鑒定血型時正反定型不符，為確保輸血安全準確鑒定血型，運用了血型血清學與分子生物學檢測方法進行鑒定，結果為AxB亞型所致，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 患者來院 本院住院患者。

1.2 儀器與試劑 BaSo2005－1離心機、FYQ免疫微柱孵育機、血型血清學用離心機TD－3A。實驗所用人源性抗－A血清、抗－B、抗－AB、抗－H血清以及抗人球蛋白試劑均由上海市血液中心生產；ABO、RHD血型定型檢測卡（單克隆抗體）交叉配血卡等微柱凝膠卡和不規則抗體篩選細胞由長春博訊生物技術有限公司提供；反定型用A型紅細胞（Ae）、B型紅細胞（Be）、0型紅細胞（Oe）、自身紅細胞（ze）和均由本實驗室自制。

1.3 方法

1.3.1 血型血清學試驗方法 首先排除人為因素，重新采集血液樣本鑒定血型，采用試管法和微柱凝膠卡法常規檢測ABO血型和不規則抗體，并進一步做吸收放散試驗；在此期間嚴格核對試劑有效期、離心機轉速、時間和離心力，檢查其他器材有無污染，嚴格按照操作規程和注意事項［2］進行操作。

1.3.2 分子生物學實驗 送往上海血液中心檢測。

2 結 果

2.1 微柱凝膠卡法血型鑒定 正定型為B型，反定型為AB型。由于患者屬白血病患者，應考慮會影響到紅細胞凝集的因素，因此在做微柱凝膠卡法血型鑒定前，先利用0.9%生理鹽水將該患者EDTA抗凝紅細胞洗4次，配置成0.8%的紅細胞懸液，再進行試驗。ABO、RhD血型定型檢測卡（單克隆抗體）正反定型結果不一致，不能直接確定血型。由于所有試驗嚴格按照操作規程進行，排除了試劑和人為操作因素，結果可信，該患者血型無法鑒定。由于我科試劑有限，重新采集標本送市中心血站檢測，見表2～4（見《國際檢驗醫學雜志》網站主頁“論文附件”）。

2.2 交叉配血試驗結果 同時取3份B型獻血員血樣和該患者血樣進行交叉配血試驗，結果顯示主側不凝集次側弱凝集；分別與3個O型獻血員血樣做交叉配血試驗次側均呈強凝集現象；另取3人份AB型獻血員血樣做交叉配血試驗，主次側均不凝集，患者血樣自身對照無凝集，抗體篩查及直接抗球蛋白試驗均呈陰性。由此判斷該患者血型非B型，有可能血型為：（1）AB型（A抗原減弱）；（2）AxB亞型。

2.3 分子生物學結果 通過把該標本送往上海血液中心，抽取標本白膜層進行分子生物學測序證實確實存在A基因。進一步證實為AxB亞型。

3 討 論

臨床輸血安全的保障依賴著ABO血型鑒定的準確性，血型鑒定一旦出現差錯，將嚴重威脅患者的生命安全［3］。當發現血型正反定型結果不一致時，筆者第一時間查找原因，在排除人為操作及試劑因素后，結合臨床以及輔助血清學試驗做進一步鑒定。

患者本人為粒細胞性白血患者，易導致弱抗原或抗原缺失。查閱相關資料證明粒細胞性白血病時由于H轉移酶缺乏或合成受抑制，使血型抗原減弱。患者血型正反定型結果不一致可能因為血型抗原減弱引起［4］，但不能排除亞型的可能。

ABO血型亞型又稱ABO變異型，經血型血清學檢查試驗，顯示正反定型不符以及抗原性減弱為主要特征的多種表現型。此患者常規血型鑒定ABO血型正定為B型，反定型為AB型，而在交叉配血時發現該患者與多個B型獻血員配血次側弱凝集；與O型血樣配血試驗次側凝集；與AB型血樣配血主次側均不凝集；患者血樣自身對照無凝集；抗體篩查及直接抗球蛋白試驗均呈陰性。說明患者血型非B型，有可能血型為：（1）AB型（A抗原減弱），（2）AxB亞型。

本例患者血清學試驗均顯示B抗原正常，A抗原明顯減弱或陰性而吸收放射試驗論證患者紅細胞上存在1＋A抗原，抗－A人源血清不發生凝集，與O型人的抗A1B發生凝集符合AxB亞型血清學特征，提示為亞型。標本送往上海血液中心進行分子生物學測序證實確實存在A基因，進一步證實為AxB亞型。AxB亞型較為罕見，在常規血型鑒定時很容易被定錯血型，引起交叉配血不合，若輸血科人員疏忽大意可造成嚴重的輸血事故，因此常規ABO血型定型應該做正反定型，兩種血型鑒定結果相互驗證可以防止某些A、B亞型的漏檢及其錯誤結果，使血型鑒定結果更為準確可靠，從而保證臨床輸血安全。對于ABO正反定型不符的疑難血型，除了做血型血清學檢測外，還應進一步通過測序做分子生物學檢測，兩者相結合正確鑒定血型。

［1］胡麗華.臨床輸血學檢驗［M］.北京：人民衛生出版社，2012：19.

［2］范瑾，張玨.ABO血型鑒定中正反定型不一致時的分析與探討［J］.上海醫藥，2013，34（17）：37－39.

［3］范瑾.輸血前不規則抗體篩查的臨床意義［J］.上海醫藥，2012，33（7）：24－25.

［4］曹奎杰，何鳴鏑，劉峰，等.再障引起A型血型抗原減弱1例［J］.臨床血液學雜志：輸血與檢驗版，2007，4（4）：187－188.

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.073

C

1673－4130（2015）03－0432－02

2014－09－25）

△通訊作者，E－mail：363615397＠qq.com。