消化系統惡性腫瘤患者外周血T淋巴細胞亞群水平變化分析及意義探討

鄭 陽 陳 濤

遼寧省腫瘤醫院檢驗科(沈陽110042)

消化系統惡性腫瘤患者外周血T淋巴細胞亞群水平變化分析及意義探討

鄭 陽 陳 濤

遼寧省腫瘤醫院檢驗科(沈陽110042)

目的：分析外周血T淋巴細胞亞群在消化系統惡性腫瘤患者中的表達，并探討其臨床意義。方法：選擇經病理學確診為消化系統惡性腫瘤患者共125例，為觀察組(n=125)，另選擇同時期125例健康體檢者，為對照組(n=125)；對比2組患者外周血T淋巴細胞亞群水平變化情況。結果：相對于對照組，觀察組外周血抗凝血 CD3+、CD4+細胞陽性率和CD4+/CD8+比值均顯著降低(P<0.05或P<0.01)，但CD8+細胞陽性率顯著提高(P<0.05)。結論：消化系統惡性腫瘤患者外周血T淋巴細胞亞群水平的顯著變化表明患者的細胞免疫功能處于抑制狀態，對該病的診斷治療、病情預后、療效判定均有一定參考作用。

消化系統惡性腫瘤在臨床上比較常見，其發生、發展和預后受多種因素的綜合影響。研究發現，患者的機體細胞免疫功能狀態和腫瘤之間存在著較大關聯[1]。外周血T淋巴細胞亞群是機體的重要效應細胞，在免疫應答中擔任著重要角色，其水平變化是評估惡性腫瘤與免疫相關性疾病的有效方法之一[2]。通過對T淋巴細胞亞群水平變化的動態觀察能夠比較準確地反映患者的機體免疫功能狀態。本研究對照研究了消化系統惡性腫瘤患者和健康體檢者的外周血T淋巴細胞亞群水平變化情況，現將有關資料和數據整理報告如下。

資料和方法

1 一般資料 選擇2009年1月至2011年12月于我院接受治療的消化系統惡性腫瘤患者125例(觀察組)。其中，男性78例，女性47例；年齡35～79歲，平均54.62±3.58歲；包括食道癌21例，胃癌42例，腸癌34例，肝癌28例。同時，選擇同時期的健康體檢者125位做對照組。其中，男性77例，女性48例；年齡36～80歲，平均54.88±3.27歲。2組患者在性別、年齡等一般資料方面的差異不顯著(P>0.05)，具有可比性。

2 研究方法 試劑采用衛生部武漢生物制品研究所生產的凍干抗體致敏紅細胞花環(McAb 血球)試劑，WuT3、WuT4、WuT8各0.5 ml。2組患者均空腹采集靜脈血2～3 ml，以乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA-K2)抗凝，并用密度梯度離心法獲得外周血單個核細胞(PBMC)或者混合白細胞，而后以 McAb-A-E 直接法對T淋巴細胞亞群進行檢查，根據檢查結果計算淋巴細胞各細胞陽性率。取25μl 20% 新生小牛血清的無鈣、鎂Hank’S 液懸浮的淋巴細胞懸液,并選擇25μl致敏紅細胞試劑，將兩者混勻，于常溫環境下(18～26℃)靜置10 min，而后將混合液放入離心機以300 rpm離心5 min，隨后在4℃恒溫環境下靜置30 min。用帶吸頭的移液器 25μl 容積吹吸混合懸液 15 次；取 10μl混合懸液按血片法推制面積 8～10cm2的細胞涂片，自然干燥后用改良姬姆薩染色法染色，高倍鏡計數。

3 陽性判定方法 陽性細胞，淋巴細胞周圍黏附≥3個紅細胞；陰性細胞，淋巴細胞周圍未黏附紅細胞。淋巴細胞周圍黏附<3個紅細胞不計數。計數時，選取細胞涂片從頭至尾的2/6～4/6 之間的至少2區區域共計數200個細胞，并計算出花環形成細胞的百分率。

結 果

觀察組相對于對照組在外周血抗凝血 CD3+、CD4+細胞陽性率和CD4+/CD8+比值均顯著降低(P<0.05或P<0.01)，但CD8+細胞陽性率顯著提高(P<0.05),見附表。

討 論

根據現代腫瘤免疫學的最新研究，腫瘤的發生、發展和機體的免疫功能狀態存在著非常密切的關聯。其中，細胞免疫是抗腫瘤免疫的重要方式，而T淋巴細胞(胸腺依賴性淋巴細胞)則是細胞免疫的關鍵構成。T淋巴細胞具有免疫監視功能，能夠有效地識別腫瘤細胞，待腫瘤細胞刺激T淋巴細胞之后，T淋巴細胞能夠轉化為可以攻擊并殺傷腫瘤細胞的致敏淋巴細胞。因此，免疫系統功能狀態是否正常，與腫瘤的發生、發展、預后存在著直接關聯。

附表 兩組外周血T淋巴細胞亞群水平變化情況比較

注：與觀察組對應內容比較，*P<0.05或P<0.01；與觀察組CD4+/CD8+比值比較，ΔP<0.05

機體免疫系統的功能狀態在健康時處于相對平衡、穩定的狀態。有報道[3]指出，腫瘤患者的CD4+/CD8+比值能夠敏感反映出機體免疫功能紊亂情況。具體而言，若CD4+/CD8+比值降低或者CD4+/CD8+比值倒置，則可以顯著提示細胞免疫功能抑制。同時，另有報道[4]指出，腫瘤的病變程度與CD4+/CD8+比值的下降程度、CD4+細胞的降低水平存在著密切關系。陳莉等[5]采用流式細胞分析法對123例消化系統腫瘤患者外周血T淋巴細胞亞群及NK細胞進行檢測，并與35例健康對照組比較，結果顯示，消化系統各腫瘤組患者外周血總T細胞CD3+、T4細胞(CD3+CD4+)、NK細胞百分率下降(P<0.01)，T8細胞百分比顯著提高(P<0.05)，T4細胞/T8細胞(CD3+CD4+/CD3+CD8+)比值下降；研究認為，檢測消化系統腫瘤患者外周血T淋巴細胞亞群和NK細胞水平能夠對患者的細胞免疫功能評估，并對抗腫瘤治療的療效進行監測、對預后準確評估。姚伯程等[6]采用實用McAb-A-E直接法對72例消化系統惡性腫瘤患者、37例健康者的外周血抗凝血 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值等進行檢驗，結果顯示，惡性腫瘤組的上述各指標和健康對照組、正常值對比差異顯著(P<0.05)。該結果提示消化系統惡性腫瘤患者的細胞免疫功能處于抑制狀態，對該病的診斷治療、病情預后、療效判定均有較大參考作用。在研究中，消化系統惡性腫瘤患者的CD8+陽性率較對照組顯著升高、CD4+/CD8+比值較對照組顯著降低，提示患者免疫系統的正常功能受到明顯抑制。CD8+細胞便是殺傷T細胞(TC)。在腫瘤早期，病變部位尚未累及其他組織系統，機體為了增強自己的腫瘤免疫水平，會通過減少CD8+細胞的方式來實現該目標[7]。若機體的其他組織系統受到腫瘤侵襲，則CD8+細胞會在腫瘤發展過程中不斷增多，削弱了機體免疫功能。總之，本研究結果表明消化系統惡性腫瘤患者外周血T淋巴細胞亞群水平與細胞免疫功能存在顯著關聯，研究消化系統惡性腫瘤患者的T淋巴細胞亞群異常分布，對該病的診斷治療、病情預后、療效判定均有一定參考作用。

[1] 隋雪梅，鄧之奎，曹維克，等.114 例癌癥患者外周血T淋巴細胞亞群水平及其臨床意義[J].現代醫學，2011，39(6)：720-721.

[2] 朱小麗.外周血T淋巴細胞亞群檢測在惡性腫瘤中的價值[J].醫藥論壇雜志，2011，32(1)：83-84.

[3] 江 虹，李菊湘.T淋巴細胞亞群在惡性腫瘤患者外周血中的變化[J].檢驗醫學與臨床，2010，7(13)：1361-1362.

[4] 陳佳琦，金 晶，姚小敏，等，惡性腫瘤患者外周血淋巴細胞亞群分析[J].中國衛生檢驗雜志，2013，23(6)：1491-1492，1501.

[5] 陳 莉，吳麗娟，胡宗海，等.消化系統腫瘤患者外周血T淋巴細胞亞群及NK細胞分析與臨床意義[J].國際檢驗醫學雜志，2011，32(20)：2306-2307.

[6] 姚伯程，田文斌，趙曉玲，等.消化系統惡性腫瘤患者細胞免疫功能分析及其臨床意義[J].甘肅醫藥，2011，30(5)：259-261.

[7] 丁涵露，王 莉.人BAFF-R-IgG4mut融合蛋白對BXSB狼瘡鼠CD4+T細胞增殖活性的影響[J].四川醫學，2011,32(8)：1157-1158.

(收稿：2014-11-01)

消化系統腫瘤/診斷 T淋巴細胞 預后

R735

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.04.003