梗舒膠囊活血化瘀實驗研究*

虢紅梅

陜西新藥技術開發(fā)中心(西安710075)

梗舒膠囊活血化瘀實驗研究*

虢紅梅

陜西新藥技術開發(fā)中心(西安710075)

目的：通過不同的試驗方法和動物模型對梗舒膠囊的功能主治進行驗證，為臨床合理用藥提供依據。方法：采用測定血瘀大鼠血小板聚集率和粘附率的方法，觀察梗舒膠囊抗血小板聚集性和粘附性作用；采用大鼠頸總動脈—頸外靜脈血流旁路血栓形成的方法，觀察了其體內抗血栓作用；采用大鼠體外血栓形成試驗的方法，觀察了其體外抗血栓作用。結果：梗舒膠囊可顯著降低實驗性急性血瘀證大鼠血小板的聚集性和粘附性(P<0.05)；可明顯抑制大鼠頸總動脈—頸外靜脈血流旁路血栓形成(P<0.01)；可明顯抑制大鼠體外血栓形成(P<0.01)。結論：梗舒膠囊具有抗血小板聚集及抗血栓作用。

中風，又名卒中，包括現代醫(yī)學中的腦梗塞(腦血栓形成，腦栓塞)，短暫性腦缺血發(fā)作等，與癌癥、心血管病同為目前人類的三大最常見的死亡原因。隨著現代醫(yī)學的進步，搶救存活率顯著提高，但有后遺癥和功能障礙的病人亦隨之增多，2/3的人中風后致殘，生活不能自理，需要人照顧。因此，研究如何降低及減輕中風后遺癥的發(fā)生，最大程度的降低及減輕后遺癥患者的致殘，具有一定的臨床意義。梗舒膠囊是選用經典驗方研制而成的新藥，對治療腦血栓所致的半身不遂，口眼歪斜等有獨到之處。

1 材 料 1.1 樣 品 梗舒膠囊(0.45g/粒)內容物呈棕色粉末狀，1g約相當于生藥5.1g，本單位自研，批號101125，實驗時以蒸餾水配制各劑量濃度； 維腦路通片，山東兗州市大禹制藥有限責任公司產品，批號 110120；鹽酸川芎嗪注射液，北京第四制藥廠出品，批號：1106012；鹽酸腎上腺素注射液，武漢制藥(集團)股份有限公司產品，批號：1107681，普利生ADP誘導劑，批號20110507D；戊巴比妥鈉，中國醫(yī)藥(集團)上海化學試劑公司，批號F20110215。

1.2 實驗動物 SD大鼠(體重200～240g)，由西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心提供，許可證號：SCXK(陜)2007-001。

1.3 實驗儀器 玻球型血小板粘附儀，無錫分析儀器廠生產； LBY—NJ2全自動四通道血小板凝聚儀、LBY-S5血栓形成儀，北京普利生集團生產。

2 方 法 2.1 對實驗性血瘀大鼠血小板聚集性、粘附性的影響 取大鼠60只，雌雄各半，隨機分為6組，每組10只。分組為：溶劑對照組；血瘀模型組；模型+川芎嗪組(0.15g/kg)；模型+梗舒膠囊組(2、4、8g生藥/kg)。各組大鼠每天灌胃給藥1次，容量2mL/100g，連續(xù)7d。第7天末次給藥1h后，除溶劑組外各組大鼠均皮下注射0.001%鹽酸腎上腺素8μg/kg二次，二次間隔4h。其間，在第一次注射腎上腺素后2h，將大鼠浸入4℃冰水內5min。試驗當日下午，各組大鼠再次灌胃給藥1次。隨后，各組大鼠統(tǒng)一停食(不禁水)。次日清晨，股動脈采血，3.8%枸櫞酸鈉抗凝后，玻球型血小板粘附儀旋轉玻球瓶法測定血小板粘附率[1]；同時以ADP為聚集誘導劑(富含血小板血漿PRP中ADP的終濃度為0.4μmol/L),LBY—NJ2全自動血小板聚集儀比濁法測定各組大鼠血小板最大聚集率[2]。試驗時，室溫度控制在25±0.5℃。

2.2 梗舒膠囊對血栓的影響

2.2.1 對大鼠頸總動脈——頸外靜脈血流旁路血栓形成的影響[3]:取大鼠50只，雄性，隨機分為5組，每組10只。分組為：溶劑對照組蒸餾水；維腦路通組0.15g/kg；梗舒膠囊組分別為2、4、8g生藥/kg。各組大鼠每天灌胃給藥1次，容量2mL/100g，連給7d。第7天末次給藥30min后，各組大鼠腹腔注射4%戊巴比妥鈉40mg/kg麻醉，背位固定后，分離氣管并插管，同時分離右側頸總動脈及左側頸外靜脈。取一長約7cm、由三段聚乙烯塑料管組成的套管(套管兩端塑料管的內徑為1mm，中段內徑為2mm)，內置一條5cm長的4號手術絲線(預先稱其干重)。給套管內充滿50u/mL肝素生理鹽水后，將其一端插入大鼠左頸外靜脈并結扎固定，從套管的另一端注入濃度為50u/mL的肝素生理鹽水50u/kg，然后將套管的此端插入右頸總動脈并結扎固定。手術完成后松開夾閉大鼠右頸總動脈的動脈夾開放血流，使血液從右頸總動脈流經聚乙烯套管后進入左頸外靜脈。15min后中斷血流，迅速取出手術絲線稱重。以此時手術絲線的濕重減去其干重作為血栓重量，并求出血栓形成抑制率。

2.2.2 對大鼠體外血栓形成的影響[4]:取大鼠50只，雌雄各半，分組和給藥同2.2.1。第7天末次給藥1h后，將大鼠用4%戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注射麻醉后，每只大鼠從下腔靜脈取血1.8mL，立即注入內徑4mm未加抗凝劑的血栓硅膠管內，置于已恒溫37℃體外血栓儀中旋轉15min，取出血栓，濾紙吸去余血，測量血栓長度。稱濕重后，將血栓置于60℃烘箱中干燥30min后，稱干重。

2.3 統(tǒng)計學方法t檢驗統(tǒng)計學處理數據。

3 結 果 3.1 對實驗性血瘀大鼠血小板聚集性、粘附性的影響 見表1。

表1 梗舒膠囊對實驗性血瘀大鼠血小板聚集性和粘附性的影響

注：與血瘀模型組比較,△P<0.05,▲P<0.01

結果表明，模型+梗舒膠囊各劑量組大鼠血小板粘附率、聚集率均低于血瘀模型組，與血瘀模型組比較，4g、8g/kg模型+梗舒膠囊劑量組血小板粘附率和聚集率均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。說明，梗舒膠囊可抑制其血小板聚集性和粘附性。

3.2 梗舒膠囊對血栓的影響

3.2.1 對大鼠頸總動脈——頸外靜脈血流旁路血栓形成的影響,見表2。

表2 梗舒膠囊對大鼠頸總動脈—頸外靜脈血流旁路血栓形成的影響

注：與溶劑對照組比較,▲P<0.01

結果表明，梗舒膠囊各劑量組大鼠血栓重量均低于溶劑對照組，且分別與溶劑對照組比較均有顯著性差異(P<0.01)。梗舒膠囊2、4、8g/kg三個劑量組大鼠血栓形成抑制率分別為36.50、47.93和53.60%。提示：梗舒膠囊具有體內抗血栓作用。

3.2.2 對大鼠體外血栓形成的影響,見表3。

組 別劑量g/kgn血栓長度cm濕重mg干重mg溶劑對照組108.52±3.06301.26±104.8992.55±28.29維腦路通組0.15104.53±2.30▲163.37±104.12▲53.47±26.20▲小劑量組2104.71±3.01▲167.43±100.99▲56.32±27.44▲中劑量組4104.38±2.39▲156.65±102.46▲50.32±26.65▲大劑量組8104.01±2.57▲149.37±102.14▲45.93±27.34▲

注：與溶劑對照組比較,▲P<0.01

結果表明，梗舒膠囊各劑量組能明顯抑制大鼠體外血栓的形成，與溶劑對照組相比有顯著性差異 (P<0.01)。提示：梗舒膠囊具有體外抗血栓作用。

4 討 論 試驗分別觀察了梗舒膠囊對實驗動物血小板功能、血栓形成的影響。結果顯示，梗舒膠囊可降低實驗性急性血瘀證大鼠血小板聚集性和粘附性；可抑制大鼠頸總動脈—頸外靜脈血流旁路血栓形成；可抑制大鼠體外血栓的形成。提示，梗舒膠囊對腦血栓、腦栓塞等所致缺血性腦血管疾病具有防治作用。建議，可進一步進行抗腦缺血實驗的研究。

[1] 崔邦銓.用玻球型血小板粘附儀直接測定血小板粘附率[J].臨床檢驗雜志，2011,9(4)：201.

[2] 王 輝，劉 剛，羅順德.蓮心堿對血小板聚集、凝血功能和血栓形成的影響[J].中國藥理學通報，2010,26(6)：768-771.

[3] 陳 奇.中藥藥理研究方法學 [M].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2006：504-505.

[4] 岳海濤，李金成，呂銘洋，等.紅花注射液對大鼠血栓形成的影響及其作用機制[J].中草藥，2011，42(8)：1585-1587.

(收稿2015-06-17；修回2015-07-08)

*國家科技型中小企業(yè)創(chuàng)新基金創(chuàng)新項目(10C26226113297)

梗舒膠囊 活血化瘀 大鼠 動物 實驗

R96

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.10.093