梧桐子總黃酮提取工藝研究

董明芝 袁 鷹 歐陽卉

西安正大制藥有限公司(西安 710043)

梧桐子總黃酮提取工藝研究

董明芝 袁 鷹 歐陽卉△

西安正大制藥有限公司(西安 710043)

目的：優選梧桐子總黃酮乙醇提取最佳工藝。方法：采用正交試驗法，以梧桐子總黃酮為指標成分，優選最佳醇提工藝。結果：梧桐子的最佳醇提工藝為60%乙醇提取3次，溶劑用量依次為8倍、8倍、6倍，提取時間為60 min、60 min、30 min。結論:優選的工藝穩定可行，可作為鼻血止顆粒二次開發生產工藝。

梧桐子為梧桐科植物梧桐Firmiana simplex (L.)W.F.Wight 的干燥成熟種子。具有順氣和胃，健脾消食，止血之功效。現代藥理研究表明，梧桐子有降壓、止血、健脾消食等作用，該品盛產于山西、河北、山東等地[1]。為充分提取處方中梧桐子有效成分，本實驗以梧桐子總黃酮為指標成分，采用L9(34)正交試驗法，對梧桐子醇提工藝進行了篩選。

1 儀器與試藥

UV-260型分光光度計，DK-98-型電熱恒溫水浴鍋，TY-120型電子天平。梧桐子藥材為干燥成熟種子。甲醇、乙醇、六水合三氯化鋁等均為分析純；蘆丁對照品(由陜西省藥品檢驗所提供)。三氯化鋁試劑，取六水合三氯化鋁1.81 g，用含5%乙酸的甲醇溶液50mL溶解，即得。

2 方法與結果

2.1 提取方法的選擇 水提取法：取梧桐子20g，分別加8、6、6倍量水，煎煮3次，每次1 h，濾過。合并濾液，置水浴上濃縮至約50mL，放涼，置50mL量瓶，加水定容至刻度，搖勻，備用。乙醇提取法：取梧桐子20g，分別加8、6、6倍量70%乙醇，回流提取3次，每次1 h，濾過。合并濾液，回收乙醇后，置水浴上濃縮至約50mL，放涼，置50mL量瓶，加水定容至刻度，搖勻，備用。

2.2 總黃酮含量測定 對照品溶液的制備：取蘆丁對照品約10 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，作為蘆丁對照品溶液備用[2]。供試品溶液的制備：分別精密量取上述備用液5mL，置蒸發皿中，濃縮至干，殘渣分次加甲醇約40mL溶解，置50 mL量瓶中，超聲20 min，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，續濾液備用。標準曲線的制備：精密量取蘆丁對照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL，置于25 mL量瓶中，分別加甲醇至6 mL，加入三氯化鋁試液1mL，搖勻，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，放置30 min，根據我國2010年頒布的《中國藥典》中分光光度法，吸收度為縱坐標(在275 nm的波長處測定吸收度)，橫坐標為濃度，繪制標準曲線。含量測定：從備用液中吸取2mL，分別置量瓶內，曲線制備法，自“分別加甲醇至6mL”起，開始測定吸光度，并從曲線中讀取供試品溶液中蘆丁的量，計算各樣品中梧桐子總黃酮含量，結果水提法和醇提法梧桐子總黃酮含量分別為0.20%和0.33%。說明以梧桐子總黃酮含量為指標醇提法優于水提法。

2.3 乙醇提取工藝的考察 考察因素及其水平：根據預試驗，發現梧桐子醇提3次，總黃酮含量較高。因此，選擇梧桐子醇提3次。取梧桐子20g，選擇3個因素分別是乙醇濃度、提取時間和乙醇用量，因素下設3水平，編制因素水平表(表1)[3]。

表1 梧桐子的乙醇提取工藝因素水平

表2 梧桐子乙醇提取工藝正交設計表

2.4 結 果 按L9(34)正交表設計方案進行實驗，分別將正交試驗各組提取液濾過，合并濾液，回收乙醇，置水浴上濃縮至約50mL，放涼，置50mL量瓶，加水定容至刻度，搖勻，精密量取5mL，分別置蒸發皿中，濃縮至干，殘渣分次加甲醇約40mL溶解，置50 mL量瓶中，超聲20 min，放冷，用甲醇稀釋至刻度，混勻后再過濾，量取1mL，分別置25 mL量瓶內，同上法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的量，計算各份樣品中梧桐子總黃酮含量。以總黃酮含量為指標進行方差分析，確定最佳提取工藝。結果見表2(因提取次數已確定為3次，故D項為缺項設計)。由表2可知，乙醇濃度(A)、提取時間(B)和乙醇用量(C)3個因素對梧桐子總黃酮提取的影響程度不同。乙醇濃度(A)是影響梧桐子總黃酮提取的主要因素，提取時間(B)和乙醇用量(C)次之，各因素的影響程度依次為A>B>C。故確定梧桐子總黃酮最佳提取工藝為A1B1C2，即梧桐子用60%乙醇提取3次，溶劑用量依次為8，8和6倍，提取時間為60，60和30 min。

3 結 論

鼻血止顆粒是以梧桐子為原料制成的成方制劑，原工藝為水提，梧桐子總黃酮收率較低，制粒時粘性較大，影響成品收率。本實驗采用醇提法，顯著提高了梧桐子總黃酮提取率，為鼻血止顆粒二次開發奠定基礎。今后，我們將利用現代分離技術，對梧桐子總黃酮進一步進行分離純化。

[1] 戴 琳.中藥藥性的理論與藥理作用分析[J].世界最新醫學信息文摘，2014,3(4)：142.

[2] 張琳琳，祁 峰，繆 陽.毫菊總黃酮類提取工藝的研究[J].現代中西醫結合雜志，2013，22(27)：30-32.

[3] 韋華梅，閆騰蛟，林宜沛，等.正交試驗優選槐角總黃酮的提取工藝及不同來源槐角中總黃酮的含量測定[J].陜西中醫，2011，32(9)：1231-1233.

(收稿2015-02-26；修回2015-03-17)

△湖南食品藥品職業學院(長沙 410208)

黃酮 @梧桐子 提取法

R282

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.06.048