白念珠菌烯醇化酶IgG抗體在侵襲性念珠菌病診斷中的應用

張 迪，牛 雷，樓小偉，楊瑞寧

近年來，由于廣譜抗生素和免疫抑制藥物等的廣泛使用、器官移植和有創導管技術的開展，致使機體免疫功能損傷或低下的患者較易感染侵襲性真菌，成為常見的感染和死亡原因［1］，侵襲性真菌感染已成為重癥監護病房及院內感染的主要源頭之一［2-3］。引起侵襲性真菌感染的真菌主要有念珠菌、曲霉菌及隱球菌等，其中白色念珠菌感染約占60%～80%。以往這類疾病的診斷主要依靠臨床表現、真菌直接鏡檢及培養、影像學診斷和組織活檢等，敏感性較低。血培養是目前真菌感染診斷的實驗室金標準，但由于敏感性低(約50%)，培養時間長，往往延誤了真菌感染的診斷和治療，是造成真菌感染高病死率的部分原因［4］。因此，研究和改進檢測真菌的抗原、抗體及代謝產物的血清學方法，已成為這一領域研究熱點。白色念珠菌含量最為豐富的蛋白質之一即白念珠菌烯醇化酶，又稱2-磷酸-D-甘油鹽水解酶，由440個氨基酸組成，相對分子質量在45～48 kD之間，其中P47抗原主要存在于白念珠菌的菌絲胞質中，在念珠菌感染中可刺激機體產生抗體［5-6］，因此研究anti-Eno IgG在侵襲性念珠菌感染中的意義頗具價值。

1 材料與方法

1.1 病例選擇 以我院收治的具有完整臨床、病理資料、真菌培養結果的120例患者，分為血念珠菌培養陽性組30例，其中全自動血培養儀中真菌培養陽性白色念珠菌26例、熱帶念珠菌2例、光滑念珠菌2例;全自動血培養儀中中血真菌培養陰性組30例;G試驗陽性組30例，每例患者采血后6 h內分離血漿，常規檢驗中兩次G試驗血樣結果均在100～800 pg/mL之內;G試驗陰性組30例，G試驗測定兩次血樣結果在100 pg/mL以下。以上各組分別清晨采取靜脈血分離血漿標本于－20℃冰箱保存待測。

1.2 試劑與儀器 BD9120全自動血培養儀，血真菌培養瓶為BD公司產品;G試驗試劑盒和MB-80微生物快速動態檢測系統均為北京金山川科技發展有限公司產品;白念珠菌烯醇化酶IgG抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)為南京軍區南京總醫院李芳秋課題組研制，北京貝爾生物公司裝配的臨床試用型試劑盒;BIO-RAD，iMark酶標儀為德國伯樂公司產品。

1.3 試驗方法 將各組采集分離的血漿嚴格按說明書要求進行anti-Eno IgG(酶聯免疫法)測定。

2 結果

2.1 念珠菌培養陽性和陰性患者anti-Eno IgG檢測結果 血念珠菌培養陽性患者30例，anti-Eno IgG陽性率為93.3%(28/30);血念珠菌培養陰性患者30例，anti-Eno IgG全部陰性。

2.2 G試驗陽性和陰性患者anti-Eno IgG檢測結果G試驗陽性患者30例，anti-Eno IgG陽性率為40%(12/30);G試驗陰性患者30例，anti-Eno IgG陽性率10%(3/30)。

3 討論

白念珠菌烯醇化酶可刺激機體產生明顯的細胞免疫和體液免疫，在侵襲性念珠菌感染患者的血清中anti-Eno IgG含量明顯增高，是侵襲性念珠菌感染的一個較敏感的檢測指標［7-8］。

本試驗30例血念珠菌培養陽性患者中anti-Eno IgG測定陽性率達93.3%，而血念珠菌培養陰性的30份標本中，anti-Eno IgG檢測結果均為陰性。表明anti-Eno IgG對侵襲性念珠菌病的檢測結果與血真菌培養結果具有顯著的一致性。血真菌培養需時較長，而anti-Eno IgG在侵襲性念珠菌感染早期即可升高［9］，實際檢測只要4 h左右就可以出結果，檢測時效比血真菌培養要高。兩種方法在檢測特異性一致的情況下，anti-Eno IgG檢測具有快速、準確的優越性。試驗中30份血培養陽性標本中有2例anti-Eno IgG結果是陰性，可能由于患者處于免疫功能低下狀態，抗體水平較低，所以結果顯示陰性。

在G試驗陽性的30份標本中，anti-Eno IgG測定陽性率40%;G試驗陰性組30例，anti-Eno IgG陽性率10%，anti-Eno IgG與G試驗陰性組檢測結果之間存在一定的差異。G試驗是一種新型的抗原檢測方法［10-11］，其陽性結果可提示有侵襲性真菌感染，但只能提示有無真菌感染，不能明確是哪一種真菌感染。且G實驗的干擾因素較多，其產生假陽性的主要原因有:長期血液透析的患者透析膜中含有葡聚糖成分;某些抗腫瘤藥物如香菇菌多糖、磺胺類及其他藥物的使用;靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白等。而造成假陰性的原因主要是臨床抗真菌的預防性用藥等［12］。因此在檢測同樣快速的情況下，anti-Eno IgG檢測對于侵襲性念珠菌病的檢測特異性更好。

綜上所述，anti-Eno IgG的檢測具有簡便、快速、特異性好及影響因素少等特點，是侵襲性念珠菌感染實驗室診斷的一種新方法。

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