植入性門靜脈主干癌栓兔模型建立及評估

張 雯， 李 說， 顏志平， 羅劍鈞， 劉清欣， 瞿旭東， 王建華

肝細胞肝癌（HCC）是臨床最常見惡性腫瘤之一，發(fā)病率居全球惡性腫瘤第6位，死亡率居第3位［1］；在國內(nèi)的發(fā)病率僅次于肺癌占第2位。HCC起病隱匿，發(fā)現(xiàn)時通常已無法手術切除。伴有門靜脈癌栓（PVTT）患者易并發(fā)上消化道出血、頑固性胸腹水等，預后極差，其自然病程僅為2.7～4個月；門靜脈主干癌栓（MPVTT）形成是影響HCC患者預后的獨立因素［2-3］。

動物模型是研究疾病病理生理機制，評價臨床治療效果及安全性的基礎。目前已成功建立HCC動物模型，如Buffalo大鼠HCC模型、新西蘭大白兔肝移植VX2腫瘤模型［4］等，但目前仍缺乏可重復地用于病理機制及療效研究的HCC PVTT動物模型。本實驗旨在建立穩(wěn)定的可用于評估療效的植入性MPVTT動物模型，并為后續(xù)實驗研究打下基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物與瘤株 本實驗已獲得復旦大學附屬中山醫(yī)院動物倫理委員會批準。取健康新西蘭大白兔27只，體重1.8～2.2 kg，雌雄不限。3只為荷瘤兔，其余隨機分為對照組（A組，10只）和實驗組（B組，14只）。實驗前所有兔均稱重。采用VX2瘤株。1.1.2 主要儀器及器械 64排螺旋CT（LightSpeed VCT，美國通用公司）、顯微手術器械與普通手術器械包 （我院動物實驗室）、5-0/6-0血管縫線（上海浦東金橋醫(yī)療器械廠）。

1.2 實驗方法

1.2.1 動物麻醉與母瘤建立 常規(guī)消毒后，肌內(nèi)注射氯胺酮-地西泮混合液（按4︰2比例配制，注射量為1.5 ml/kg）麻醉動物。自液氮罐取出VX2瘤株，復蘇后PBS液沖洗、離心、棄上清液，加入DMEM高糖培養(yǎng)液稀釋，取1 ml注入兔后腿背側(cè)皮下成瘤，2～3周待腫瘤長至直徑約2.0 cm時備用。……