無創(chuàng)產(chǎn)前檢測在產(chǎn)前篩查染色體高風(fēng)險后續(xù)診斷中的應(yīng)用

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無創(chuàng)產(chǎn)前檢測在產(chǎn)前篩查染色體高風(fēng)險后續(xù)診斷中的應(yīng)用

馮明杰, 褚光萍, 查建梅

(江蘇省張家港市婦幼保健所 群體保健科, 江蘇 張家港, 215600)

關(guān)鍵詞:產(chǎn)前篩查; 高風(fēng)險; 無創(chuàng)產(chǎn)前檢測; 侵入性產(chǎn)前診斷

中國是新生兒出生缺陷的高發(fā)國家之一，每年出生人口中先天畸形達(dá)80～120萬人[1]。其中唐氏綜合征(DS)和愛德華氏綜合征(ES)是最常見的胎兒染色體病及出生缺陷，目前尚無有效的治療方法[2]。產(chǎn)前篩查與產(chǎn)前診斷是減少出生缺陷的有效預(yù)防措施[3-4]。目前臨床上廣泛開展的產(chǎn)前篩查，是通過對母體血清學(xué)標(biāo)志物的檢測來篩選可能患有DS、ES的高風(fēng)險孕婦，然后對其進(jìn)行產(chǎn)前診斷，包括絨毛活檢、羊水穿刺、臍靜脈血穿刺。這三種技術(shù)為侵入性產(chǎn)前診斷(IPD)，有時可引起流產(chǎn)和感染等并發(fā)癥。近年來，隨著母體外周血中胎兒游離DNA的發(fā)現(xiàn)[5]，無創(chuàng)產(chǎn)前檢測(NIPT)胎兒非整倍體技術(shù)得到了迅速的發(fā)展和廣泛的臨床應(yīng)用，為廣大孕婦的產(chǎn)前篩查與診斷模式提供了新的選擇。本文對2012年1月—2014年12月在本所進(jìn)行孕中期產(chǎn)前篩查孕婦的隨訪，對1 371例產(chǎn)前篩查染色體高風(fēng)險孕婦的后續(xù)診斷進(jìn)行回顧性分析。

1資料與方法

1.1　一般資料

2012年1月—2014年12月在本所接受產(chǎn)前篩查的孕15～20+6周、預(yù)產(chǎn)年齡17～35歲的孕婦32 459例，篩查出染色體高風(fēng)險1 371例，包括DS高風(fēng)險1 301例、ES高風(fēng)險70例。

1.2　方法

1.2.1產(chǎn)前篩查：抽取孕婦空腹靜脈血2～3 mL，采用時間分辨法檢測血清中AFP、free-β-HCG濃度，應(yīng)用PE公司1420型半自動時間分辨儀，使用其配套試劑盒，結(jié)合孕婦年齡、孕周、體質(zhì)量、吸煙史、糖尿病史、異常妊娠史等臨床資料，應(yīng)用PE公司2T分析軟件評估胎兒患DS、ES和NTD的風(fēng)險值。

1.2.2NIPT：采集孕12～24周孕婦外周血5 mL，提取其中游離DNA，采用第二代高通量測序技術(shù)進(jìn)行覆蓋度測序[6]，最后通過生物信息分析，得出胎兒患染色體非整倍體疾病的風(fēng)險率[7]。若該方法檢測為高風(fēng)險，仍需進(jìn)行PID。

1.2.3IPD：孕15～24周者在B超引導(dǎo)下行羊膜腔穿刺術(shù)抽取羊水20～30 mL，>24 周者在B超引導(dǎo)下抽取臍血0.5～1 mL, 進(jìn)行細(xì)胞染色體核型分析。

1.3　產(chǎn)前篩查高風(fēng)險評估標(biāo)準(zhǔn)及后續(xù)診斷

DS高風(fēng)險的截斷值為1/270，ES高風(fēng)險的截斷值為1/350，NTD高風(fēng)險的截斷值為1/300，大于等于以上截斷值的都定為高風(fēng)險。對篩查出的高風(fēng)險孕婦，通過電話召回，由本所產(chǎn)科門診醫(yī)生專人對其進(jìn)行優(yōu)生咨詢，指導(dǎo)高風(fēng)險孕婦進(jìn)行后續(xù)診斷。經(jīng)知情同意，DS高風(fēng)險及ES高風(fēng)險孕婦可直接選擇IPD，包括羊水穿刺、臍靜脈血穿刺對羊水細(xì)胞或胎兒血細(xì)胞培養(yǎng)后進(jìn)行染色體核型分析以明確診斷，也可先行NIPT，結(jié)果為高風(fēng)險再行IPD。以上明確診斷者建議終止妊娠。

1.4　隨訪

由本所群體保健科專人負(fù)責(zé)對所有產(chǎn)前篩查對象的妊娠結(jié)局進(jìn)行隨訪，充分利用三級婦幼保健網(wǎng)及婦幼信息管理系統(tǒng)收集相關(guān)信息，并重點(diǎn)對高風(fēng)險孕婦的后續(xù)診斷情況及妊娠結(jié)局進(jìn)行電話追蹤隨訪，隨訪結(jié)果定期收集匯總。

2結(jié)果

1 371例染色體高風(fēng)險(包括DS高風(fēng)險1 301例，ES高風(fēng)險70例)孕婦中，選擇NIPT415例，選擇IPD335例。415例NIPT中，有3例提示三體高風(fēng)險：1例提示DS，后經(jīng)羊水染色體核型分析確診DS；另1例提示DS，行B超引導(dǎo)下羊水穿刺時發(fā)現(xiàn)為死胎，后予引產(chǎn)，胎兒外觀吻合DS表型；1例提示ES，后經(jīng)羊水染色體核型分析確診ES。335例直接行IPD孕婦中，檢出DS3例、ES1例。以上共確診5例DS、2例ES，均得以及時終止妊娠。412例NIPT低風(fēng)險孕婦均已分娩，通過對已出生新生兒的隨訪，未發(fā)現(xiàn)有DS或ES患兒。

3討論

本研究結(jié)果顯示，1371例染色體高風(fēng)險(包括DS高風(fēng)險1301例，ES高風(fēng)險70例)孕婦中，有415例選擇了NIPT，占30.27%；335例選擇了IPD，占24.43%。相比傳統(tǒng)的IPD，更多的孕婦選擇NIPT，其原因可能是：羊水和臍血染色體核型分析雖然是相對安全可靠的產(chǎn)前診斷方法[8]，但仍然是有創(chuàng)傷性技術(shù)，可能會引起流產(chǎn)、感染、死胎等并發(fā)癥，這使得孕婦及家屬在選擇時有所顧慮。而NIPT只需抽取孕婦靜脈血，通過擴(kuò)增孕婦血中游離胎兒DNA片段，采用高通量測序技術(shù)對其進(jìn)行測序和計數(shù)，通過生物信息技術(shù)的處理，來判斷胎兒是否存在染色體異常。與IPD相比，NIPT具有無創(chuàng)，快速的特點(diǎn)，可有效減少對孕婦身體的創(chuàng)傷和心理精神負(fù)擔(dān)。Lau等[9]研究顯示，NIPT進(jìn)行唐氏檢查能夠使95%的孕婦焦慮情緒得到緩解。

研究[10-12]已證實(shí)孕婦血中游離DNA高通量測序用于胎兒常見染色體非整倍體的無創(chuàng)性產(chǎn)前檢測具有較高的檢測敏感性和特異性。目前，國內(nèi)專家[13]將其定位于“近似于產(chǎn)前診斷水平的”目標(biāo)疾病指向精確的產(chǎn)前篩查技術(shù)。本文中接受NIPT的415例孕婦中，提示高風(fēng)險3例，2例經(jīng)羊水染色體核型確認(rèn)，結(jié)果一致；1例提示DS，行羊水穿刺時B超發(fā)現(xiàn)死胎，予引產(chǎn)，胎兒外觀吻合DS表型；412例低風(fēng)險者經(jīng)隨訪未發(fā)現(xiàn)有DS或ES患兒出生。

NIPT除了在本文中應(yīng)用于產(chǎn)前篩查高風(fēng)險的后續(xù)診斷，還可將其臨床應(yīng)用延伸到產(chǎn)前篩查臨界風(fēng)險值及單項值異常孕婦中。由于目前臨床上普遍采用的產(chǎn)前篩查存在較高的假陽性率和漏檢率，孕中期二聯(lián)血清學(xué)篩查在5%的假陽性率前提下，只有60%～65%的檢出率 ，所以對臨界風(fēng)險值及單項值異常的處理得到越來越多的關(guān)注。既往這些孕婦在權(quán)衡時往往考慮技術(shù)風(fēng)險和并發(fā)癥的發(fā)生而對IPD接受度很低，自從開展NIPT后，臨界風(fēng)險、單項值異常者選擇NIPT人數(shù)明顯增多，有效地提高了產(chǎn)前篩查與診斷的效率，降低出生缺陷發(fā)生。

NIPT除了上述在產(chǎn)前篩查高風(fēng)險、臨界風(fēng)險及單項值異常孕婦中的應(yīng)用，還有很多的適宜對象。隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，城市中高齡產(chǎn)婦比例逐年上升，近2年國家二胎政策的放開，也一定程度上增加了高齡婦的比例，這些都將增加對產(chǎn)前診斷的需求。而傳統(tǒng)的IPD技術(shù)存在診斷通量低下、專業(yè)人員缺乏、人員培訓(xùn)和實(shí)驗室建設(shè)周期長、報告時限過長等諸多問題，NIPD的臨床應(yīng)用，必將有效地緩解這一現(xiàn)狀。NIPT的適宜孕周為孕12～24周，對于一些有高危因素的孕婦(孕期接受過致畸因素或生育過DS患兒)在孕早期采用NIPT能實(shí)現(xiàn)早期診斷，而對于錯過產(chǎn)前篩查孕周的孕婦，NIPT也不失為一種理想的選擇。

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收稿日期:2015-05-10

中圖分類號:R 714.53

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)24-107-02

DOI:10.7619/jcmp.201524040