血清胸苷激酶1、細胞角蛋白19片段聯合檢測在頭頸鱗癌患者臨床診斷中的價值

高群，阮宏瑩，林鵬

(1天津醫科大學第一中心臨床學院，天津300192；2 天津市第一中心醫院)

血清胸苷激酶1、細胞角蛋白19片段聯合檢測在頭頸鱗癌患者臨床診斷中的價值

高群1，阮宏瑩2，林鵬2

(1天津醫科大學第一中心臨床學院，天津300192；2 天津市第一中心醫院)

目的 探討胸苷激酶1(TK1)、細胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)聯合檢測對頭頸鱗癌的診斷價值。方法 采用ELISA法檢測42例頭頸鱗癌(A組)、20例癌前病變(B組)患者和20例健康體檢者(C組)血清TK1、CYFRA21-1。 結果 A組血清TK1、CYFRA21-1水平高于B、C組(P均<0.01)；血清TK1、CYFRA21-1聯合檢測對頭頸鱗癌診斷的靈敏度較單項檢測顯著提高(P均<0.05)。結論 血清TK1、CYFRA21-1聯合檢測在頭頸鱗癌診斷中有較好的臨床價值。

頭頸鱗癌；胸苷激酶1、細胞角蛋白19片段；酶聯免疫吸附法

細胞質胸苷激酶1(TK1)與腫瘤細胞增殖生長密切相關，是一種靈敏有效的評估腫瘤細胞增殖的標志物。文獻報道，TK1在多種腫瘤中表達[1、2]。細胞死亡時，細胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)被釋放入血，成為頭頸鱗癌新的腫瘤標志物，敏感性優于鱗狀細胞癌相關抗原(SCC-Ag)。本研究通過檢測頭頸鱗癌患者血清TK1、CYFRA21-1，評估二者對于頭頸鱗癌早期診斷的價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取天津醫科大學第一中心臨床學院2013年9月～2014年9月收治的42例頭頸鱗癌患者為A組，同期20例癌前病變患者(包括喉角化、喉乳頭狀瘤等)為B組，20名健康體檢者為C組。A組男30例、女12例，年齡38～71歲、平均58歲；其中高分化癌14例，中分化癌20例，低分化癌8例；TNM分期T1、T2期28例，T3、T4期14例；均經術后病理證實為鱗狀上皮細胞癌，術前均未經化療、放療和免疫治療。B組男14例、女6例，年齡35～67歲、平均46歲。C組男12例、女8例，年齡28～62歲、平均43歲。排除標準：既往惡性腫瘤病史；心、肝、肺、腎等重要臟器疾患；急性感染、免疫缺陷性疾病、貧血、月經期及妊娠期等處于細胞增殖狀態者。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 研究對象均采集清晨空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min離心20 min，分離血清，按標號分裝于EP管內，放置于-80 ℃低溫冰箱中待用。采用ELISA測定血清TK1、CYFRA21-1，嚴格按照說明書進行操作。靈敏度=A組陽性例數/A組總例數×100%；1項或大于1項陽性，為聯合檢測陽性。

1.2.2 判斷標準 TK1>2.0 pmol/L、CYFRA21-1>3.3 ng/mL判斷為陽性。

2 結果

2.1 各組血清TK1、CYFRA21-1水平比較 見表1。

注：與A組比較，△P<0.01。

2.2 靈敏度比較 TK1、CYFRA21-1及聯合檢測對頭頸鱗癌診斷的靈敏度分別為76.2%、59.5%、95.2%，與各單項檢測對比，TK1、CYFRA21-1聯合檢測對頭頸鱗癌診斷的靈敏度明顯提高(χ2分別為6.22、15.30，P均<0.05)。

3 討論

TK1是DNA補救合成途徑的限速酶，在ATP的參與下催化脫氧胸苷(TDR)磷酸化為脫氧1-磷酸胸苷酸(dTMP),是評估增殖細胞增殖度的重要標志[3]。正常細胞中TK1受細胞周期的調控，增殖周期中的TK1含量在細胞分裂G1期處于低水平，自S期逐漸升高，G2期達到峰值，G2晚期開始急劇降解，到M期逐漸降解至G1前期最低水平[4]。正常情況下成人TK1體內含量極微，幾乎檢測不出[5]。當細胞更新代謝旺盛時，如胎兒組織及成人的增殖細胞中，TK1將出現較高水平的表達。一旦發生癌變，腫瘤細胞中DNA合成劇增，處于S期和G2期的細胞比例明顯升高，導致腫瘤細胞內產生的大量TK1被釋放入血，TK1的活性和含量都將升高，可超過正常水平的2～100倍[6]。因此，檢測組織和血清中TK1活性及含量的變化可作為腫瘤細胞增殖水平的監控指標，定量反映患者體內腫瘤細胞的增殖速度，也有助于臨床評估腫瘤的惡性程度和患者的預后。賴永鑫[7]報道TK1在喉癌的診斷中具有一定價值。

CYFRA21-1是CK19的可溶性片段，由CK19的兩個單克隆抗體組成,即單抗BM19-21和KS19-1，為一種酸性細胞蛋白，主要分布于單層和復層腫瘤細胞的胞質內。當分布有CK19的上皮細胞溶解或癌變壞死脫落時，可以溶解片段的形式釋放大量CYFRA21-1進入血液循環，導致CYFRA21-1結構不變而含量異常升高[8]，被認為是目前檢測鱗癌最好的腫瘤標志物[9]。正常時CYFRA21-1以寡聚物形式存在,含量極低。既往報道顯示，血清CYFRA21-1是喉癌和下咽癌較理想的檢查指標，靈敏度高于SCCAg[10]。

本研究用ELISA法檢測TK1、CYFRA21-1在頭頸鱗癌患者、癌前病變患者及健康體檢者血清中的表達，結果顯示，頭頸鱗癌患者血清TK1、CYFRA21-1的含量均顯著高于癌前病變及健康體檢者；同時癌前病變患者TK1水平高于健康體檢者，但無顯著性差異，這與有關文獻報道一致[11～13]。說明TK1、CYFRA21-1參與了頭頸鱗癌的發生，可作為頭頸鱗癌的診斷指標。

單項腫瘤標志物對腫瘤的診斷雖有一定價值，但缺乏足夠的敏感性和特異度，為盡量減少這種局限性，有學者采用多個指標聯合檢測來提高對惡性腫瘤的診斷率[14，15]。本研究單獨檢測TK1、CYFRA21-1的敏感度分別為76.2%、59.5%，而兩者聯合檢測的敏感度為95.2%。經統計學分析，差異均具有統計學意義(P均<0.05)。提示TK1、CYFRA21-1的聯合檢測可提高頭頸鱗癌診斷的敏感度，從而有效降低漏診率，對頭頸鱗癌的早期診斷具有重要的臨床應用價值。

由于觀察的樣本數量不多，且未對頭頸鱗癌患者進行臨床隨訪追蹤，血清TK1、CYFRA21-1能否作為監測頭頸鱗癌治療效果、復發的腫瘤標志物還需進一步臨床驗證。

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阮宏瑩，E-mail: hongyingruan@163.com

10.3969/j.issn.1002-266X.2015.12.029

R739.6

B

1002-266X(2015)12-0072-02

2014-10-22)