2型糖尿病合并冠心病患者血清中APN、IL-6及hs-CRP的水平及其相關性研究

關清華，曠勁松，張秀斌，程 嵐，陳芬琴

(1.沈陽市第四人民醫院內分泌科，遼寧 沈陽110031；2.中國醫科大學附屬第一醫院干診科，遼寧 沈陽110001)

2型糖尿病合并冠心病患者血清中APN、IL-6及hs-CRP的水平及其相關性研究

關清華1，曠勁松1，張秀斌1，程 嵐1，陳芬琴2

(1.沈陽市第四人民醫院內分泌科，遼寧 沈陽110031；2.中國醫科大學附屬第一醫院干診科，遼寧 沈陽110001)

目的觀察脂聯素(APN)、白細胞介素-6(IL-6)及超敏C反應蛋白(hs-CRP)在2型糖尿病(T2DM)合并冠心病(CHD)患者中的水平，并探討其相關性。方法選擇臨床確診的T2DM患者80例，分為T2DM不伴CHD組40例(B組)和T2DM合并CHD組(C組)40例，并與40例健康體檢者(A組)對照，采用酶聯免疫吸附(ELISA)法測定三組受試者的血清APN、IL-6及hs-CRP的水平，常規檢測糖化血紅蛋白(GHbA1c)，并應用Pearson相關性分析統計其相關性。結果C組患者血清hs-CRP、IL-6水平均明顯高于B組和A組，且差異均有統計學意義(P＜0.05)，而血清APN水平則明顯低于B組和A組，且差異有統計學意義(P＜0.05)；相關分析顯示，C組患者的hs-CRP與IL-6水平呈顯著正相關(r=0.725，P＜0.05)，GHbA1c與hs-CRP及IL-6水平呈顯著正相關(r=0.873、0.912，P均＜0.01)，而APN與hs-CRP及IL-6水平呈顯著負相關(r=-0.816、-0.79，P均＜0.01)。結論APN作為抗動脈粥樣硬化(AS)病變的保護因子而IL-6、hs-CRP作為致AS病變的炎癥因子，它們共同參與了T2DM合并CHD患者冠脈粥樣硬化的發生發展，早期干預這些炎癥因子的水平可有效延緩T2DM患者CHD的發生發展。

2型糖尿病；冠心病；脂聯素；白細胞介素-6；超敏C反應蛋白

隨著人們生活水平的提高，糖尿病(Diabetes mellitus，DM)患病率逐年上升，而95%DM患者為2型糖尿病(Type2 diabetes mellitus，T2DM)，心血管并發癥是T2DM患者的主要并發癥及死因之一，已嚴重影響到T2DM患者的生活質量及預期壽命。T2DM并發冠心病(Coronary heart disease，CHD)的病理基礎是動脈粥樣硬化(Atheromatosis，AS)。AS是一種動脈壁內脂質堆積性疾病，炎癥反應及免疫過程亦參與了其發生發展[1-2]，在CHD的發生發展過程中發揮著重要作用。探討T2DM合并CHD的發病機理及有效延緩AS發生發展的措施是目前研究的熱點。本文選擇臨床確診的住院T2DM患者80例，分為單純T2DM組和T2DM合并CHD組，并與我院健康體檢者做對照，采用酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測血清脂聯素(Adiponectin，APN)、白細胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)及超敏C反應蛋白(High sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)的水平，旨在研究這三種細胞因子在T2DM合并CHD患者的表達情況及其對AS的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 根據2010年WHO的DM診斷標準[3]選擇我院2013年1月至2015年2月內分泌科及心內科住院T2DM患者共80例。T2DM不伴CHD組(B組)40例，其中男性18例，女性22例；年齡(59.42±6.14)歲。該組患者行冠脈造影未見明顯冠脈狹窄，無DM急慢性并發癥，未應用胰島素及胰島素增敏劑噻唑烷二酮類治療。T2DM并發CHD組(C組)40例，其中男性19例，女性21例；年齡(60.27±4.86)歲；心肌梗死15例(37.5%)，心絞痛25例(62.5%)。根據典型臨床表現和典型心電圖或冠脈造影顯示管腔直徑減少70%～75%確定診斷，排除應用胰島素及噻唑烷二酮類治療者。正常對照組(A組)40例為我院健康體檢者，其中男性20例，女性20例；年齡(57.77±3.68)歲；排除DM、高血壓及冠心病。各組間性別、年齡比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。納入標準：①年齡45～75歲，性別不限；②依據2010年WHO的DM診斷標準[3]確診為2型糖尿病患者；③無吸煙史及慢性肺疾病史，受檢前兩周內無急性呼吸系統感染病史；④無炎性反應性腸病及胃輕癱，依從性較好，能滿足研究要求。納入研究對象均取得患者本人或其法定代理人知情同意。排除標準：①1型糖尿病患者；②妊娠或哺乳期婦女；③嚴重肝腎疾病患者；④病情較重，需強化治療者；⑤依從性較差無法堅持完成研究要求。

1.2 觀察指標及檢測方法 所有研究對象均于清晨空腹(禁食水10 h)抽血，取肘靜脈血2ml，室溫靜置1 h，離心10min(2000 r/min)，取血清避光保存于-70℃冰箱待測。采用ELISA法一次性測定血清APN、IL-6及hs-CRP水平，所有標本均嚴格按照說明書操作。APN及IL-6試劑盒購自北京岳泰生物技術公司，hs-CRP試劑盒購自深圳晶美生物工程有限公司。同時常規檢測血清糖化血紅蛋白(Glycosylated hemoglobinA1c，GhbA1c)。

1.3 統計學方法 應用SPSS13.0統計軟件進行數據分析。計數資料組間比較采用χ2檢驗，計量資料以均數±標準差(±s)表示，兩組間均數比較采用t檢驗，多組間均數比較采用單因素方差分析。相關性采用Pearson相關分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 三組研究對象的臨床資料比較 B組及C組患者體重指數(BMI)、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、空腹血糖(FPG)及GhbA1c水平明顯高于A組，C組患者BMI、SBP、FBG及GhbA1c水平明顯高于B組患者，C組患者病程明顯長于B組，以上各項指標比較差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 三組研究對象的臨床資料比較(±s)

表1 三組研究對象的臨床資料比較(±s)

注：與A組比較，aP＜0.05；與B組比較，bP＜0.05；1mmHg=0.133 kPa。

組別A組(n=40) B組(n=40) C組(n=40)F/t值P值病程(年) -8.10±2.9610.24±3.15b2.1690.033 BMI(kg/m2)26.02±3.4428.06±4.57a29.18±3.05ab4.4420.014 SBP(mmHg)115.61±11.43134.75±19.69a145.57±10.92ab5.0090.008 DBP(mmHg)73.73±5.8683.02±8.28a85.23±9.75a3.9760.021 FBG(mmol/L)5.28±0.627.98±1.26a9.78±2.57ab4.0660.020 GhbA1c(%)3.98±0.356.52±0.80a8.50±1.53ab3.6580.029

2.2 三組研究對象的血清APN、IL-6及hs-CRP水平比較 B組和C組患者血清IL-6、hs-CRP水平均明顯高于A組，而C組又明顯高于B組，差異均有統計學意義(P＜0.05)。B組和C組患者血清APN水平均明顯低于A組，而C組又明顯低于B組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

2.3 APN與hs-CRP和IL-6水平的相關性 C組患者的APN與hs-CRP及IL-6水平呈顯著負相關(r=-0.816、-0.79，P均＜0.01)；hs-CRP與IL-6水平呈顯著正相關(r=0.725，P＜0.05)；GhbA1c與hs-CRP及IL-6水平呈顯著正相關(r=0.873、0.912，P均＜0.01)。

表2 三組研究對象的血清APN、IL-6及hs-CRP水平比較(±s)

表2 三組研究對象的血清APN、IL-6及hs-CRP水平比較(±s)

注：與對照組比較，aP＜0.05；與T2DM組比較，bP＜0.05。

組別APN(mg/L)hs-CRP(mg/L)IL-6(ng/L) A組(n=40) B組(n=40) C組(n=40)F值P值11.08±2.497.60±2.16a4.50±2.15ab6.2290.0031.45±0.442.11±0.92a5.08±1.26ab7.0170.0013.24±1.764.98±1.90a7.10±2.45ab5.1340.007

3 討 論

APN是由脂肪細胞分泌的一種特異性血漿激素蛋白[4-5]，約占全部血清蛋白成分的0.01%，其血漿中濃度與內臟脂肪聚集呈負相關[6]。在肥胖的動物、人及T2DM患者體內血漿中APN濃度是下降的。低APN血癥促進了胰島素抵抗(Insulin resistance，IR)，加速了肥胖相關的AS形成[5]。APN是一種有多重心血管保護效應的因子，可通過影響內皮素-1和一氧化氮的釋放，改善血管內皮功能[7]。它在調節胰島素敏感性及能量平衡方面有重要的作用，APN通過刺激脂肪酸氧化作用降低血漿中甘油三酯，并通過增加胰島素敏感性改進葡萄糖代謝。此外，APN可能通過抑制單核巨噬細胞的遷移及向泡沫細胞的轉化而抑制炎癥過程。在肥胖及T2DM患者中APN基因表達是下調的。低APN血癥是T2DM患者中冠脈病變的獨立危險因子[6]。T2DM合并CHD患者血漿APN水平較單純T2DM者低，健康人群最高[8-9]。本研究結果與此結論相似，即T2DM不伴CHD及T2DM合并CHD患者血清APN水平均明顯低于正常對照組，T2DM并發CHD患者血清APN水平亦明顯低于T2DM不伴CHD組，可見APN水平減低是DM并發CHD的獨立危險因素，其在T2DM合并CHD的發生發展中起著一定作用。APN在循環中以二聚體、三聚體或高分子六聚體蛋白復合物形式存在，在體內介導代謝作用的主要受體是APN受體1和APN受體2。APN刺激磷酸化和AMP激酶激活作用，從而發揮對血管內皮組織的直接作用，減少對機械損傷的炎癥作用，并加強了載脂蛋白E缺乏情況下的內皮組織的保護作用。低APN血癥與肥胖、代謝綜合征(MS)、AS、CHD、T2DM直接相關，故提高血清中APN水平有助于改善上述疾病。已有研究表明，生活方式的干預有助于改善血漿中APN水平，同時服用抗DM及心血管藥物，如格列美脲、ACEI/ARB等能提高血漿中APN濃度，劉麗華等[10]研究表明合并冠心病的2型糖尿病患者服用他汀類藥物后APN水平亦有所升高。提高血漿中APN水平的新藥開發是今后研究的重點，誘導激活APN受體或信號轉導系統的靶向藥物，或者是特定APN促效藥的發展都將可能是今后研究熱點[11]。

IL-6、hs-CRP均為血管炎癥反應的標記物，并已被確定為心血管危險因子[12]。本文研究結果顯示，T2DM不伴CHD組血清IL-6、hs-CRP水平明顯高于對照組，T2DM并發CHD組血清IL-6、hs-CRP水平亦明顯高于T2DM不伴CHD組，可見炎癥反應參與了T2DM、AS形成及CHD發展。檢測T2DM人群中IL-6、CRP水平，可預測其發生CHD的風險，并對高風險人群進一步檢查以明確CHD的診斷，并更好治療，同時降低血清中IL-6、CRP的治療策略，可以改進以慢性炎癥狀態為特征的DM患者的血管功能[12]。在合并CHD的T2DM患者中應用二甲雙胍，不但能改善IR，還能使全身炎癥反應活性下降，從而明顯延緩DM血管并發癥的發生發展[13]。

Pearson相關性分析顯示T2DM合并CHD患者的APN與hs-CRP及IL-6水平呈顯著負相關，這進一步支持了APN抑制炎癥反應學說。同時hs-CRP與IL-6水平呈顯著正相關，表明hs-CRP與炎癥因子產生有關，受其調控。Jialal等[14]表明IL-6等炎癥因子的產生促進了CRP的產生，CRP亦能促進人類單核-巨噬細胞中例如IL-6等炎癥因子的分泌[15]。有調查表明在患者動脈粥樣硬化病變和血管壁細胞中發現CRP mRNA和蛋白表達增加，體外實驗觀察到CRP促進了AS產生，可見，CRP與IL-6協同作用共同促進了AS的發生發展。此外，相關分析表明T2DM合并CHD患者中GhbA1c與hs-CRP及IL-6水平呈顯著正相關，GhbA1c反映患者近3個月血糖控制情況，這說明患者血糖控制越差，炎癥因子水平越高，從而加速了糖尿病患者冠脈粥樣硬化病變的發生發展。

總之，APN作為抗AS病變的保護因子而IL-6、hs-CRP作為致AS病變的炎癥因子，它們在T2DM患者體內存在異常表達，在T2DM合并CHD患者中更為顯著。上述炎癥因子共同參與了T2DM合并CHD患者冠脈粥樣硬化病變的發生發展。早期干預這些炎癥因子的水平可有效延緩T2DM患者CHD的發生發展，這對糖尿病大血管病變的防治具有重要意義。

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Serum levels of adiponectin,interleukin-6,high sensitivity C-reactive protein and their correlation in type2 diabetic patients with coronary heart disease.

GUAN Qing-hua1,KUANG Jin-song1,ZHANG Xiu-bin1,CHENG Lan1, CHEN Fen-qin2.1.Department of Endocrinology,the Fourth People's Hospital of Shenyang,Shenyang110031, Lianning,CHINA;2.VIP Clinic,the First Hospital of China Medical University,Shenyang110001,Lianning,CHINA

ObjectiveTo investigate the serum levels of adiponectin(APN),interleukin-6(IL-6),high sensitivity C-reactive protein(hs-CRP)and their correlation in patients of type2 diabetes mellitus(T2DM)with coronary heart disease(CHD).MethodsEighty T2DM patients were divided into two groups:40 patients with CHD(group C)and40 patients without CHD(group B).Forty healthy subjects were enrolled as the control people(group A).The levels of APN,IL-6 and hs-CRP in these three groups were measured by ELISA assay,and the level of glycosylated hemoglobin A1c(GHbA1c)was routinely detected.Pearson correlation analysis was used to analyze the correlation between the three indexes.ResultsIL-6 and hs-CRP levels in group C were significantly higher than those in group B and group A(P＜0.05),while APN level in group C was significantly lower compared with group B and group A(P＜0.05).According to correlation analysis,serum hs-CRP level was positively correlated with IL-6(r=0.725,P＜0.05), with serum GHbA1cpositively correlated with hs-CRP and IL-6(r=0.873,0.912,P＜0.01),while serum APN level was negatively correlated with hs-CRP and IL-6 in group C(r=-0.816,-0.79,P＜0.01).ConclusionAPN is an antiatherogenic factor for atheromatosis,while IL-6 and hs-CRP are inflammatory factors resulting in atheromatosis.These three factors all participate in the pathogenesis and progression of atherosclerosis in T2DM patients with CHD.Early intervention for these inflammatory factors level can effectively delay the development of CHD in T2DM patients.

Type2 diabetes mellitus(T2DM);Coronary heart disease;Adiponectin;Interleukin-6;High sensitivity C-reactive protein

R587.2

A

1003—6350（2015）22—3298—04

2015-05-28)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.22.1197

沈陽市科技局課題（編號：F12-193-9-24）

曠勁松。E-mail：kjs_1965@163.com