P16、ER、CEA在宮頸腺癌和子宮內膜癌鑒別診斷中的臨床意義*

楊偉洪 鐘守軍 段立峰 米賢軍

宮頸腺癌（cervical adenocarcinoma）較鱗癌少見，而近年來有研究顯示，與宮頸鱗癌相比，宮頸原發腺癌發病率逐漸升高，在西方國家中宮頸腺癌在宮頸癌中占比為25%左右。據文獻報道宮頸腺癌可發生于18~84歲婦女，其平均發病年齡與宮頸鱗癌相仿，約49歲左右，多發生于更年期婦女，近年發病有年輕化趨勢[1]。子宮內膜腺癌和宮頸原發腺癌生物學行為均可向下擴展與向上延伸，宮頸腺癌多數起源于宮頸管內膜，最常見的為頸管內膜型，它可向子宮內膜方向分化形成子宮內膜樣癌和透明細胞癌，亦可向輸卵管上皮方向分化形成漿液乳頭狀腺癌[2-3]。子宮內膜腺癌也可以呈現漿液性改變，兩者有時在組織形態上具有相似之處，在活檢和診刮標本中來依靠形態學區分兩者比較困難的。兩者的治療及手術方式不同，因此宮頸腺癌和子宮內膜腺癌的鑒別診斷很重要。本研究采用SP免疫組化法檢測32例子宮頸腺癌和32例子宮內膜腺癌中P16、ER和CEA蛋白的表達情況并進行回顧性分析，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2003年1月-2014年1月確診原發性宮頸腺癌標本32例及子宮內膜腺癌32例石蠟包埋標本，

其中宮頸腺癌組患者年齡30~72歲，中位年齡45.2歲；子宮內膜腺癌組年齡28~68歲，中位年齡43.8歲。

1.2 試劑與方法 ER鼠抗人單克隆抗體、CEA單克隆抗體購自上海長嘉生物技術有限公司，P16單克隆抗體購自美國羅氏生物技術有限公司，為即用型抗體，免疫組化試劑盒以及DAB顯色劑均購自美國羅氏公司。石蠟切片常規脫蠟后應用全自動免疫組化染色儀（美國羅氏公司）進行免疫組化染色，每批染色設置均設已知陽性及陰性對照。

1.3 結果判斷 P16蛋白陽性定位于胞核和/或胞質，ER蛋白陽性定位于細胞核，CEA蛋白陽性定位于胞質和/或胞膜。根據陽性細胞在組織中所占面積分為4個等級：<5%為（-）、5~10%為弱（+）或可疑（+）、10%~30%為陽性，≥30%為強陽性。陰性、弱陽性及可疑陽性組合并為陰性病例組，陽性及強陽性合并為陽性病例組。

1.4 統計學處理 采用SPSS 17.0軟件對收集的數據進行整理與統計分析，計數資料采用 字2檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

P16、ER和CEA陽性表達率在子宮頸腺癌中分別為65.63%（21/32）、28.13%（9/32）、81.25%（26/32）， 而 在子宮內膜腺癌中分別為9.36%（3/32）、75.00%（24/32）、43.75%（14/32）。子宮頸腺癌中P16、CEA陽性表達率高于子宮內膜腺癌中（P<0.05），子宮內膜腺癌中ER的陽性表達率明顯高于子宮頸腺癌（P<0.05），見表1。

表1 P16、ER和CEA在宮頸腺癌及子宮內膜腺癌組織中的表達 例（%）

3 討論

子宮內膜腺癌屬于婦科常見惡性腫瘤，其發病率居高不下。近年來，宮頸腺癌發病率也逐漸提高。宮頸原發腺癌和子宮內膜癌的來源通常難以判定，臨床診斷中通常難以對子宮頸原發腺癌、宮體下段子宮內膜腺癌予以診斷，特別是采用診刮方法診斷時，更難以得到準確的診斷結果。即使在患者手術后對患者子宮全切標本展開分析，對兩者展開組織學定位也存在一定難度。然而，在臨床治療中，對子宮內膜腺癌、宮頸原發腺癌予以準確診斷，是確定有效治療措施、選定合理手術方案、對預后進行轉歸評價的必要條件，子宮頸腺癌與子宮內膜樣腺癌具有不同的手術方式和治療方案，患者的預后也不同，如子宮內膜腺癌對激素治療敏感性好，患者預后較好，然而宮頸腺癌對激素治療并不敏感，如將宮頸腺癌誤診為子宮內膜腺癌則會影響患者治療效果，導致治療最佳時機延誤，故而探討兩者有效的診斷方法具有重要意義。

原發性宮頸腺癌近年在普通人群中的發病率有逐漸上升的趨勢。腫瘤大體上無特征性改變。組織學可分為以下幾種類型：黏液性腺癌、子宮內膜樣腺癌、透明細胞腺癌、漿液性腺癌、中腎腺癌等[4]。其中宮頸管亞型是最常見的類型，約占宮頸腺癌的70%，鏡下表現類似頸管上皮細胞，并有黏液分泌，黏液不顯著時不易與侵犯宮頸的子宮內膜腺癌區分。子宮內膜樣腺癌亞型僅在高分化時才有可能從形態上與子宮內膜腺癌鑒別。本次研究通過免疫組化方法對子宮內膜腺癌、宮頸原發腺癌組織中的P16、ER、CEA等表達情況進行檢查，探討P16、ER、CEA檢查在兩者鑒別診斷中的應用價值，以期為臨床提供有力依據。

基因P16是一種定位于人類染色體9p21的腫瘤抑制基因，該區域容易出現染色體雜合、倒置及易位等現象，是細胞周期調節蛋白之一，它可競爭抑制細胞素DI與CDK4結合，并特異性地抑制CDK4的活性，使抑癌基因Rb的蛋白處于非磷酸化的活性狀態，從而阻止細胞由Gl期進入S期，抑制細胞繁殖。若P16ink4A基因出現突變，可導致細胞異常增生。Negri等[5]通過免疫組化檢測28例宮頸原位腺癌與浸潤性宮頸腺癌時，發現P16陽性表達率100%，而高危HPV感染率100%，由此可知P16屬于宮頸腺癌標志物。生物學研究表明，宮頸原發腺癌與高危型HPV關系密切[6]，高危型HPV E7病毒蛋白可與Rb結合并使其失活.導致P16蛋白的過度表達[7-8]。P16在宮頸原發腺癌中彌漫陽性或強陽性表達，在子宮內膜癌中陰性或弱陽性表達[9-11]。從這一結論可知，在子宮內膜腺癌、宮頸原發腺癌鑒別診斷中P16可發揮重要的應用價值。有研究顯示，ER在在宮頸內膜腺癌中并無表達，而在子宮內膜腺癌中有所表達。Alkushi等[12]報道ER在子宮內膜腺癌中有較強表達，陽性率在70%~90%之間，在宮頸原發腺癌中通常為弱表達，陽性率在10%~40%之間；CEA是提取自胎兒腸、結腸腺癌的腫瘤相關抗原，是內胚層分化縮短，其在腫瘤組織內陽性表達率較高。正常組織中膽囊上皮細胞、胃腸中均有CEA的表達，而宮頸腺癌、宮頸鱗癌中均有表達，故而CEA并無明顯特異性。相關研究顯示，在宮頸原發腺癌中大多呈廣泛陽性或強陽性表達，陽性率為50%~100%，子宮內膜腺癌中常呈灶性表達，陽性率為0~50%。

在本研究中，P16、ER、CEA在宮頸原發腺癌中的陽性表達率分別為65.63%、28.13%、81.25%，在子宮內膜腺癌中則分別為9.36%、75.00%、43.75%，P16、CEA在子宮頸腺癌多數病例中廣泛陽性或強陽性表達而在子宮內膜腺癌中灶性弱陽性或陰性表達，ER在子宮內膜腺癌中高表達而在宮頸腺癌中低表達，差異有統計學意義，與之前的報道基本一致[13-15]，提示P16、ER、CEA蛋白聯合檢測表達作為輔助性的免疫組織化學標記來鑒別子宮頸腺癌和子宮內膜腺癌具有較好的臨床應用價值。

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