α-硫辛酸對早期糖尿病腎病患者保護作用機制研究

宿世震，劉 杰

(山東中醫(yī)藥高等專科學校，山東 煙臺 264199)

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α-硫辛酸對早期糖尿病腎病患者保護作用機制研究

宿世震，劉 杰

(山東中醫(yī)藥高等專科學校，山東 煙臺 264199)

目的：探討α-硫辛酸對早期糖尿病腎病(DN)患者的保護作用及其機制。方法：選取40例早期DN患者為治療組，在常規(guī)治療基礎上加用α-硫辛酸(600mg/d)，取同期查體健康者40例為對照組，治療前及治療6個月后檢測患者空腹血糖(FBG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、血肌酐(Scr)、尿微量蛋白(mAlb)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)、超敏-C反應蛋白(hs-CRP)等指標，進行對比分析。結果：與對照組比較，治療前DN患者的FBG、HbA1c、mAlb、MDA、TNF-α、IL-6、hs-CRP升高，SOD水平下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；采用α-硫辛酸治療6個月后，DN患者的FGB、HbA1c、Scr較治療前無明顯變化，但mAlb、MDA、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平下降，SOD水平升高，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。結論： α-硫辛酸對早期DN患者具有保護作用，推測其機制與抑制氧化應激及降低炎癥水平有關。

糖尿病腎病；α-硫辛酸；氧化應激；炎癥因子

糖尿病腎病(Diabetic Nephropathy，DN)是糖尿病患者常見的慢性微血管并發(fā)癥之一，是我國終末期腎病的主要病因。研究發(fā)現(xiàn)，DN與氧化應激關系密切[1]，α-硫辛酸是一種強抗氧化劑，具有清除氧自由基或活性氧的作用[2]，對糖尿病并發(fā)癥具有較好的治療作用，尤其對于糖尿病神經病變效果突出[3]，但對DN的治療研究不多，本研究通過觀察早期DN患者在α-硫辛酸治療前后的尿微量白蛋白(urinary microalbumin，mAlb)、氧化應激水平及炎癥因子的變化，探討α-硫辛酸對早期DN患者的腎臟保護作用及可能的機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我校附屬醫(yī)院2013年8月—2014年10月收治的2型糖尿病患者40例，均符合WHO 1999年診斷標準且尿白蛋白排泄率為30～300mg/24h(即符合DN診斷的Ⅲ期)，年齡34～69歲，平均年齡(55.32±9.26)歲，其中男性28例，女性12例。排除標準：①近期發(fā)生過糖尿病急性并發(fā)癥及嚴重的慢性并發(fā)癥的患者；②非糖尿病引發(fā)的其他腎臟疾病；③近期使用過腎毒性藥物的患者；④近期使用過他汀類、血管緊張素轉換酶抑制劑、血管緊張素受體拮抗劑藥物的患者；⑤無嚴重心、肝、肺疾病；⑥妊娠期、哺乳期的患者以及其他不能合作的患者。選取同期體檢中心40例查體健康者(排除高血壓、糖尿病及其他與腎臟有關的疾病)作為對照組，年齡35～64歲，平均年齡(54.21±8.59)歲，其中男性25例，女性15例。 試驗結束時，治療組共計37例(2例退出，1例失訪)。兩組試驗者治療前SBP、DBP、BMI、SCr等資料比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，具有可比性，見表1。

表1 治療前兩組試驗者基本情況比較 (±s)

1.2 藥物與試劑

α-硫辛酸片，山東齊都藥業(yè)有限公司，批號20130206；尿mAlb試劑盒，北京昊誠志遠生物科技有限公司，批號20141025；超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、白細胞介素-6(Interleukins，IL-6)、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor，TNF-α)、超敏C反應蛋白(hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP) 試劑盒，南京建成生物工程研究所，批號20141221、20141221、20141220、20141209、20141209。

1.3 儀器

7600-020生化分析儀，日本日立公司；tu-1810紫外可見分光光度計，北京普析通用儀器有限責任公司；TG1850-WS離心機，上海盧湘儀器有限公司；Multiskan MK3酶標儀，芬蘭Thermo fisher公司。

1.4 方法

入選的40例DN患者，在原治療(控制飲食、合理運動、口服降糖藥或注射胰島素)的基礎上加用α-硫辛酸片(300mg/片)，每日餐前半小時口服2片，連續(xù)治療6個月。在治療期間維持血糖相對穩(wěn)定，F(xiàn)BG處于5.0～8.0mmol/L之間，2h血糖<10mmol/L。檢測并記錄治療前后各組試驗者的收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、血肌酐(SCr)，測量身高、體重及計算體重指數(shù)(BMI)。

1.5 標本采集與指標檢測

兩組試驗者在給藥前均空腹12h，次晨抽取肘靜脈血液10mL，離心分離血清測定FBG、HbA1c、Scr、SOD、MDA、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平。收集晨尿(中段尿)5mL，測定尿微量蛋白和尿肌酐。試驗結束時復測上述指標(對照組不再測定)。FBG應用葡萄糖氧化酶法測定，HbA1c應用色譜法測定，肌酐應用酶法測定，血清SOD應用黃嘌呤氧化酶法測定，血清MDA應用硫代巴比妥酸法測定，TNF-α、IL-6、hs-CRP應用酶聯(lián)免疫吸附法測定。為了減少尿液濃縮及稀釋的影響，尿微量白蛋白采用mAlb/Cr(mg/g·Cr-1)的方法計算。

1.6 統(tǒng)計學方法

2 結果

治療前，與對照組比較，治療組患者的FBG、HbA1c、mAlb、MDA、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平升高明顯，而SOD水平下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。治療后，與對照組比較，治療組患者FBG、HbA1c、SCr無明顯變化，血清SOD水平較治療前升高，mAlb、MDA、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平較治療前下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表2。

3 討論

DN是終末期腎功能衰竭的主要原因，mAlb是早期發(fā)現(xiàn)及診斷DN的敏感指標，mAlb的升高提示患者出現(xiàn)腎小球及腎小管損傷。目前認為，DN患者存在明顯的氧化應激反應，由于糖脂代謝紊亂，自由基產生增多，通過激活蛋白激酶C、各種細胞因子和轉錄因子，使腎小球濾過增加、基底膜增厚、系膜擴張、間質纖維化等促進DN的發(fā)生、發(fā)展，尿蛋白排出增加[4-5]。本研究結果顯示，DN患者體內SOD水平降低、MDA含量升高，證實了DN患者體內氧化應激水平增高，治療后，血清SOD水平升高、MDA含量下降，說明α-硫辛酸可以改善DN體內的氧化應激狀態(tài)，提高其抗氧化的能力。

近年來許多動物實驗和臨床研究均表明，DN往往存在著炎癥介質的表達增高[1,6]。TNF-α是炎癥介質連鎖反應中最早的啟動因子，可以激活體內細胞因子級聯(lián)反應，誘導炎癥介質生成。CRP是由肝臟合成的急性期時相反應蛋白，在正常人血液中含量甚微，采用高靈敏度方法檢測稱為hs-CRP，CRP與尿mAlb排泄相關，其高低可反映炎癥水平。IL-6是由活化的單核細胞、血管內皮細胞等合成，可刺激腎小球系膜細胞增殖、導致腎小球硬化繼而促進DN的發(fā)生、發(fā)展。氧化應激反應的增加可以促進炎性細胞因子的產生，同樣炎性細胞因子的增加可以刺激自由基的產生，加重氧化應激，如此形成惡性循環(huán)[7-8]。本研究顯示，DN患者體內的炎癥因子水平增高，驗證了DN發(fā)病時的體內炎癥狀態(tài)，治療后，炎癥指標表達水平均有所下降，提示α-硫辛酸可以改善DN患者體內的炎癥狀態(tài)。

表2 治療前后各指標比較 (±s)

注：與對照組治療前比較，*P<0.01；與本組治療前比較，△P<0.01。

α-硫辛酸屬于維生素類物質，存在于線粒體內，是線粒體脫氫酶的天然輔助因子，含有雙硫五元環(huán)結構，兼具脂溶性與水溶性的特性，可以在全身通行無阻，到達任何一個細胞部位，具有顯著的親電子性和與自由基反應的能力，不僅可以直接清除氧自由基和活性氧，還可以螯合金屬離子，從而減輕鐵、銅等金屬離子催化產生強毒性自由基導致的組織損傷[2]。此外，α-硫辛酸還可再生其他抗氧化劑，因此其具有強抗氧化性，被稱為“抗氧化劑中的抗氧化劑”。Yi X等[9]應用C57BL/6J小鼠復制DN模型，補充α-硫辛酸后DN小鼠腎臟的氧化應激水平降低，腎組織結構損傷得到一定程度的恢復。陶功華等[10]研究發(fā)現(xiàn)，α-硫辛酸干預治療2型糖尿病大鼠12周后，胰島素的分泌增加，促進修復氧化應激損傷的胰腺β細胞。本實驗證實了硫辛酸可以減少尿蛋白的排出，其保護腎臟的作用可能與抑制機體的氧化應激反應及降低炎癥水平有關。

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[10] 陶功華，王莉萍，俞筱琦，等.硫辛酸對2型糖尿病大鼠氧化應激致胰島細胞凋亡的影響[J].環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學，2014，31(4)：247-271.

(責任編輯：魏 曉)

Protection Mechanism Study of Alpha-lipoic Acid for Patients with Early Diabetic Nephropathy

Su Shizhen，Liu Jie

(Shandong College of Traditional Chinese Medicine，Yantai 264199，China)

Objective:To discuss the protective effect and mechanismof alpha-lipoic acid in patients with early diabetic nephropathy (DN).Methods:Selected 40 patients with early DN as treatment group,on the basis of routine therapy + alpha-lipoic acid (600 mg/d),Select the same period on examination of 35 cases of healthy subjects as control group.Before and after 6 months treatment detection in patients with fasting blood glucose(FBG)，glycated hemoglobin (HbA1c),serum creatinine (Scr),microalbuminuria protein (mAlb),serum superoxide dismutase (SOD),malondialdehyde (MDA),tumor necrosis factor (TNF alpha),interleukin 6 (IL-6),hypersensitive c-reactive protein (hs-CRP) index were analyzed.Results:Compared with control group,treatment of DN patients before FBG,HbA1c,mAlb,MDA,TNF alpha,IL-6,hs-higher CRP present,SOD levels drop，the difference has statistical significance(P<0.01).Compared with before treatment，after six months of alpha-lipoic acid treatment,patients with DN FGB,HbA1c，Scr has no obvious change，mAlb,MDA，TNF alpha,IL-6,hs-CRP levels drop,SOD levels,statistically significant differences (P<0.01).Conclusion:Alpha-lipoic acid plays a protective role in patients with early DN,speculated that the mechanism associated with inhibiting oxidative stress and reduce inflammation levels.

Alpha-lipoic Acid；Diabetic Nephropathy；Oxidative Stress；Inflammatory Cytokines

2015-06-25

宿世震(1979-)，男，山東中醫(yī)藥高等專科學校講師，研究方向為藥理學。

R256.5

A

1673-2197(2015)21-0108-03

10.11954/ytctyy.201521051