自身免疫性肝病肝抗原抗體譜檢測(cè)的臨床意義

宋 玲，侯佳宜，趙 奮，梁佩君

(山西省中醫(yī)院，山西太原 030012)

自身免疫性肝病肝抗原抗體譜檢測(cè)的臨床意義

宋 玲，侯佳宜，趙 奮，梁佩君

(山西省中醫(yī)院，山西太原 030012)

目的:探討肝抗原自身抗體在自身免疫性肝病中的臨床意義。方法:分別檢測(cè)97例自身免疫性肝病患者、35例慢性乙型肝炎(HBV)患者、30例丙型肝炎(HCV)患者和40例健康體檢合格者的肝抗原自身抗體。結(jié)果:血清抗肝抗原自身抗體在各組肝病中的陽(yáng)性率分別為自身免疫性肝炎(AIH)的ANA、LKM-1、LC1、SLA抗體為84.21%、47.4%、42.1%、5.3%;原發(fā)性膽汁肝硬化(PBC)的ANA、AMA-2、SP100、gp210抗體為88.73%、83.1%、30.1%、21.1%。HBV的ANA為5.71%;HCV的ANA、AMA-2抗體為3.33%、3.33%。結(jié)論:肝抗原抗體譜檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝炎的診斷和分型具有重要意義。

自身免疫性肝病;肝抗原抗體譜;慢性乙型肝炎;丙型肝炎;臨床意義

自身免疫性肝病是一類病因不明，以肝臟為靶器官的自身免疫性疾病，可分為自身免疫性肝炎(autoimmune hepatis，AIH)Ⅰ至Ⅲ型、原發(fā)性膽汁性肝硬化(primary biiiary cirrhosis，PBC)和原發(fā)性硬化性膽管炎(primary sclerosing cholangitis，PSC)。由于自身免疫性肝病的癥狀和病毒性肝炎的癥狀相似，且在治療方法上有著很大的區(qū)別，因此，及時(shí)準(zhǔn)確地檢測(cè)肝抗原自身抗體對(duì)疾病的診斷和鑒別診斷有重要的意義［1］。本研究對(duì)97例自身免疫性肝病患者，35例慢性乙型肝炎(hepatitis B virus，HBV)和30例丙型肝炎(hepatitis C virus，HCV)患者的抗肝抗原自身抗體進(jìn)行檢測(cè)，以探討肝抗原自身抗體在自身免疫性肝病中的臨床意義。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2014年1月～2015年6月在山西省中醫(yī)院就診的肝病患者162例，其中自身免疫性肝病患者97例，包括AIH 19例、PBC 71例、PSC 7例，診斷符合美國(guó)肝臟病學(xué)會(huì)及國(guó)際自身免疫性肝炎修訂的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［2］;HBV 35例;HCV 30例。后二者診斷符合病毒性肝炎防治方案標(biāo)準(zhǔn)［3］。另外收集40例健康體檢合格者作為正常對(duì)照組。

1.2 標(biāo)本采集

抽取待檢驗(yàn)者清晨空腹靜脈血3.5 mL，離心分離血清，4℃保存，1周內(nèi)檢測(cè)完畢。

1.3 試劑與方法

采用德國(guó)IMTEC公司提供定量檢測(cè)ANA，該試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法，將經(jīng)濃度梯度離心分離的海拉細(xì)胞小心固定于滴定板微孔上，其后與患者血清中的ANA結(jié)合。通過(guò)辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的第二抗體(抗人IgG，IgM和IgA)，檢測(cè)此結(jié)合的抗體。加入底物后，溶液顏色的深淺和檢測(cè)抗體的濃度成正比，檢測(cè)結(jié)果，高于55 U/mL的結(jié)果為陽(yáng)性。儀器由愛(ài)德康生物科技有限公司生產(chǎn)，型號(hào):Addcare ELISA600。

采用德國(guó)Seramun公司提供自身免疫肝病抗體譜檢測(cè)試劑盒，一次性同時(shí)檢測(cè) AMAM-2、SP-100、抗gp210、抗LKM1、抗LC1、抗SLA抗體。該試劑盒用線性免疫分析法，將核抗原和相關(guān)胞漿抗原包被與硝酸纖維素膜上，封閉處理，膜條與稀釋的患者血清(1∶101)共同孵育使樣本中的特異性抗體與膜條上的抗原結(jié)合，加入無(wú)色TBM底物后，結(jié)合的免疫復(fù)合物在膜條上顯現(xiàn)的藍(lán)色條帶，將實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑盒提供的L1A特異判讀卡比較。陽(yáng)性結(jié)果:條帶顏色比Cutoff帶相同或深。陰性結(jié)果:條帶顏色比Cutoff帶淺。儀器:Blotray866自動(dòng)蛋白印跡儀40(深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司生產(chǎn))。

化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清中病毒性肝炎標(biāo)志物HB-sAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗HBc和抗HCV。由北京科美生物有限公司提供全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑盒。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行相應(yīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間對(duì)比采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ANA的檢出情況

AIH、PBS和PSC組分別與正常對(duì)照組比較，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=41.93、77.93、25.42，均P＜0.05)。HBV和HCV與正常對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.502、0.043，均P＞0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 線性免儀分析法檢測(cè)肝抗原自身抗體

PSC和HBC患者肝抗原自身抗體均為陰性，在丙型肝炎中有1例AMA-2抗體陽(yáng)性，結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 各組ANA檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率的比較 %

表2 97例肝病血清抗肝抗原自身抗體檢出情況 n(%)

3 討論

ANA是一組自身各種細(xì)胞核成分作為靶抗原的自身抗體總稱，可見(jiàn)于多種自身免疫性疾病，ANA敏感性高，但特異性較低，在臨床上是個(gè)極其重要的篩查實(shí)驗(yàn)。從本研究檢測(cè)結(jié)果看，ANA檢測(cè)在AIH、PBC、PSC中血清的濃度明顯高于HBV、HCV和正常對(duì)照組。從診斷意義上講，ANA陽(yáng)性(高濃度)標(biāo)志著自身免疫性疾病的可能性較大，但是ANA陽(yáng)性(低濃度)并不一定患有自身免疫性疾病，如感染性疾病，肝臟疾病，結(jié)核等。本研究也證實(shí)了此觀點(diǎn)。同時(shí)也有文獻(xiàn)報(bào)道，正常老年人也可有低濃度的ANA陽(yáng)性［4］。所以只有高濃度的ANA才對(duì)自身免疫性疾病具有診斷意義。

線性免疫分析法檢測(cè)肝抗原自身抗體，在AILD各組中肝抗原自身抗體明顯高于其他組，AIH患者主要有LKM-1、LC1、SLA等抗體陽(yáng)性，LKM-1是Ⅱ型自身免疫性肝病(AIH-Ⅱ)的血清學(xué)指標(biāo)，常作為Ⅱ型AIH的診斷依據(jù)。LC1抗體為AIH-Ⅱ自身免疫性肝炎(AIH)的另一特異性抗體，此抗體優(yōu)于LKM-1抗體，二者同時(shí)檢測(cè)提高了AIH的檢出率。SLA抗體對(duì)Ⅲ型自身免疫肝病(AIH-Ⅲ)具有高度特異性，其陽(yáng)性預(yù)測(cè)值幾乎為100%，如果此抗體陽(yáng)性并且出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀，基本可診斷為AIH。從本研究結(jié)果可得出，與AIH有關(guān)的自身抗體為L(zhǎng)KM-1、LC1、SLA等具有高度特異性的自身抗體，是重要的診斷指標(biāo)［5］。

PBC患者主要有AMAM-2、SP-100、gp210等抗體陽(yáng)性，本研究中PBS組AMAM-2陽(yáng)性率高達(dá)90.1%，具有高度的敏感性，是診斷原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)的一個(gè)有價(jià)值的指標(biāo)，但特異性不好，如丙型肝炎也可檢測(cè)出此抗體，同時(shí)也有文獻(xiàn)報(bào)道在 HCV、AIH、干燥綜合征等也可檢測(cè)出AMAM-2抗體［6］。SP-100抗體的陽(yáng)性率為30.1%，但他的特異性幾乎為100%，與文獻(xiàn)報(bào)道［6］基本符合，所以患者血清中檢測(cè)出SP-100抗體，對(duì)提高 PBC的診斷有較大價(jià)值。gp210是原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)高度特異性抗體，陽(yáng)性率為21.1%，特異性可高達(dá)96%～99%［7］，抗gp210抗體可作為PBC患者的預(yù)后指標(biāo)，抗體陽(yáng)性提示患者預(yù)后不良。另外，診斷PBC要看特異性抗體SP-100、gp210，若患者檢測(cè)出AMAM-2抗體陽(yáng)性，并同時(shí)檢測(cè)出SP-100抗體和gp210抗體陽(yáng)性，可結(jié)合臨床，基本可診斷為PBC。與AIH及PBC相比，PSC無(wú)免疫學(xué)特征，由于病例太少有待于積累病例以便進(jìn)一步觀察。

綜上所述，隨著免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的迅速發(fā)展，自身抗體的聯(lián)合檢測(cè)已經(jīng)步入了普及推廣階段，采用線性免疫分析法聯(lián)合檢測(cè)肝抗原自身抗體，在自身免疫性肝病中占重要地位，從而提高了自身免疫性肝病的檢出率，為臨床診斷提供了可靠的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，對(duì)確診自身免疫性肝病有極其重要的意義。

［1］ 夏 明.從自身免疫性肝病抗體檢測(cè)看其與病毒性肝病的相關(guān)性［J］.中國(guó)民康醫(yī)學(xué)，2014，12(17):50-51.

［2］ 劉京燕.自身抗體在自身免疫性肝病中的表達(dá)及臨床價(jià)值［J］.中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2013，8(28):102-103.

［3］ 中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲(chóng)病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)分會(huì).病毒性肝病防止防治方案［J］.中華肝病雜志，2008(6):324-329.

［4］ 曾東良，莫寶妹，姜煥好，等.自身抗體檢測(cè)在慢性肝病診斷中的意義［J］.海南醫(yī)學(xué)，2011，9(20):117-119.

［5］ 李香鐘.自身抗體檢查在自身免疫性肝病診斷中的應(yīng)用［J］.甘肅醫(yī)藥，2014，33(1):48-50.

［6］ 畢研梅.原發(fā)性膽汁肝硬化檢測(cè)自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體譜的臨床意義［J］.中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2015，9:126-128.

［7］ 謝守風(fēng)，楊 靜，王 寧，等.自身抗體檢測(cè)對(duì)肝病患者鑒別價(jià)值［J］.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2015，24(5):549-552.

本文編輯:周文超

R575

A

1671-0126(2015)06-0032-03

宋 玲，女，主管技師，從事臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)工作