射干化學成分研究

張杰等

摘要

[目的]研究射干中化學成分。[方法]采用硅膠柱層析和Sephadex LH-20等多種方法進行分離純化，并根據波譜數據進行結構鑒定。[結果]從射干中分離得到了11個化合物，除化合物7屬于雙苯吡酮外，其他化合物均屬于異黃酮類。在乙酸乙酯萃取物中分離鑒定了6個化合物，經波譜解析分別鑒定為鳶尾苷元（tectorigenin）、鳶尾甲黃素A（tectorigenin A）、野鳶尾黃素（irigenin）、鳶尾甲黃素B（iristectorigenin B）、次野鳶尾黃素（irisflorentin）、白射干素（dichotomitin）；正丁醇萃取物中分離鑒定了5個化合物，分別為芒果苷（mangiferin）、鳶尾甲苷A（iristectoridin A）、鳶尾苷（tectoridin）、鳶尾甲苷B（iristectoridin B）、野鳶尾苷（iridin）。[結論]該研究結果涵蓋了異黃酮和雙苯吡酮類成分，為射干藥材進一步開發和利用提供了物質基礎。

關鍵詞射干；異黃酮；化學成分

中圖分類號S567文獻標識碼A文章編號0517-6611（2015）24-057-03

射干為鳶尾科植物射干Belamcanda chinensis（L.）DC.的干燥根莖，具有清熱解毒、消痰、利咽的功效，用于咽喉腫痛、痰涎壅盛、咳嗽氣喘，為常用中藥材。射干藥材中主要有效成分為異黃酮類成分，現代研究表明，此類成分具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒、清除自由基及抗癌等重要的藥理與藥效作用。基于其顯著的藥理活性，因此對射干異黃酮類活性成分探究具有重要的研究價值。該試驗采用硅膠柱層析和Sephadex LH-20柱層析等多種方法對射干中化學成分進行分離純化，并根據波譜數據進行結構鑒定，為射干藥材的進一步開發和利用提供了物質基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1

研究對象。射干來源于泰州市高港中藥飲片有限公司，產地為湖北，經嘉興學院醫學院王峻副教授鑒定為Belamcanda chinensis（L.）DC.的干燥根莖。

1.1.2

主要儀器。核磁共振儀（Varian INOVA-400型，TMS為內標），Sephadex LH20（美國GE公司），Waters 1525分析型高效液相色譜儀（美國Waters公司）。

1.1.3

主要試劑。薄層色譜及柱色譜用硅膠（青島遠洋化工有限公司）；液相用甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

1.2 方法

取射干藥材10 kg粉碎后，過3號篩，用甲醇回流提取3次（每次10倍量，提取2 h）。合并提取液并減壓濃縮得到甲醇提取物，將甲醇提取物分散于水中成懸濁液，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，濃縮得到乙酸乙酯部分（765.3 g）和正丁醇部分（543.6 g）。乙酸乙酯部分經硅膠柱色譜粗分，用石油醚-乙酸乙酯（1∶0～0∶1）梯度洗脫，用石油醚-乙酸乙酯（2∶1）薄層檢測，得到9個流分（Fr.1～Fr.9）。其中將Fr.7～9再反復經Sephadex LH20柱層析以及重結晶分離純化得到化合物1～6。取正丁醇部分經硅膠柱色譜粗分，用乙酸乙酯洗脫，乙酸乙酯-甲醇-水（25∶5∶1）薄層檢測，得到6個流分，各部分再反復經SephadexLH20柱層析得到化合物7～11。

2結果與分析

2.1化合物1

白色針晶，分離得到107.2 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為13.04（1H，s，OH-5）、8.29（1H，s，H-2′）、7.37（2H，d，J=8 Hz，H-2′，6′）、6.82（2H，d，J=8Hz，H-3′，5′）、6.47（1H，s，H-8）、3.75（3H，s，O-CH3-6）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為180.5（C-4）、158.1（C-5）、131.6（C-6）、154.0（C-7）、94.0（C-8）、153.2（C-9）、104.7（C-10）、121.8（C-1′）、130.2（C-2′，6′）、115.1（C-3′，5′）、157.4（C-4′）、60.0（OCH3-6）。以上數據與文獻[7]一致，故鑒定化合物1為鳶尾苷元（tectorigenin）。

2.2化合物2

白色針晶，分離得到62.7 mm。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為13.06（1H，s，OH-5）、1075（1H，s，OH-7）、9.14（1H，s，OH-3′）、8.34（1H，s，H-2）、6.49（1H，s，H-8）、6.83（1H，d，J=8Hz，H-5′）、6.94（1H，dd，J=8Hz，1.6Hz，H-6′）、6.99（1H，d，J=1.6Hz，H-2′）、3.80（3H，s，OCH3-6）、3.75（3H，s，OC-H3-4′）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為152.7（C-2）、121.9（C-3）、180.6（C-4）、157.5（C-5）、131.4（C-6）、154.3（C-7）、93.9（C-8）、153.3（C-9）、104.9（C-10）、121.7（C-1′）、113.3（C-2′）、146.7（C-3′）、147.3（C-4′）、115.3（C-5′）、121.6（C-6′）、60.0（OCH3-6）、55.7（OCH3-4′）。以上數據與文獻[8]一致，故鑒定化合物2為鳶尾甲黃素A（tectorigenin A）。

2.3化合物3

淡黃色針晶，分離得到413.6 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為13.03（1H，s，OH-5）、1077（1H，s，OH-7）、9.24（1H，s，OH-3′）、8.37（1H，s，H-2）、6.50（1H，s，H-8）、6.71（1H，d，J=2Hz，H-2′）、6.66（1H，d，J=2Hz，H-6′）、3.70（3H，s，H-2）、3.75（3H，s，OCH3-4′）、3.79（3H，s，OCH3-5′）。以上數據與文獻[9]一致，故鑒定化合物3為野鳶尾黃素（irigenin）。

2.4化合物4

淡黃色針晶，分離得到260.1 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為13.06（1H，s，OH-5）、1075（1H，s，OH-7）、8.32（1H，s，H-2）、6.49（1H，s，H-8）、7.14（1H，d，J=2Hz，H-2′）、6.83（1H，d，J=8Hz，H-5′）、6.98（1H，dd，J=8Hz，H-6′）、9.05 （1H，s，OH-4′）、379（3H，s，OCH3-6）、3.75（3H，s，OCH3-3′）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為154.3（C-2）、121.7（C-3）、180.5（C-4）、153.3（C-5）、131.4（C-6）、157.5（C-7）、93.9（C-8）、152.7（C-9）、104.9（C-10）、121.8（C-1′）、112.0（C-2′）、147.7（C-3′）、146.1（C-4′）、116.4（C-5′）、121.6（C-6′）、55.7（OCH3-6）、59.9（OCH3-3′）。以上數據與文獻[8]一致，故鑒定化合物4為鳶尾甲黃素B（iristectorigenin B）。

2.5化合物5

白色針晶，分離得到302.4 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為8.29（1H，s，H-2）、7.00（1H，s，H-8）、6.18（2H，s，OCH2O）、6.83（2H，s，H-2′， 6′）、3.80（6H，s，OCH3-2′， 6′）、3.69（3H，s，OCH3-4′）、3.91（3H，s，OCH3-5）。以上數據與文獻[10]一致，故鑒定化合物5為次野鳶尾黃素（irisflorentin）。

2.6化合物6

淡黃色針晶，分離得到124.3 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為12.89（1H，s，OH-5）、9.26（1H，s，OH-3′）、8.47（1H，s，H-2）、6.68（1H，s，H-8）、673（1H，s，H-2′）、6.87（1H，s，H-6′）、6.18（2H，s，OCH2O）、3.79（3H，s，OCH3-4′）、3.70（3H，s，OCH3-5′）。13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為155.2（C-2）、122.1（C-3）、180.6（C-4）、154.0（C-5）、129.7（C-6）、141.4（C-7）、89.6（C-8）、150.3（C-9）、107.4（C-10）、125.8（C-1′）、110.4（C-2′）、150.3（C-3′）、136.5（C-4′）、153.0（C-5′）、104.6（C-6′）、103.0（OCH2O）、60.0（OCH3-4′）、55.8（OCH3-5′）。以上數據與文獻[11]一致，故鑒定化合物6為白射干素（dichotomitin）。

2.7化合物7

淡灰黃色針晶，分離得到62.4 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為13.75（1H，s，OH-1）、10.58（3H，brs，OH-3，6，7）、7.33（1H，s，H-8）、6.80（1H，s，H-5）、6.36（1H，s，H-4）、4.57（1H d， J=7.6Hz，H-1′）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為179.1（C-9）、164.0（C-3）、161.9（C-1）、156.4（C-4a）、155.3（C-6）、151.2（C-10a）、144.3（C-7）、111.3（C-8a）、107.8（C-8）、107.6（C-2）、102.6（C-5）、101.4（C-9a）、93.5（C-4）、81.6（C-5′）、79.1（C-1′）、73.3（C-2′）、70.8（C-3′）、70.4（C-54′）、61.6（C-6′）。以上數據與文獻[12]一致，故鑒定化合物7為芒果苷（mangiferin）。

2.8化合物8

黃色粉末，分離得到114.8 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為12.94（1H，s，OH-5）、9.16（1H，s，OH-3′）、8.46（1H，s，H-2）、6.89（1H，s，H-8）、716（1H，s，H-2′）、6.84（1H，d，J=7.6Hz，H-5′）、 7.01（1H，d，J=7.6Hz，H-6′）、 3.80（3H，s，OCH3-6）、3.77（3H，s，OCH3-4′）、5.09（1H，d，J=7.2Hz，Glc-1）、3.19～4.62（葡萄糖上氫質子信號）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為152.4（C-2）、122.1（C-3）、180.7（C-4）、154.9（C-5）、132.5（C-6）、156.6（C-7）、94.0（C-8）、152.9（C-9）、106.4（C-10）、121.7（C-1′）、113.3（C-2′）、146.8（C-3′）、147.3（C-4′）、115.3（C-5′）、121.5（C-6′）、55.7（OCH3-4′） 、60.3（OCH3-6）、100.1（C-1′′）、73.1（C-2′′）、 76.7 （C-3′′）、69.6 （C-4′′）、 77.3 （C-5′′）、60.6 （C-6′′）。以上數據與文獻[13]一致，鑒定化合物8為鳶尾甲苷A（iristectoridin A）。

2.9化合物9

白色結晶，分離得到214.8 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為12.93（1H，s，OH-5）、9.59（1H，s，OH-4′）、8.44（1H，s，H-2）、6.89（1H，s，H-8）、740（2H，d，J=8Hz，H-3′，5′）、6.83（2H，d，J=8Hz，H-2′，6′）、3.77（3H，s，OCH3-6）、5.07（1H，d，J=8Hz，Glc-1）、318～3.48（葡萄糖上氫質子信號）。結合化合物1以及文獻[14]數據進行對比，鑒定化合物9為鳶尾苷（tectoridin）。

2.10化合物10

白色粉末，分離得到132.5 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為12.93（1H，s，OH-5）、9.06（1H，s，OH-3′）、8.43（1H，s，H-2）、6.88（1H，s，H-8）、682（1H，d， J=8.0Hz，H-2′）、7.01（1H，dd，J=1.8，8.0Hz，H-6′）、 7.15（1H，d，J=1.8Hz，H-5′）、 3.79（3H，s，OCH3-6）、3.77（3H，s，OCH3-3′）、5.09（1H，d， J=7.2Hz，Glc-1）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為152.4（C-2）、123.1（C-3）、180.7（C-4）、154.9（C-5）、132.5（C-6）、156.6（C-7）、94.0（C-8）、152.9（C-9）、106.4（C-10）、121.6（C-1′）、112.0（C-2′）、147.8（C-3′）、146.1（C-4′）、116.3（C-5′）、121.6（C-6′）、55.6（OCH3-4′）、60.3（OCH3-6）、100.1（C-1′′）、 73.1（C-2′′）、77.3 （C-3′′）、69.6 （C-4′′）、76.7 （C-5′′）、60.6（C-6′′）。以上數據與文獻[15]一致，鑒定化合物10為鳶尾甲苷B（iristectoridin B）。

2.11化合物11

白色粉末，分離得到342.7 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為12.93（1H，s，OH-5）、9.16（1H，s，OH-3′）、8.44（1H，s，H-2）、6.84（1H，s，H-8）、370（3H，s，OCH3-6）、3.75（3H，s，OCH3-4′）、3.79（3H，s，OCH3-5′）、5.08（1H，d，J=8Hz，Glc-1）、3.16～3.50（葡萄糖上氫質子信號）。結合化合物3以及文獻[16]數據進行對比，鑒定化合物11為野鳶尾苷（iridin）。

3結論

該研究采用硅膠柱層析、Sephadex LH-20柱層析和重結晶等方法進行分離純化，并根據波譜數據進行結構鑒定，系統分析射干中苷和苷元類的化學成分。結果表明，在乙酸乙酯萃取物中分離鑒定了6個化合物，經波譜解析分別鑒定為鳶尾苷元（tectorigenin，1）、鳶尾甲黃素A（tectorigenin A，2）、野鳶尾黃素（irigenin，3）、鳶尾甲黃素B（iristectorigenin B，4）、次野鳶尾黃素（irisflorentin，5）、白射干素（dichotomitin，6）；正丁醇萃取物中分離鑒定了5個化合物，分別為芒果苷（mangiferin，7）、鳶尾甲苷A（iristectoridin A，8）、鳶尾苷（tectoridin，9）、鳶尾甲苷B（iristectoridin B，10）、野鳶尾苷（iridin，11）。可見，從射干中分離得到了11個化合物，除化合物7屬于雙苯吡酮外，其他化合物均屬于異黃酮類。該研究結果涵蓋了異黃酮和雙苯吡酮類成分，為其進一步的研究提供物質基礎及對其藥用資源開發起到較好的促進作用。

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