酶聯免疫反應加速儀在HIV抗體初篩檢測中的應用

摘要：通過對比使用酶聯免疫反應加速儀與傳統的水浴箱方法在使用相同檢驗試劑的條件下，分別對10份陰陽性的對照血清、標準品血清、90份隨機抽樣血清進行酶聯免疫吸附分析法（ELISA）HIV抗體初篩檢測，對結果進行統計分析。實驗結果表明在確定最佳反應時間條件下，運用酶聯免疫反應加速儀與傳統的水浴箱方法在HIV抗體初篩檢測中具有等效性，并能加快反應的速度。

關鍵詞：HIV抗體初篩檢測；酶聯免疫反應加速儀；傳統水浴箱

酶聯免疫反應加速儀的原理是利用高頻電磁波加強生物分子振動，合理提供免疫反應所需的能量，從而加快酶免反應的速度，使抗原抗體反應更快以及更徹底。HIV即人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus）是一種感染人類免疫系統細胞的慢病毒（Lentivirus），屬于反轉錄病毒的一種。臨床特征表現為抗感染能力低下，從而導致容易發生反復而嚴重的感染，同時，容易伴有自身穩定和免疫監視功能的異常，使發生自身免疫性疾病、過敏性疾病和惡性腫瘤的機率增加。目前，HIV抗體初篩檢測在臨床檢驗中已經是普遍開展的項目。但是因為日常檢測任務比較大，提高HIV抗體初篩檢測的效率對于該項目在臨床更好的應用具有重要意義。本研究通過采用酶聯免疫反應加速儀和傳統的水浴箱兩種方法的比較，進一步明確酶聯免疫反應加速儀在HIV抗體初篩檢測中的適用性。

1資料與方法

1.1試劑 HIV抗體檢測試劑由廈門英科新創公司生產。

1.2儀器 NY/MMJ酶聯免疫反應加速儀（四川諾亞醫療科技有限責任公司）、37℃恒溫水浴箱、Tecan Sunrise酶標儀、Tecan Freedom Evolyzer 100-4洗板機、微量振搖器以及50～100 μl加樣槍數支。

1.3樣本來源 10份陰陽性對照血清由本實驗室提供，標準品血清為衛生部臨檢中心下發的標準品，隨機抽樣血清為本院住院患者90份血清標本。

1.4方法 酶聯免疫反應加速儀嚴格按照說明書進行操作，即抗原、抗體結合反應放置在酶聯免疫反應加速儀內30 min，顯色反應放置在酶聯免疫反應加速儀內7.5 min；傳統的水浴箱方法嚴格按照說明書進行操作。

1.5統計學方法 實驗數據采用spss 19.0軟件進行統計學分析，運用t檢驗和χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1線性試驗 待測樣本的濃度為衛生部臨檢中心提供的HIV標準品，稀釋所用血清為正常人血清，使用兩種儀器方法分別對HIV抗體初篩測定線性結果比較，見表1。

2.2 10份陰陽性對照血清以及90份隨機抽樣血清，共計100份血清樣本，2種檢測方法的定性結果。用酶聯免疫反應加速儀法和37℃傳統的水浴箱方法對100份HIV血清樣本進行HIV抗體初篩檢測，結果行χ2檢驗，χ2100，P=1，2種方法對100例血清樣本檢測結果無統計學差異，陽性符合率100%，陰性符合率100%，見表2。

3討論

酶聯免疫反應的基本原理是以酶作為標記指示物，以抗原抗體免疫反應為基礎的固相吸附測定方法[1]。抗原抗體的特異性結合是基于抗原決定簇與抗體超變區分子間互補性和親和性，它們的結合是因為抗原決定簇與抗體超變區構槽分子表面的結合，抗原表位與抗體超變區必須緊密接觸才會有足夠的結合力[2]。酶聯免疫反應加速儀能夠加強抗原、抗體的結合，為酶聯免疫反應提供最佳反應條件，保證了檢測結果的一致性，大大縮短了反應時間。提高了工作效率，減少患者等待時間[3]。楊曙梅[4]、劉軍禮[5]等對酶聯免疫加速儀在乙肝表面抗原檢測中的應用已做報道。本文結果表明酶聯免疫反應加速儀對HIV抗體的初篩檢測具有重要應用價值，在臨床檢驗中是非常值得推廣的。

參考文獻：

[1]李金明.臨床酶免疫測定技術[M].1版.北京：人民軍醫出版社，2005：11.

[2]王蘭蘭.臨床免疫學和免疫檢驗學[M].2版.北京：人民衛生出版社，2003：14.

[3]余曉慧.酶聯免疫反應加速儀在二步法乙肝病毒表面抗原檢測中的應用[J].實驗與檢驗醫學，2011，29（1）：97-98.

[4]楊曙梅，俞娟，王惠民.酶聯免疫反應加速儀在檢測乙肝表面抗原中的作用[J].中國實驗診斷學，2009，13（12）：153-154.

[5]劉軍禮，馬艷俠.酶聯免疫加速儀在檢測乙肝表面抗原中的應用[J].臨床和實驗醫學雜志，2010，9（15）：32-36.編輯/張燕