TCT與HPV—DNA檢測配合陰道鏡檢查在宮頸病變中的診斷價值

摘要：目的 探討應用宮頸液基細胞學檢查（TCT）、高危型人乳頭瘤病毒檢測（HPV-DNA）配合陰道鏡檢查對子宮頸癌前病變的診斷價值。方法 收集本院2009年6月～2010年6月婦科門診患者1121例行TCT篩查，并配以HPV-DNA檢測，陽性者行陰道鏡下活組織檢查。結果 TCT異常98例，占8.74%，其中ASC-US 49例，低度鱗狀上皮內病變28例，高度鱗狀上皮內病變16例，宮頸鱗癌4例，腺癌1例。隨細胞學診斷級別的升高，HPV感染率上升；高危HPV-DNA檢出率隨病變程度的加重呈上升趨勢。結論 采用TCT及高危型HPV-DNA初篩，異常者配合陰道鏡下活檢，可提高宮頸癌前病變檢出率。

關鍵詞：液基細胞學； 人乳頭瘤病毒； 宮頸癌； 宮頸上皮內瘤變； 陰道鏡

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，其發病率僅次于乳腺癌，居婦科腫瘤的第二位。我國宮頸癌患病人數和死亡人數約占全世界的1/3。現已明確HPV感染是宮頸癌發生的主要病因[1]。宮頸癌的發生是一個連續的過程，即由細胞分化失調到不典型增生，到原位癌，最后發展成宮頸癌，該過程約需10年。因此，宮頸癌是一種可防、可治的疾病，關鍵是通過篩查，及早發現癌前病變，防患于未然[2]。該文對本院1121例婦科門診患者進行TCT聯合HPV-DNA檢測，并對陽性病例輔以陰道鏡下多點活檢病理檢查，以探討TCT 與HPV-DNA檢測和配合陰道鏡活檢在宮頸病變中的診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 隨機收集2009年6月～2010年6月在本院婦科門診行宮頸細胞學檢查者1121例，對TCT檢查異常者，進一步行HPV-DNA檢測及陰道鏡下活組織檢查。年齡20～72歲，平均年齡37.28歲。檢查原因有：體檢，白帶多，性交后出血，異常陰道出血等。

1.2方法

1.2.1采用新柏氏液基細胞學（TCT）進行宮頸細胞學檢查。用子宮頸刷插入宮頸管內1cm，圍繞宮頸順時針方向旋轉5圈收集宮頸外口及頸管的脫落細胞，放入盛有Thinprep細胞保存液小瓶中，應用新柏氏2000全自動制片，經細胞混勻，負壓過濾膜采集，細胞轉移等程序化處理制成薄層細胞片，95%乙醇固定后巴氏染色閱片。

采用通用TBS分級系統進行細胞學診斷[3]：保存完好的上皮細胞覆蓋率大于10%為滿意涂片。診斷包括：正常或良性反應改變（WNL）；非典型鱗狀上皮細胞（ASC），包括未明確診斷意義的非典型鱗狀上皮細胞（ASC-US）及不排除高度鱗狀上皮內病變（HSIL）的非典型鱗狀上皮細胞（ASC-H）；低度鱗狀上皮內病變（LSIL）；高度鱗狀上皮內病變（HSIL）；鱗狀細胞癌（SCC）；非典型腺細胞（AGC）；腺癌（AC）。TBS報告正常或良性反應改變為細胞學陰性，ASC-US及以上病變為細胞學陽性。

1.2.2 HPV-DNA檢測 細胞學檢查陽性病例均用特制無菌毛刷取宮頸分泌物，置毛刷于保存液中，送檢。采用多重核酸擴增（PCR）熒光檢測法，根據13種高危HPV的L1基因靶序列設計的一組高度特異的引物和探針，能在同一PCR反應中檢測13種高危型HPV（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、56、58、59、68）的脫氧核糖核酸（DNA）。PCR-熒光法系在PCR過程中使用熒光PCR檢測儀同時記錄熒光標記探針在分子雜交時每次PCR循環釋放出的熒光能量變化，直接反映PCR擴增產物量的變化。記錄在某一循環中的熒光信號的強度達到設定的閾值的循環數（Ct）。診斷陽性指標：Ct值小于37，HPV-DNA數值：大于5.00e + 002（拷貝/ml） 。

1.2.3 陰道鏡活檢 對TCT陽性病例98例，行陰道鏡下可疑部位多點取材，未見異常者在轉化區（3、6、9、12）四點取材。采用徐州雷奧醫療設備公司的LEO-2100型陰道鏡，主要對宮頸病灶的表面構型、邊界形態、顏色血管和碘反應的異常征象進行定位活檢。病理結果分為：①慢性炎癥；②宮頸上皮內瘤變（CIN），分為CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ或原位癌；③鱗狀細胞癌（SCC）；④腺癌（AC）。

1.3統計學處理方法 以病理結果為金標準，用X？檢驗進行顯著性分析。

2 結果

2.1 TCT不同結果與HPV感染率的比較 見表1。可以看出隨著細胞學診斷級別的升高，HPV感染率顯著升高，經檢驗差異有統計學意義（P<0.05）。

2.2 TCT檢查與病理結果的比較 見表2。可看出隨細胞學診斷級別的升高，高級別宮頸病變的檢出率隨之升高。

2.3 病理學、細胞學、HPV檢測的比較 見表3。宮頸細胞學檢查異常，HPV檢測陽性患者中，宮頸活檢確診為CINⅡ及以上病變者與宮頸細胞學檢查異常而HPV檢測陰性的患者中活檢確診為CINⅡ及以上病變者，兩者比較差異有顯著性（P<0.05）。

3討論

3.1 TCT用于宮頸癌前病變的診斷價值 宮頸脫落細胞學檢查的開展顯著降低了宮頸癌的防病率，然而傳統的巴氏涂片存在高達10%～20%的假陰性率[4]。為進一步提高檢查的敏感性、特異性，目前采用液基細胞學（TCT）檢測方法，標本取出后立即放入細胞保存液中，這樣幾乎保留了取材器上所得到的全部標本，也避免了常規涂片過程中所引起的細胞過度干燥造成的假象。保存液中的細胞經處理，黏液、血液、炎細胞與上皮細胞分離，將有價值的細胞黏附在薄片上制成均勻的薄層涂片，提高了薄片清晰度和檢出率。TCT與傳統巴氏涂片方法相比，能顯著地提高對低度及其以上病變的檢出率，可以提高與病理學診斷結果的一致性（見表2）。2001年再次修訂的Bethesda系統，將鱗狀上皮細胞異常分類細化。TBS以明確、恰當的方式表達細胞學判讀的結果，便于與臨床醫師的交流溝通。

3.2 高危型HPV-DNA檢測 流行病學及生物學資料已證實HPV感染是宮頸癌及其癌前病變的主要病因。大部分HPV感染無臨床癥狀或為亞臨床感染，但HPV感染使宮頸癌的相對危險性增加250倍。特別是近年來HPV感染增加且趨于年輕化，高危型HPV感染持續存在最終導致宮頸癌變，故許多學者提出將高危型HPV感染檢測來補充細胞學普查，預警宮頸細胞癌變傾向，及時發現和預防、治療早期宮頸癌極為關鍵。本組資料中TCT結果為ASC、LSIL、HSIL的病例中高危型HPV感染率分別為30.61%、67.86%、75.00%。高危型HPV感染率在侵潤癌為100%， 在CINⅢ或原位癌為81.22%，在CINⅡ為73.33% ，在CINⅠ為50.00%，由此得知隨著細胞學及病理診斷級別的升高，高危型HPV感染率明顯上升，提示高危型HPV感染與宮頸病變程度有密切關系，因此高危型HPV陽性者是宮頸癌篩查的高危人群，應加強隨訪。

3.3 TCT與高危HPV-DNA檢測聯合陰道鏡檢查可早期、準確診斷宮頸病變 陰道鏡是國內外學者公認的輔助診斷CIN的重要方法，臨床上通常將陰道鏡活檢作為診斷宮頸病變的金標準[5]。CIN在陰道鏡下所表現的圖像主要表現為血管異常（包括點狀血管、鑲嵌和異型血管），醋酸白色上皮、白斑、腺開口白環和白色腺體。醋酸白色上皮最敏感但特異性低，鑲嵌和點狀血管敏感性低但特異性高。有學者報道[6]，醋酸白色上皮如與點狀血管和（或）鑲嵌同時存在，特異性大幅提高，更有診斷意義；對宮頸細胞學檢查異常或持續高危HPV病毒檢測陽性患者需聯合對陰道鏡下活檢及時發現宮頸病變，因宮頸病變具有多灶性，通過陰道鏡下仔細觀察評估可提高點活檢的準確性。陰道鏡檢查有賴于檢查者的經驗，有很大主觀性，且有一定局限性，對宮頸管內病變不能準確評估，微小病灶易漏診，如果聯合宮頸細胞學檢查及高危HPV檢測，將大大提高診斷的準確率。

TCT或HPV檢測，均是臨床常用的宮頸病變的篩查方法，兩者各有其優點和局限性，如兩者相結合結合，可最大限度彌補其不足。若配合陰道鏡下定位活檢，可大大提高宮頸癌前期病變的檢出率，提高宮頸病變診斷的準確性，降低漏診率和過度診斷率。

參考文獻：

[1]廖丹梅，黃明春，李惠珍，等.TCT聯合HPV-DNA檢測在宮頸病變中的診斷價值[J].廣西醫科大學學報，2008，25（1）：59.

[2]朗景和.子宮頸上皮內瘤變的診斷與處理[J].中國實用婦科與產科雜志，2003，19（3）：139.

[3]劉樹范.淺析巴氏五級分類與TBS描述性診斷報告方式[J].中國實用婦科與產科雜志，2003，19（3）：135-136.

[4]李榮.TCT檢測在宮頸癌篩查的臨床應用[J].江蘇醫藥，2007，33（5）：516.

[5]宋學紅，王秋曦，宋玉芬.影視陰道鏡在子宮頸病變診斷中的應用[J].中華婦產科雜志，2003，36（5）：278-281.

[6]羅春芳，王暉，劉銘球.宮頸上皮內瘤變的陰道鏡圖像特征與意義[J].實用婦產科雜志，2008，24（6）：356.編輯/王海靜