大連地區1158對反復流產夫婦的細胞遺傳學分析

摘要：目的 通過對有反復流產史的夫婦進行細胞遺傳學檢查，分析染色體異常與反復流產的關系。方法 采用外周血淋巴細胞培養和染色體G顯帶進行染色體核型分析。結果 1158對（2316例）患者中共檢出異常染色體核型213例，異常率為9.20%。其中相互易位28例，羅伯遜易位10例，倒位5例，重復3例，數目異常2例，多態性變異165例。結論 反復流產的重要原因之一就是染色體的變異。對有反復流產史的夫婦進行外周血染色體核型分析，有助于診斷和分析其病因，避免盲目治療，為其生育提供指導。

關鍵詞：反復流產；染色體異常；核型分析

一對夫婦發生兩次或兩次以上的自發性流產稱之為反復流產，是婦科常見疾病，病因復雜。導致反復流產的原因很多，其中染色體異常為重要因素之一。本院遺傳室對1158對反復流產患者進行了染色體核型分析。

1 資料與方法

1.1一般資料 選自2010年1月～2014年7月在大連市婦產醫院生殖門診就診的病例，共1158對夫婦，均有兩次或兩次以上不明原因的自然流產史。流產次數為2～5次，平均為2.18次，患者年齡為22～45歲，平均31.6歲。

1.2方法 采用RPMI 1640培養基對外周血進行培養72 h，之后加入秋水仙素繼續培養4h；終止培養，按常規收獲，G顯帶。一般每個患者計數15～20個中期分裂相，挑選3～5個顯帶較好的核型進行分析，如為嵌合體時，計數50～100個分裂相，分析5～10個核型。按ISCN-1995作出診斷結果。計數資料采用了χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

1158對反復流產的夫婦中，共檢出異常染色體核型213例，異常率為9.20%。其中相互易位28例，占異?？倲档?3.15%；羅伯遜易位10例，占異常總數的4.70%；倒位5例，占異?？倲档?.35%；重復3例，占異?？倲档?.41%；數目異常2例，占異?？倲档?.94%；多態性變異165例，占異?？倲档?7.46%，分析結果見表1。各種異常（多態）的具體核型，見表2。

1158對夫婦中，有2次自然流產史的983對，異常發生率8.95%；有3次的145對，異常發生率9.31%；有4次的23對，異常發生率17.39%；有4次以上的7對，異常發生率14.29%，分析結果見表3。各流產次數組的染色體異常發生率間并無顯著性統計學差異。（各組之間行χ2檢驗，P值均≥0.05）

3 討論

3.1反復流產患者中染色體異常幾率 反復流產夫婦染色體異常頻率，各家報道不一，高者可達12.5%，低者僅0.8%，可能與各自選擇的對象、染色體異常識別的水平以及染色體檢查指征的設置有關[1]。本文1158對患者中共檢出異常染色體核型213例，異常率為9.20%，高于Fryns綜述中5%～7%[2]的平均值。

3.2染色體異常種類及其與反復流產的關系

3.2.1相互易位 相互易位是反復流產中最主要的染色體異常類型。相互易位的群體頻率約0.195%[3]，本文檢出率為1.21%，與許多文獻報道相近。在形成生殖配子的減數分裂過程中，易位染色體將通過同源染色體間的配對形成特有的四射狀體，共可產生18種配子，它們與正常的配子受精后可形成18種合子，其中僅有一種合子是正常的，一種合子是相互易位攜帶者，其余16種合子將形成單體或部分單體，表現為畸胎、死胎、流產等不良妊娠結局[4]。

3.2.2羅伯遜易位 羅伯遜易位是平衡易位的一種特殊形式，本文檢出10例，檢出率為0.43%，占異?？倲档?.7%。羅式易位攜帶者與正常人結婚，生殖細胞減數分裂時可形成6種不同的配子，一種正常染色體，一種為羅式易位染色體，而其余4種均為異常染色體，表現為流產、死胎及畸形，均無法成活。

3.2.3倒位與重復 倒位是另一種引起流產的重要原因，本文檢出30例，涉及3、10、12和13號染色體。倒位分為臂間和臂內倒位兩種，臨床上以臂間倒位多見，本文共檢出臂內倒位3例，余下25例均為臂間倒位。倒位發生后，染色體的結構發生了重排，在減數分裂前期I中，正常染色體與倒位染色體之間會形成倒位環，這樣才能完成同源染色體各同源片段之間的相互配對。在倒位環內，可形成4種理論上不同的配子：一為倒位染色體，一為正常染色體，另兩種為重組染色體，其帶有部分片段的重復及部分片段的缺失，這兩種重組染色體各有一個著絲粒，屬于異常的穩定性畸變，可傳遞給后代。一般來說，發生倒位的片段越短小，那么其剩下的重復和缺失的部分就越長，它形成得配子和合子能正常發育的可能性就越小，婚后引起不育、早期流產和死產的比例就越高，分娩出子女的可能性就相對低。本文發現3例重復核型，均為9號染色體長臂的部分片段重復。

3.2.4數目異常 本文檢出1例47，XYY，有研究顯示，47，XYY核型變異率為1‰，額外的Y染色體肯定來自父方精子形成過程中第二次減數分裂時發生Y染色體的不分離。47，XYY男性一般是能生育后代的，但能導致胚胎畸形而引起流產。

本文有1例患者核型為47，XX，+mar，多了一條額外小標記染色體，在一定程度上會導致胚胎停育或流產。

3.3染色體多態性變異與反復流產的關系

3.3.1大Y 大Y指Y≥18號染色體。本文檢出大Y核型26例。Y染色體長度的變異是其長臂（Yq）遠段的結構異染色質部分長度差異造成，該區主要成分是Y染色體特有的串聯重復序列DNA，此DNA序列的重復復制、缺失、易位或螺旋化程度的改變均可引起長度的變異。有研究表明，有反復流產史的女性，其配偶大Y發生率明顯高于正常人群[5]。有文章指出，大Y中的DNA重復序列可能會使合子在早期細胞分裂時得有絲分裂發生錯誤，或者影響與相關基因的調節及細胞的分化。

3.3.2小Y 小Y指Y≤21號染色體。本文檢出小Y核型40例。有學者推測小Y染色體多態性變異的機制有以下3種可能：①由于Y染色體過分緊密排列可影響基因轉錄，從而導致基因功能不能正常發揮；②異染色質的部分或完全丟失，而引起常染色質排列松散，導致基因功能喪失；③由于Y染色體發生了部分丟失，造成基因功能不能發揮。

3.3.3 9號染色體臂間倒位 有報道稱9號臂間倒位在人群中的發生率高達1%[4]，屬于染色體多態性變異，本文檢出25例9號染色體臂間倒位核型。inv（9）的作用一直就有爭議，有學者認為它沒有遺傳物質的丟失，不影響患者的表型，與不育、流產、死胎無關。但多數學者認為其并非是一種正常的多態現象，與臨床癥狀有一定相關性，并產生一定的遺傳效應[6]。

3.3.4次縊痕增大 次縊痕主要存在于第1、9和16號染色體。次縊痕的增長是高度重復的DNA序列增加所致，本文檢出24例次縊痕增大的患者，由于高度重復的DNA序列增加，影響了細胞分裂，造成同源染色體配對的困難，可能會產生不平衡的配子，形成非整倍體的子代而發生流產或不平衡的配子不能受精而死亡造成不孕不育。

3.3.5隨體增大 D、G組染色體短臂多態同樣可引起一定比率的自然流產和胚胎死亡。本文檢出隨體增大的核型50例，其機制可能就是細胞分裂的同源染色體配對時，染色體多態部分造成同源染色體配對困難，從而影響細胞分裂而導致胚胎發育障礙，導致流產、胚胎死亡或子女染色體異常。

3.4反復流產次數與染色體異常檢出率的關系 有學者提出，多次的連續性流產可能是由于母體本身的持久因素（如免疫因素、解剖因素等），并不是由于染色體重排的緣故。由此可見，流產次數與發現異常核型的幾率之間似無關聯。

綜上所述，染色體異常是引起反復流產的重要原因之一，對不明原因的流產夫婦進行染色體檢查，不僅是病因診斷的需要，而且對檢出的攜帶者指導生育，進行產前診斷，以避免染色體異?；純撼錾瑥亩_到優生的目的。

參考文獻：

[1]孔愛榮，王風菊，張洞云，等.聊城地區593例不孕患者的染色體分析[J].中國優生與遺傳雜志，1997，5：5960.

[2]Fryns JP，Buggenhout GV.Structural chromosome rearrangements in couples with recurrent fetal wastage[J].European Journal of ObstetricsGynecology and Reproductive Biology，1998，81：171-176.

[3]王樹玉，趙強.反復流產夫婦的染色體分析[J].中華婦產科雜志，1998，33（9）：561.

[4]傅松濱.醫學遺傳學[M].第1版.北京：人民衛生出版社，2001：89-92.

[5]Genest P.Chromosome variants and abnormalities detected in 54 marfied couples with repeated spontaneous abortion[J].Clin Genet，2002，16：387.

[6]肖曉素，王勇強，楊媛慧，等.遺傳咨詢者染色體多態性與臨床效應的研究[J].中國優生與遺傳雜志，2004，12（4）：65.編輯/成森