高危型人乳頭瘤病毒E6、E7 mRNA 檢測篩檢宮頸病變研究進展

摘要：目前國內外研究認為高危型HPVE6/E7蛋白與宮頸病變的發生密切相關，本文從高危型HPVE6、E7蛋白致宮頸癌機制及臨床應用兩方面入手，綜述高危型HPVE6、E7蛋白與宮頸病變相關的一系列研究進展。發病率位居女性惡性腫瘤的第2位[1]，至今大量研究表明高危型HPV持續感染是導致宮頸癌的主要原因[2]。其中E6和E7早期基因是高危型HPV的主要致癌基因[3]，現對高危型HPVE6、E7蛋白進行闡述，分析其作用及臨床應用價值。

關鍵詞：高危型HPVE6/E7蛋白；宮頸病變

1 宮頸病變篩查方法

1.1高危型HPV DNA檢測 宮頸液基薄層細胞學檢查（TCT）聯合HPV DNA檢測顯著降低了宮頸癌的發生率，但HPV-DNA只是病因檢測，而對病毒的活動程度及病變程度無法判斷，從而使其不能預測宮頸病變的進展及進行風險評估[4]。

1.2高危型HPV E6、E7 mRNA檢測 HPV-E6/E7 mRNA含量能較好地反映HPV致癌基因E6/E7的活動度，可以更為直觀地評估宮頸癌的發病風險和預后[5]。

2 高危型HPV E6/E7蛋白

2.1高危型HPVE6蛋白致宮頸癌的分子機制 E6的原癌蛋白與p53相互作用，破壞p53介導的細胞對DNA損傷的免疫應答，導致細胞周期紊亂，細胞過度增殖，致使基因突變增加和細胞染色體不穩定及外源DNA整合到宿主染色體中的幾率升高，最終引起癌變[6]。

2.2高危型HPVE7蛋白致宮頸癌的分子機制 E7的原癌蛋白與視網膜母細胞瘤蛋白（pRb）結合，誘導后者的降解，導致上皮細胞永生化，使細胞過度增殖、細胞周期調控失控，導致細胞的永生化，促進宮頸癌的發生[7]。

3 高危型HPV E6、E7 mRNA 檢測的臨床應用

3.1高危型HPVE6、E7 mRNA檢測的意義 最近研究發現HPVE6E7 基因從慢性宮頸炎、CINⅠ～Ⅱ、CINⅢ到浸潤性宮頸鱗癌階段，E7的檢出率不斷增加[8]，李世蓉等[9]通過反轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）方法對各組標本進行TNF-α、HPV16 E2、HPV16 E6 及HPV16 E7mRNA 表達水平進行半定量檢測，結果表明E6及E7在HPV（-）、HPV（+）、CINⅠ～Ⅱ、CINⅢ及CIS/SCC 組的表達均呈逐漸上升趨勢，并且E7的逐級升高趨勢更顯著。岳良等[10]采用免疫組化EnVision法研究發現HPV-16E6/E7 在對照組、CINⅠ～Ⅱ、CINⅢ及鱗癌組的陽性表達率逐漸升高，并且CIN Ⅲ及鱗癌組明顯高于正常組以及CINⅠ～Ⅱ組。張生枝等[11]采用TCT剩余標本進行HPV E6/E7mRNA檢測HPV E6/E7mRNA 檢測診斷CIN（2+）的特異度高于HPVDNA，該研究還發現隨著宮頸病變級別的升高，HPV E6/E7mRNA陽性率也隨之升高，這些研究表明E6/E7 導致的細胞凋亡抑制與CIN疾病進展具有明顯相關性，并且高危型HPV E6/E7 可能是宮頸惡變的關鍵因素，高危型HPV E6/E7蛋白檢測，對于HPV 持續感染者有較顯著意義，應作為今后研究的重點對象，成為臨床中宮頸癌的早期診斷和預防提供一種新的預警手段。

3.2HPVE6、E7mRNA檢測與HPVDNA分型檢測 近幾年，以DNA為基礎的HPV 檢測廣泛應用在宮頸病變篩查中，但是HPV DNA 檢測陽性者大多是暫時性感染或一過性感染，這些陽性人數對于預測病變的風險無實際意義。隨著對E6、E7癌蛋白在宮頸癌致癌機制中的作用逐漸明了，許多研究者提出對E6、E7癌蛋白表達過程中反映其轉錄活性的E6/E7mRNA進行檢測可能更能預測病情的進展[12、13]。高危型HPVE6/E7mRNA 檢測與HPV DNA分型檢測對高級別宮頸病變的診斷的特異度相對較高，能夠把更多無進展性的病變重新歸入常規的篩查程序中，有效減少對疾病程度的誤判，避免過度檢查、治療給患者帶來的痛苦和精神負擔。

4 問題與展望

高危型HPV持續性感染是宮頸癌發生的主要誘因，隨著對HPV研究的不斷進展，使宮頸癌有望成為一種可以預防并治愈的癌癥，隨著高危型HPV技術的不斷更新，HPVE6、E7mRNA作為新的病毒分子標記將具有更廣闊的應用前景，其對病毒癌基因活性的直觀反應，大大提高了HPV 檢測的敏感性、特異性、有效性及其臨床指導意義。開發針對E6和E7 基因的藥物，從而抑制E6和E7基因表達，以達到治療癌癥的目的。

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[11]張生枝，邵華江，馬建婷.人乳頭瘤病毒E6/E7mRNA檢測在宮頸病變篩查中的應用價值[J].中國實驗診斷學，2014，18（4）：582-585.

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