原發(fā)性肝癌患者乙型肝炎病毒標(biāo)志物模式與病毒DNA載量分析

摘要：目的 探討原發(fā)性肝癌（PHC）的發(fā)生與乙肝標(biāo)志物（HBV-M）及乙肝病毒DNA（HBV DNA）載量的關(guān)系。方法 采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析和熒光定PCR方法，對(duì)63例原發(fā)性肝癌患者進(jìn)行HBV-M和HBV DNA檢測(cè)。結(jié)果 PHC患者中，HBsAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）組（小三陽(yáng)）40例，所占比例最多（63.39%），小三陽(yáng)患者血清HBV DNA檢出率為57.5%（23/40），HBVDNA平均拷貝數(shù)為104.87±1.67copy/mL；其次為HBsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+）組（大三陽(yáng)）10例（15.8%），患者血清HBV DNA檢出率為100%（10/10），HBVDNA平均拷貝數(shù)為107.27±1.67copy/mL；再次為HBsAg（+）、HBcAb（+）模式組5例（7.94%），患者血清HBV DNA檢出率為40.0%（2/5），HBVDNA平均拷貝數(shù)為105.05±1.42copy/mL。HBV DNA檢出率小三陽(yáng)組低于大三陽(yáng)組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 PHC患者HBV感染陽(yáng)性率高，HBV與PHC有十分密切的關(guān)系。

關(guān)鍵詞：肝腫瘤；肝炎病毒乙型；乙肝病毒DNA；化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析；熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)

原發(fā)性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是常見惡性腫瘤之一，乙型肝炎病毒（HBV）的感染與PHC發(fā)生有十分密切的關(guān)系[1]。為了進(jìn)一步了解PHC與乙肝病毒標(biāo)志物（HBV-M）感染模式和HBVDNA載量的關(guān)系，本研究總結(jié)了63例PHC患者的臨床和實(shí)驗(yàn)室資料，結(jié)果報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 2012年7月～2014年8月于本院就診并同時(shí)接受乙肝兩對(duì)半定量及HBVDNA檢測(cè)的肝癌患者63例，其中有肝炎病史者38例（60.3%），肝硬化25例（39.6%）。

1.2試劑和方法 ①乙肝兩對(duì)半定量檢測(cè)：抽取研究對(duì)象靜脈血，應(yīng)用雅培i2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析系統(tǒng)及配套試劑，定量檢測(cè)HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HB-cAb。②HBVDNA檢測(cè)：使用羅氏LightCycler定量擴(kuò)增儀，采用熒光定量PCR檢測(cè)，試劑由深圳匹基公司提供，結(jié)果判斷以病毒拷貝數(shù)小于500copy/mL為陰性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析；HBV DNA以copy/mL為單位，并對(duì)拷貝數(shù)進(jìn)行常用對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后以指數(shù)表示；采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行組間構(gòu)成比差異顯著性檢驗(yàn)，采用兩樣本均數(shù)的t檢驗(yàn)比較拷貝數(shù)。

2結(jié)果

見表1。

3討論

肝癌的發(fā)生、發(fā)展與HBV感染高度相關(guān)，其整合形式HBV DNA的發(fā)現(xiàn)更進(jìn)一步從分子水平上強(qiáng)化了PHC與HBV的關(guān)系[2]。本研究中PHC患者HBV感染以\"小三陽(yáng)\"為主（63.49%），與阮秀花等[3]報(bào)道一致。本研究中PHC患者血清HBV DNA陽(yáng)性率達(dá)60.3%。HBV感染，特別是慢性持續(xù)性感染，增加了HBV DNA整合入肝細(xì)胞的可能；HBV持續(xù)復(fù)制可激活某些原癌基因，同時(shí)使某些抑癌基因失活或突變，促進(jìn)了癌癥的發(fā)生；HBV的X蛋白可激活相關(guān)啟動(dòng)因子，促進(jìn)已被感染的肝細(xì)胞發(fā)生癌變[4]。本研究中PHC患者HBsAg陽(yáng)性率高達(dá)92.06%（58/63），小三陽(yáng)患者HBVDNA陽(yáng)性率為57.5%（23/40），HBV DNA載量的常用對(duì)數(shù)值為（4.87±1.67），為低水平復(fù)制，說明HBeAb的存在并不表示患者體內(nèi)沒有病毒復(fù)制。國(guó)內(nèi)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，HBV基因中部分堿基的突變可導(dǎo)致血液中HBeAg呈陰性[5]，而此時(shí)HBeAg陰性并不意味著HBV的清除或復(fù)制水平的減低，相反由于有HBV變異株的存在，小三陽(yáng)患者體內(nèi)HBV DNA是否有活動(dòng)性復(fù)制及其水平如何，僅憑兩對(duì)半測(cè)定是無(wú)法準(zhǔn)確判斷的，必須進(jìn)行HBVDNA的定量檢測(cè)[6]。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者體內(nèi)HBVDNA水平的變化，對(duì)了解疾病轉(zhuǎn)歸和抗病毒治療效果有重要意義[7]。本研究中大三陽(yáng)組HBV DNA載量對(duì)數(shù)值為（7.27±1.67），高于小三陽(yáng)組，表明HBeAg與HBV DNA載量高度相關(guān)，是判斷HBV是否處于復(fù)制狀態(tài)及評(píng)價(jià)其傳染能力高低的指標(biāo)。4例HBV-M為模式Ⅵ的PHC患者全部檢出HBVDNA，可能是正在發(fā)生HBsAg向HBsAb轉(zhuǎn)化，或者是患者體內(nèi)存在一種新的HBsAg亞型及相應(yīng)的HBsAb。5例為模式Ⅴ的PHC患者也全部檢出HBVDNA，提示在病毒感染過程中，大三陽(yáng)是感染的起始模式，病毒的清除首先表現(xiàn)為e系統(tǒng)的轉(zhuǎn)換。

綜上所述，肝癌的發(fā)生與HBV感染高度相關(guān)，從HBV感染到PHC的過程中，常伴有e系統(tǒng)轉(zhuǎn)換，所以在肝癌發(fā)生后小三陽(yáng)模式最常見，臨床上應(yīng)結(jié)合HBVDNA和HBV-M定量檢測(cè)以評(píng)價(jià)患者體內(nèi)的病毒復(fù)制情況，為治療方案選擇和療效判斷提供有力證據(jù)。

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編輯/許言