舒筋活絡丸的薄層色譜鑒別研究

摘要：目的 建立舒筋活絡丸的薄層色譜鑒別方法。方法 建立了處方中川芎、當歸、獨活、桂枝共4味藥的薄層色譜鑒別法。結果 處方中川芎、當歸、獨活、桂枝4味藥的的薄層色譜結果斑點圓整、清晰，無色譜背景、無非鑒別藥味干擾。結論 方法專屬性強、重現性好，為舒筋活絡丸的質量控制建立了可靠的檢測方法，可作為舒筋活絡丸的質量控制指標。

關鍵詞：舒筋活絡丸；薄層色譜鑒別；川芎；當歸；獨活；桂枝

舒筋活絡丸為我國傳統中藥成方制劑，系由五加皮、威靈仙 、羌活、豨薟草等12味中藥制成的大蜜丸，具驅風祛濕，舒筋活絡之功效，用于一般骨節風痛，腰膝酸痛。舒筋活絡丸現行質量標準收載于中華人民共和國衛生部標準中藥成方制劑第1冊，標準編號：WS3-B-0154-89。標準中僅有五加皮、豨薟草、桂枝、地楓皮、木瓜、當歸6味藥的顯微特征。因此我們對舒筋活絡丸的薄層鑒別方法進行了實驗研究，研究建立了川芎、當歸、獨活、桂枝的薄層色譜鑒別方法。

1試驗材料

1.1試劑 硅膠G為青島海洋化工廠生產，其他所用試劑為分析純。

1.2對照品、對照藥材 桂皮醛對照品（批號110710-200212）、當歸對照藥材（批號120927-200512）、川芎對照藥材（批號120918-200507）、獨活對照藥材（批號120940-200507）均購于中國藥品生物制品檢定所。

1.3舒筋活絡丸樣品 舒筋活絡丸均為同一生產廠家的市售品，批號為110701、120312、120607；各陰性對照樣品根據處方及制法自制。

2 方法與結果

2.1當歸、川芎TLC鑒別 取本品18g，剪碎，加硅藻土7g，研勻，加乙醚50ml，超聲處理20min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液。另取當歸、川芎對照藥材各1g，分別加乙醚20ml，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VI B）試驗，吸取上述三種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正已烷–乙酸乙酯（9：1）為展開劑[1]，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。當歸與川芎陰性對照無干擾，方法具專屬性（見圖1）。

2.2獨活TLC鑒別 取本品18g，剪碎，加硅藻土7g，研勻，加石油醚（60～90℃）50ml，回流2h，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醚1ml使溶解，作為供試品溶液。另取獨活對照藥材1g，加石油醚（60～90℃）30ml，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VI B）試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）–甲苯–乙酸乙酯（2：1：1）為展開劑[2]，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱1～2min。置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。獨活陰性對照無干擾，方法具專屬性（見圖2）。

2.3桂枝TLC鑒別 取本品18g，剪碎，加硅藻土7g，研勻，加乙醇50ml，密塞，超聲處理20min，浸漬過夜，濾過，濾液作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品適量，加乙醇制成每1ml含1μl的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VI B）試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）–乙酸乙酯（17：3）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯肼乙醇試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點。桂枝陰性對照無干擾，方法具專屬性（見圖3）。

3討論

3.1分別考察了薄層板展開過程中溫度、相對濕度及硅膠G板對實驗結果的影響 結果表明： 溫度為5 ℃、25 ℃、30℃時，各指標成分斑點的Rf 值在較小范圍內波動，但對分離效果幾無影響；相對濕度為35%，65%，75%時，各指標成分斑點的Rf 值變化極小，不影響分離效果。預制硅膠G板分離效果較自制硅膠G板好，但不影響分離效果。

3.2本實驗建立了處方藥味當歸、川芎的TLC 鑒別方法 由于當歸和川芎的藥理作用和化學成分具有很大的類似性。有文獻所報道川芎和當歸的這兩味藥材最主要的揮發油成分都是藁本內酯[2]。因此采用了相同的色譜條件來共同鑒別當歸和川芎。

3.3 本實驗建立了處方藥味獨活的TLC 鑒別方法 該方法展開劑的選擇中，分別比較了3種不同的展開劑，分別為：展開劑A：正已烷–苯–乙酸乙酯（2：1：1）；展開劑B：石油醚（60～90℃）–乙酸乙酯（1：1）；展開劑C：石油醚（60～90℃）–甲苯–乙酸乙酯（2：1：1）。結果以展開劑C：石油醚（60～90℃）–甲苯–乙酸乙酯（2：1：1）展開效果最好，色譜清晰，特征斑點分離良好，斑點無拖尾現象。在顯色條件方面，分別比較了顯色條件A：置紫外光燈（365nm）下直接檢視；顯色條件B：噴以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱后，再置紫外光燈（365nm）下檢視，結果以顯色條件B：噴以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱后，再置紫外光燈（365nm）下檢視顯色效果好。并考察了加熱的時間，分別噴以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱2min、5min，結果以105℃加熱1～2min特征斑點顯色較清晰。

參考文獻：

1中國藥典[S]. 一部. 2010.

2丁明玉，馬帥武 ，劉德麟 .川芎和當歸揮發油成分的比較研究 [J ] .生命科學儀器 ， 2005， 3（3） ： 38-41.

編輯/馮焱