摘要: 隨著國(guó)民經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展,生活水平也逐漸提高,人們開(kāi)始認(rèn)識(shí)到健康的重要性,并且國(guó)家在推動(dòng)食品安全以及醫(yī)療服務(wù)水平提高,而微生物的檢驗(yàn)工作在其中扮演了重要的角色。我國(guó)大力推動(dòng)各地區(qū)的疾病預(yù)防控制中心的建設(shè),努力發(fā)展微生物檢驗(yàn)技術(shù),并且通過(guò)不斷的踐行創(chuàng)新檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,將檢驗(yàn)技術(shù)向更準(zhǔn)確、更高效的方向進(jìn)步,文章主要對(duì)微生物的檢驗(yàn)技術(shù)與未來(lái)發(fā)展的方向進(jìn)行探討。
關(guān)鍵詞:微生物;檢驗(yàn)技術(shù);未來(lái)發(fā)展
隨著國(guó)民經(jīng)濟(jì)實(shí)力的不斷增長(zhǎng),我國(guó)大力推動(dòng)醫(yī)療保障及食品安全的發(fā)展,保障我國(guó)群眾的生命及財(cái)產(chǎn)安全。并且我國(guó)的微生物檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展也相對(duì)比較完善,出現(xiàn)了許多新型檢驗(yàn)技術(shù),并且其應(yīng)用與器械的研制也在不斷更新。隨著學(xué)界不斷的實(shí)踐,能夠推動(dòng)微生物檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展,創(chuàng)新更加準(zhǔn)確、高效、可靠的檢驗(yàn)技術(shù)。
1微生物檢驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用現(xiàn)狀
微生物檢驗(yàn)技術(shù)是一門系統(tǒng)工程,需要按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)及步驟進(jìn)行,才能夠得到比較準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果,促進(jìn)檢驗(yàn)事業(yè)的發(fā)展。目前微生物檢驗(yàn)技術(shù)正從傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法向分子水平方法改進(jìn),向儀器化、自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化發(fā)展。主要方法有電阻抗法、分子生物學(xué)技術(shù)、微量生化法、快速酶觸反應(yīng)及代謝產(chǎn)物技術(shù)以及儀器檢測(cè)法等,其中電阻抗法占的比重較大。
1.1電阻抗法 電阻抗法是目前在微生物檢驗(yàn)技術(shù)中主要使用的一種新型檢測(cè)技術(shù),該檢測(cè)技術(shù)具有準(zhǔn)確度較高、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn),能夠檢驗(yàn)物體中的細(xì)菌數(shù)量、細(xì)菌類型(細(xì)菌總數(shù)、大腸桿菌真菌、呼吸感染菌、酵母菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等)。電阻抗法準(zhǔn)確度較高的主要原因是由于細(xì)菌的代謝會(huì)使得附著無(wú)產(chǎn)生電阻抗,而不同的細(xì)菌在相同環(huán)境下能夠忍受的電阻是不同的,通過(guò)對(duì)物體的阻抗情況來(lái)分析物體中細(xì)菌的種類及含量[1]。主要的操作方式為:將細(xì)菌放置器皿中,通過(guò)一定的環(huán)境改變來(lái)使細(xì)菌增長(zhǎng),并且將一些不帶電的大分子化合物(蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物等)通過(guò)細(xì)菌代謝轉(zhuǎn)化為帶電荷的小分子化合物(乙醇、葡萄糖)。通過(guò)對(duì)細(xì)菌導(dǎo)電性的轉(zhuǎn)換,然后對(duì)細(xì)菌進(jìn)行電阻變化的記錄,并與未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌電阻進(jìn)行比較,通過(guò)計(jì)算機(jī)技術(shù)制成相關(guān)的細(xì)菌電阻種類及數(shù)量分析,以此來(lái)對(duì)物體中的微生物進(jìn)行辨認(rèn)及測(cè)量。該方法目前已經(jīng)用于食品、藥品的檢測(cè)。
1.2微量生化法 微量生化法誕生于19世紀(jì)40年代末,直到現(xiàn)代仍然在使用的一種微生物檢驗(yàn)技術(shù),其優(yōu)勢(shì)在于操作方便、簡(jiǎn)單快捷、結(jié)果準(zhǔn)確。微量生化法的優(yōu)點(diǎn)在于能夠通過(guò)微生物鑒定用試劑盒作為細(xì)菌的觀察皿,觀察皿中放置數(shù)量不等的試管,當(dāng)需要檢驗(yàn)物體中的微生物含量時(shí)可以將樣品放入觀察皿中的試管中,然后將處理過(guò)的微生物液滴入試管中,觀察樣本在試管中的酶促反應(yīng),然后觀察樣本的顏色變化,并將其記錄下來(lái),通過(guò)輸入計(jì)算機(jī)內(nèi)置軟件中,通過(guò)科學(xué)的分析得到相應(yīng)的結(jié)果[2]。該方法常用于臨床藥物細(xì)菌增殖研究中。
1.3分子生物學(xué)技術(shù) 分子生物學(xué)技術(shù)是一種現(xiàn)代新型的技術(shù),是在生命科學(xué)與化學(xué)發(fā)展的基礎(chǔ)上創(chuàng)立的一門學(xué)科。分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用與微生物檢測(cè)中,主要通過(guò)分子水平上分析微生物的線性結(jié)構(gòu)來(lái)認(rèn)知樣本中的微生物類型,是一種新型檢驗(yàn)技術(shù),其主要的優(yōu)點(diǎn)在于檢驗(yàn)結(jié)果精確、對(duì)微生物的反應(yīng)比較敏感、效率與特異性都較高等方面,但是由于其技術(shù)性較高,對(duì)檢驗(yàn)器材以及相關(guān)操作人員的專業(yè)水平要求較高,檢驗(yàn)方法也比較繁瑣[3]。分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用與微生物檢驗(yàn)技術(shù)的主要技術(shù)有:核酸交互法、質(zhì)物DNA圖譜檢驗(yàn)分析法、聚合因子透析技術(shù)、染色體DNA限制性內(nèi)切酶技術(shù)等等。文章主要對(duì)核酸交互法進(jìn)行分析,簡(jiǎn)單為微生物檢驗(yàn)技術(shù)中的分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行研究。核酸交互法是利用基因探針?lè)ǖ脑響?yīng)用于微生物檢驗(yàn)中而創(chuàng)新的一種方式,基因探針?lè)ǖ膽?yīng)用機(jī)制是在物品基因中的最小介質(zhì)因子在基礎(chǔ)構(gòu)造中與堿基的化學(xué)反應(yīng),通過(guò)對(duì)已經(jīng)認(rèn)知的細(xì)菌最小介質(zhì)因子進(jìn)行相關(guān)的排列,并做好相關(guān)的記錄,當(dāng)在微生物樣本檢驗(yàn)中,對(duì)最終得出的最小介質(zhì)因子進(jìn)行堿基的區(qū)分,辨別細(xì)菌的種類及數(shù)量。對(duì)于具有最小介質(zhì)因子的細(xì)菌來(lái)講,具有最小介質(zhì)因子的細(xì)菌遺傳物為DNA,若沒(méi)有DNA的細(xì)菌,其遺傳來(lái)源于RNA。核酸交互法能夠很好的區(qū)分微生物中的細(xì)菌種類,并且使用效果比較理想,但是由于其使用設(shè)備比較復(fù)雜,在實(shí)際的微生物檢驗(yàn)中,使用的頻率較少。
1.4快速酶觸反應(yīng)及代謝產(chǎn)物的檢測(cè)技術(shù) 快速酶觸反應(yīng)及代謝產(chǎn)物檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用原理主要是由于細(xì)菌在生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程中會(huì)不斷的施放一些酶元素,通過(guò)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生酶進(jìn)行判別,將其放入器皿中觀察,通過(guò)反應(yīng)液對(duì)酶的作用,從而觀察細(xì)菌的種類與數(shù)量,這種檢驗(yàn)的方式能夠檢驗(yàn)樣本中細(xì)菌的數(shù)量以及微生物的種類。優(yōu)點(diǎn)在于其靈敏度較高,操作簡(jiǎn)單,常用于細(xì)菌計(jì)數(shù)及種類鑒定。
1.5儀器監(jiān)測(cè)法 目前的微生物檢驗(yàn)技術(shù)中應(yīng)用的儀器檢測(cè)法中,主要使用的是氣相色譜法、mini-VIDAS法、Vietk-AMS這三種技術(shù),后兩者的智能化和自動(dòng)化水平較高,但是在我國(guó)的應(yīng)用程度較少,文章主要針對(duì)氣相色譜法進(jìn)行介紹。氣相色譜法應(yīng)用于微生物檢驗(yàn)中的主要原理是通過(guò)檢驗(yàn)樣本中的微生物在氣相色譜儀中檢驗(yàn)到的色譜圖進(jìn)行微生物的判斷,同時(shí)該方法是先將樣品與微生物分離,然后再將微生物進(jìn)行相關(guān)的檢驗(yàn)。儀器檢測(cè)法能夠適用于樣本較多的物品檢驗(yàn)中,或者是容易產(chǎn)生微生物的物品檢驗(yàn)中。該檢驗(yàn)技術(shù)的方式是先將樣本中的微生物水解,然后使用甲醇分解提取,對(duì)微生物進(jìn)行硅烷化或甲基化等方面的處理,最后由微生物呈現(xiàn)的相關(guān)色譜錄入色譜儀中進(jìn)行分析[4]。此檢驗(yàn)技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于能夠檢測(cè)出微生物的特征峰,并且結(jié)果準(zhǔn)確、效率較高,優(yōu)點(diǎn)在于節(jié)省工作量,并且實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化。常用于食品、藥物的檢驗(yàn)中。
2微生物檢驗(yàn)技術(shù)未來(lái)發(fā)展的趨勢(shì)
微生物檢驗(yàn)技術(shù)產(chǎn)自與20世紀(jì)40年代,主要是由于美國(guó)發(fā)生了一系列由于藥品污染而出現(xiàn)的意外事故,因此微生物檢驗(yàn)技術(shù)對(duì)于藥品質(zhì)量、食品安全等方面都有重要意義。近些年來(lái),隨著經(jīng)濟(jì)水平以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,各種疾病傳播以及食品問(wèn)題的出現(xiàn)導(dǎo)致了社會(huì)各界對(duì)于疾病預(yù)防和食品安全的關(guān)注。微生物檢驗(yàn)技術(shù)是對(duì)疾病控制以及食品安全的有力保障,能夠促進(jìn)疾病控制以及人民的身體健康發(fā)展,保證經(jīng)濟(jì)的穩(wěn)定發(fā)展。由于疾病傳播使得人們對(duì)疾病控制的廣泛關(guān)注,推動(dòng)了的微生物檢驗(yàn)技術(shù)的不斷進(jìn)步,也推動(dòng)了疾病控制的發(fā)展。微生物產(chǎn)生的原因來(lái)源于各方面,主要由于大氣污染、水污染、環(huán)境破壞、水土流失等自然環(huán)境因素的影響,來(lái)源于人們生活中的隨地亂扔垃圾、隨地吐痰等各種不文明現(xiàn)象,這些都導(dǎo)致微生物的增長(zhǎng)。這些都要求了微生物檢驗(yàn)技術(shù)要不斷的進(jìn)行更新,將微生物控制在一個(gè)不影響人體健康的數(shù)值。微生物檢驗(yàn)工作的工作量與辨別的種類繁多,檢驗(yàn)樣本的構(gòu)成也比較復(fù)雜,對(duì)于檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性要求也較高。通過(guò)各種物品傳播的疾病微生物種類較多,能導(dǎo)致出現(xiàn)傳染性疾病的微生物就有五十多種,種類繁多的微生物也對(duì)檢驗(yàn)技術(shù)提出了新的要求[5]。
我國(guó)在微生物檢驗(yàn)技術(shù)方面雖然取得了一定的進(jìn)步,但是其中也存在許多問(wèn)題需要解決,首先是我國(guó)微生物檢驗(yàn)操作人員的專業(yè)水平較低,對(duì)微生物檢驗(yàn)的重要性不能夠很好的認(rèn)知,同時(shí)微生物檢驗(yàn)的儀器比較滯后。從我國(guó)微生物檢驗(yàn)行業(yè)的整體分析,在微生物檢驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用中,將微生物檢驗(yàn)實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、智能化是其未來(lái)發(fā)展的方向,尤其是在儀器檢測(cè)法中體現(xiàn)了這一發(fā)展特征。所以,在對(duì)我國(guó)微生物檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行相關(guān)的敘述中主要表現(xiàn)為:首先需要提高對(duì)樣本微生物含量的檢驗(yàn)效率,減少常規(guī)檢測(cè)中需要耗費(fèi)的時(shí)間,在較短的時(shí)間內(nèi)就能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)微生物數(shù)量及種類的檢測(cè);同時(shí)檢驗(yàn)技術(shù)要保障檢測(cè)的結(jié)果,提高檢驗(yàn)的精度與科學(xué)性;最后要實(shí)現(xiàn)檢驗(yàn)技術(shù)的自動(dòng)化,推動(dòng)我國(guó)微生物檢驗(yàn)技術(shù)智能化發(fā)展。
3結(jié)論
科學(xué)技術(shù)的帶動(dòng)了微生物檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展,并且呈現(xiàn)了多樣化,新型、先進(jìn)、簡(jiǎn)便的微生物檢驗(yàn)技術(shù)將代替?zhèn)鹘y(tǒng)的培養(yǎng)方法,通過(guò)對(duì)檢驗(yàn)技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善與規(guī)范,保障檢驗(yàn)的質(zhì)量;同時(shí)操作人員也要不斷的提高自身的專業(yè)水平,提高檢驗(yàn)儀器的使用率,將高效的微生物檢驗(yàn)技術(shù)投入應(yīng)用,促進(jìn)的微生物檢驗(yàn)事業(yè)的發(fā)展,實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代化、自動(dòng)化、智能化發(fā)展。
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