新型豬瘟疫苗研究進展情況

摘要：豬瘟是由豬瘟病毒（csfv）引起的一種高接觸性的傳染病，是目前危害養豬業發展的主要疫病之一。傳統疫苗已經不能完全適應新病情的需要，各國科研人員將研究熱點轉移至研發新型豬瘟疫苗上。本文就近些年開發的新型豬瘟疫苗作一綜述。

關鍵詞：豬瘟;新型;疫苗

中圖分類號： S858.28 " " " " " " " " " " " "文獻標識碼： "A " " " " " " " " " " " " "DOI編號： " 10.14025/j.cnki.jlny.2015.24.053

豬瘟是由豬瘟病毒（csfv）引起的一種高接觸性的傳染病，是目前危害養豬業發展的主要疫病之一。豬瘟免化弱毒疫苗在防治豬瘟中曾起到決定性的作用，但近幾年卻時有發生免疫失敗的現象，說明傳統疫苗已經不能完全適應新病情的需要，各國科研人員將研究熱點轉移至研發新型豬瘟疫苗上。

1 亞單位疫苗

基因工程亞單位疫苗是采用DNA重組技術，利用原核或真核細胞高效表達系統來表達豬瘟病毒表面保護性抗原，并用以制造疫苗。Erns和E2蛋白是病毒囊膜主要的保護性抗原，二者均能誘導機體產生中和抗體，保護機體免受強毒攻擊。Lin（2009）利用畢赤酵母表達系統，成功表達了CSFV的E2蛋白。用此系統表達的E2蛋白，免疫6周齡的SPF豬2次，使接種豬產生中和抗體，并能抵御強毒攻擊[1]。

另外，亞單位疫苗也用于DIVA疫苗的開發。E2亞單位疫苗接種后，用檢測Erns 蛋白的ELISA 方法，可以區分自然感染豬和免疫豬，避免一旦發生疫情后大面積撲殺帶來的巨大經濟損失。

2 DNA疫苗

DNA疫苗又稱核酸疫苗或基因疫苗，是Wolff 等在20世紀 90 年代首創的新型疫苗[2]，該疫苗是將免疫原的編碼基因克隆至表達質粒中構建而成的。研究人員又成功制備了表達E2蛋白的重組質粒pc DNA3.1/E2并用此免疫豬只，結果顯示該質粒能夠誘導接種豬產生MHCⅡ類限制性T細胞免疫應答。并且在攻毒后，檢測到接種豬產生了高水平的中和抗體[3]。

與傳統豬瘟疫苗相比，豬瘟DNA疫苗具有很多優點：易于生產、成本低，方便保存和運輸，且無需冷藏;可誘導機體長期或終身免疫;引起體液免疫同時，可以產生強有力的細胞免疫，保護力強;可與多種質粒DNA 混合，可針對不同疫病進行聯合接種。

3 復制子疫苗

由于DNA疫苗存在質粒DNA整合入宿主基因組的風險，因此研究人員對其是否能安全進入臨床應用存在較大顧慮?？蒲腥藛T曾設想用RNA代替DNA來規避這一風險，但RNA不穩定且免疫力不明顯，基于此，RNA復制子疫苗應運而生。甲病毒中的塞姆利基森林病毒、辛德比斯病毒以及委內瑞拉馬腦炎病毒等常用于制備復制子疫苗，但這種疫苗也存在較大弊端，例如需要進行體外轉錄、使用不便、成本高等。在此疫苗的基礎上，一種新型的復制子DNA 疫苗發展起來?？蒲腥藛T用SFV復制子載體，構建了DNA疫苗（p SFV1CS-E2），表達E2蛋白。免疫豬在攻毒前產生的抗體水平較低，但攻毒后可以抵抗豬瘟強毒的攻擊[4，5]。

4 合成肽疫苗

合成肽疫苗是指根據病毒基因組的核苷酸序列，推導出其蛋白質的氨基酸序列，再以人工合成方法制備主要抗原相應的寡肽，用以制備合成肽疫苗。

但就目前的研究結果顯示，豬瘟合成肽疫苗的免疫效果并不是很理想。肽疫苗的免疫原性及抗原性受疫苗自身組成，受免疫動物機體免疫系統等諸多因素的影響，因此，合成肽疫苗免疫效果的提高，需要在如何利用有限抗原表位誘導強免疫效果及在肽疫苗免疫機理上做進一步的研究。

5 重組活載體疫苗

重組活載體疫苗是指將病毒復制的非必需區克隆出來，經體外改造后將異源性病毒的保護性抗原基因及啟動子調控序列等插入其中，通過體外同源重組技術獲得的一種疫苗。目前，用于表達外源性蛋白的病毒載體包括桿狀病毒、偽狂犬病毒、逆轉錄病毒、腺病毒、痘病毒等。

劉建玲等利用逆轉錄病毒載體pBABE-puro，構建了pBABE-puro-E2，利用PK-15細胞表達出病毒E2蛋白后，免疫小鼠，使免疫鼠產生抗E2蛋白的抗體[6]。

6 結語

國內及國際市場對豬肉需求量持續增加，針對豬瘟等嚴重危害養豬業發展的重大疫病的防控工作也越顯緊迫。隨著傳統免疫方式下，免疫效果不佳及毒力反強等問題的不斷出現，傳統的豬瘟兔化弱毒苗已不能很好的防控疫情，因此越來越多的科研人員開始致力于研制新型豬瘟疫苗。相信在不久的將來，會研發出更加安全高效廉價的新型豬瘟疫苗，并能為疫情防控貢獻巨大力量。

參考文獻

[1]胡鴻惠，等.豬瘟疫苗研究進展[J].中國畜牧獸醫，2012，39（04）：196-199.

[2] Wolff JA， Malone RW， Williams P， et al. Direct gene transfer into muscle in vivo[J].Science，1990， 247：1465-1468.

[3] Ganges L， Barrera M， Nú ez JI， et al. A DNA vaccine expressing the E2 protein of classical swine fever virus elicits T cell responses that can prime for rapid antibody production and confer total protection upon viral challenge. Vaccine， 2005， 23（28）： 3741-3752.

[4] Li N， Qiu HJ， Zhao JJ， et al. A Semliki Forest virus replicon vectored DNA vaccine expressing the E2 glycoprotein of classical swine fever virus protects pigs from lethal challenge. Vaccine， 2007， 25（15）： 2907-2912.

[5] Li N， Zhao JJ， Zhao HP， et al. Protection of pigs from lethal challenge by a DNA vaccine based on an alphavirus replicon expressing the E2 glycoprotein of classical swine fever virus. J Virol Methods， 2007， 144（1/2）： 73-78.

[6] 劉建玲，張彥明，蘇正元，等.逆轉錄病毒載體介導的豬瘟病毒E2基因的真核表達[J].中國病毒學：英文版，2006（03）：249-252.

作者簡介：楊賀，碩士，長春醫學高等?？茖W校，講師，研究方向：生物工程。