L-FABP和NAG在重癥急性胰腺炎合并急性腎損傷中的早期診斷價值

柯貴寶，劉 哲，徐云瀅，向 謙，蒲 紅，鄧茂林

(成都大學附屬醫(yī)院內(nèi)科，四川 成都 610081)

L-FABP和NAG在重癥急性胰腺炎合并急性腎損傷中的早期診斷價值

柯貴寶，劉 哲，徐云瀅，向 謙，蒲 紅，鄧茂林

(成都大學附屬醫(yī)院內(nèi)科，四川 成都 610081)

目的：探討肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)和N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶(NAG)在急性重癥胰腺炎(SAP)合并急性腎損傷(AKI)患者中的早期診斷價值。方法：收集15例健康體檢者作為正常對照，將161例急性胰腺炎(AP)患者分為輕度(MAP)、中度(MSAP)、重度(SAP)3組，其中SAP 組又分為AKI和非AKI亞組。分別采用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)和終點法測定正常對照組及AP患者發(fā)病后4～24 h的尿液L-FABP、NAG水平。結(jié)果：SAP組中AKI亞組的L-FABP和NAG水平明顯高于非AKI亞組(P<0.01)。結(jié)論：尿L-FABP和NAG可以作為檢測SAP合并 AKI的早期生物標記物。

重癥急性胰腺炎；急性腎損傷；肝型脂肪酸結(jié)合蛋白；N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶

急性腎損傷(acute kidney injury，AKI)是重癥急性胰腺炎 (severe acute pancreastitis，SAP)常見的并發(fā)癥之一，其發(fā)生率僅次于肺功能障礙，一旦發(fā)生急性腎衰竭(acute renal failure，ARF)，會導致其他臟器衰竭的發(fā)生率明顯升高，患者的病死率高達71%～84%。傳統(tǒng)的診斷指標如血清尿素和肌酐不能早期反映腎小球濾過率的下降，且受影響的因素較多。近年來發(fā)現(xiàn)的一些新型的生物學標志物如：肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(Liver-type fatty acid binding protein，L-FABP)和N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase，NAG)等能在早期反映腎功能的變化。本實驗主要探討L-FABP和NAG在SAP并發(fā)AKI的早期診斷價值。

1 資料和方法

1.1 一般資料 前瞻性收集2012年5月至2014年2月期間我院健康體檢者及住院患者的尿液共176例。正常對照組15例為我院門診健康體檢者。161例急性胰腺炎(acute pancreastitis，AP)患者均為我院住院患者，其中：男113例，女48例；年齡24～68歲，平均50.2歲。將急性胰腺炎患者分為4組：輕度急性胰腺炎(mild acute pancreatitis，MAP)組(MAP組)、中度急性胰腺炎(moderately severe acutepancreatltls，MSAP)組(MSAP組)、重度急性胰腺炎非AKI亞組(NO-AKI組)和重度急性胰腺炎AKI亞組(AKI組)。所有入選患者均簽署知情同意書。AP診斷符合中華醫(yī)學會消化病學分會胰腺疾病學組的診斷標準[1]。根據(jù)AKI診斷標準[2]，設(shè)計AP合并AKI診斷標準：尿量減少[尿量<0.5 mL/(kg·h)]超過6 h；或血清SCr水平較前升高>50%；或SCr升高絕對值>25 μmol/L。排除標準：住院治療時間超過發(fā)病時間24 h，既往有慢性腎臟疾病，本次發(fā)病前有AIDS、腫瘤、嚴重感染、嚴重創(chuàng)傷及手術(shù)后的患者均不納入本研究。

1.2 標本采集和主要試劑 收集健康體檢者和入選患者發(fā)病后4～24 h內(nèi)的清潔中段尿液20 mL，離心后取上清液置-80℃冰箱保存待測。記錄入院患者的24 h尿量，每12～24 h監(jiān)測一次SCr變化。尿L-FABP采用ELISA法檢測，試劑盒購自美國RD公司。尿NAG采用終點法檢測，試劑盒購自浙江夸克生物科技有限公司。

1.3 尿L-FABP和NAG檢測 尿L-FABP用ELISA試劑盒進行檢測，操作嚴格按說明書進行，結(jié)果除以尿肌酐值進行校正。尿NAG檢測采用Olympus AU5400自動生化分析儀。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析，多樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析。

2 結(jié) 果

2.1 AKI發(fā)生情況 本實驗中，MAP、MSAP、SAP患者分別為94例、38例、29例。29例SAP患者有17例發(fā)生AKI，約占SAP患者的58.62%，其中4例AKI患者依據(jù)尿量減少標準診斷，另13例患者依據(jù)SCr變化診斷AKI，其SCr升高達到AKI診斷標準的時間約在發(fā)病后60～72 h。MAP和MSAP患者無AKI發(fā)生者。

2.2 尿L-FABP和尿NAG表達 結(jié)果詳見表1。

表1 各組尿L-FABP、尿NAG水平比較

注：1)與AKI組比較P<0.01

AKI組L-FABP水平明顯高于NO-AKI組、MSAP組、MAP 組、正常對照組(P<0.01)；NO-AKI組、MSAP組、MAP組及正常對照組之間兩兩比較無顯著性差異(P>0.05)。AKI組NAG水平明顯高于NO-AKI組、MSAP組、MAP組、正常對照組(P<0.01)；NO-AKI組、MSAP組、MAP組及正常對照組之間兩兩比較均無顯著性差異(P>0.05)。

3 討 論

AP是指多種病因?qū)е碌囊让冈谝认賰?nèi)被激活后引起胰腺組織自身消化、水腫、出血、壞死的炎癥反應(yīng)，若發(fā)展為SAP，常累及腎臟，發(fā)生AKI甚至多臟器功能衰竭，病死率極高。故早期發(fā)現(xiàn)并防治AKI的進展，對SAP患者的預(yù)后具有重要意義。SAP伴AKI主要表現(xiàn)包括無尿、少尿和血清肌酐升高，目前主要依據(jù)SCr來診斷AKI，但SCr反應(yīng)較慢，常在腎臟受損后約72 h才能診斷出AKI[3]。本研究中，通過SCr依據(jù)診斷為SAP伴AKI的患者，均在AP發(fā)病2 d后。故如果依據(jù)SCr標準來診斷SAP伴AKI，將不利于患者腎功能的恢復(fù)。

近年來，已有大量報道提示[4-5]，尿L-FABP、尿NAG可作為AKI的早期生物標志物。研究提示，腎臟受損傷因素影響后4～24 h，L-FABP和NAG水平明顯增高[6-7]；故本研究收集AP發(fā)病后4～24 h的尿液來檢測L-FABP和NAG，明確L-FABP和NAG能否作為SAP合并AKI檢測的早期生物標志物。

脂肪酸結(jié)合蛋白(fatty acid binding protein ，F(xiàn)ABP)是在人體脂肪酸代謝活躍的組織中大量表達的細胞質(zhì)蛋白，相對分子質(zhì)量為14 000。腎臟中有2種類型，心臟型(H-FABP，表達于遠端腎小管)和肝臟型(L-FABP，表達于近端腎小管)，在近端腎小管游離脂肪酸與上皮細胞胞漿FABP結(jié)合，進而轉(zhuǎn)運到線粒體或過氧化物酶體進行β-氧化代謝。L-FABP與Cys C一樣，相對分子質(zhì)量很小，所以能被腎小球濾過，又像其他小分子蛋白那樣在近端小管被重吸收。本研究結(jié)果提示L-FABP在NO-AKI組、MSAP組、MAP組及正常對照組之間兩兩比較均無顯著性差異(P>0.05)，而在AKI組則明顯高于NO-AKI組(P<0.01)，提示尿L-FABP可以作為檢測SAP合并AKI早期的生物標志物。

NAG是近端腎小管溶酶體酶，是腎小管損害敏感和持久的指標，在糖尿病腎病、慢性腎小球疾病、腎毒性物質(zhì)損傷、移植腎功能延遲恢復(fù)等都可觀察到尿NAG增高。尿NAG增高也是危重患者AKI的敏感指標，可早于血清肌酐升高12～96 h。AKI的患者尿NAG越高，預(yù)后越差[8]。本研究結(jié)果提示NAG在NO-AKI組、MSAP組、MAP組及正常對照組之間兩兩比較均無顯著性差異(P>0.05)，而在AKI組則明顯高于NO-AKI組 (P<0.01)，提示尿NAG可以作為檢測SAP 合并AKI早期的生物標志物。

總之，對于既往無慢性腎臟疾病、無惡液質(zhì)、發(fā)病前無嚴重感染的患者，尿L-FABP和尿NAG對SAP合并AKI的早期診斷具有重要意義。

[1]中華醫(yī)學會消化病學分會胰腺疾病學組.中國急性胰腺炎診治指南(2013)[J].中華消化雜志，2013，33(4)：217-222.

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[3]BAGSHAW S M,BELLOMO R,DEVARAJAN P,et al.Review article: Acute kidney injury in critical illness[J].Can J Anaesth,2010,57(11):985-998.

[4]韋莉，王敏，施瑞華，等.24h尿NAG與尿NAG/肌酐比值在IgA腎病早期腎損害檢測中的臨床意義[J].南京醫(yī)科大學學報:自然科學版，2013，33(3)：396-397.

[5]劉艷，劉丹，黃澤智.血清α1-MG、β2-MG、Hs-CRP和尿NAG聯(lián)合檢測對早期腎損害診斷的臨床應(yīng)用研究[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33(20)：2544-2545.

[6]吳衛(wèi)華.尿NAG檢測在造影劑腎病早期診斷中的應(yīng)用[J].檢驗醫(yī)學，2012，27(4)：318-320.

[7]劉紅，岳華，趙紅娟，等.尿NAG、mALB、β2-MG、α1-MG檢測對早期腎損害的診斷價值[J].西部醫(yī)學，2011，23(2)：239-241.

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The Diagnostic Value of L-FABP and NAG in Adult Severe Acute Pancreatitis with Acute Kidney Injury

KE Guibao,LIU Zhe,XU Yunyin,XIANG Qian,PU Hong,DENG Maolin

(Department of Internal Medicine,Affiliated Hospital of Chengdu University,Sichuan Chengdu 610081,China)

Objective:To investigate whether human urinary L-FABP and NAG should be regarded as early predictive markers in SAP with AKI.Methods:161 cases of acute pancreatitis(AP) were divided into the mild acute pancreatitis(MAP) group; moderately severe acute pancreatitis(MSAP) and SAP group;and the latter were divided into non-AKI subgroup and AKI subgroup. L-FABP was measured by using sandwich ELISA and NAG levels was measured by using End-point method.Results:The urinary L-FABP and NAG levels in AKI subgroup were significantly higher than those in the non-AKI subgroup(P<0.01).Conclusion:The urinary L-FABP and NAG levels can be used as early potential markers in SAP with AKI.

severe acute pancreatitis;acute kidney injury;liver-type fatty acid binding protein;N-acetyl-β-D-glucosaminidase

四川省衛(wèi)生廳科研課題項目資助(100074)，成都大學附屬醫(yī)院科研課題項目資助(201317)

柯貴寶，gbke@outlook.com

R657.51 <[文獻標志碼]A class="emphasis_bold">[文獻標志碼]A DOI:10.11851/j.issn.1673-1557.2015.04.008[文獻標志碼]A

10.11851/j.issn.1673-1557.2015.04.008

A DOI:10.11851/j.issn.1673-1557.2015.04.008

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1688.R.20150721.1717.042.html

2014-07-07)