陰道分泌物五聯卡與常規手工檢測BV的聯合應用*

廖新梅

陰道炎是一種婦科常見的疾病，正常健康婦女陰道由于解剖組織的特點對病原體的侵入有自然防御功能。例如陰道口的閉合，陰道前后壁緊貼，陰道上皮細胞在雌激素的影響下的增生和表層細胞角化，陰道酸堿度保持平衡，使適應堿性的病原體的繁殖受到抑制，而頸管黏液呈堿性，當陰道的自然防御功能受到破壞時，病原體易于侵入，導致陰道炎癥。健康婦女陰道的酸堿度能保持平衡，陰道閉合狀態良好，其自然防御機能也未遭到破壞。然而患有陰道炎的婦女陰道酸堿度失衡，從而無法抵御病原體的侵入，造成致病菌在體內大量繁殖[1]。長期患有陰道炎而未得到較好的治療會影響婦女的身心健康，大大降低了婦女的生活質量和家庭的和諧[2]。對患者造成巨大的傷害。為此，及時檢測出婦科炎癥的癥狀對患者的治療具有非常大的價值。常規的手工檢測方法即濕片檢測法，該檢測手段對于滴蟲菌以及念珠菌等引導病原體有較高的診斷價值，然而手工操作較為復雜，其診斷準確率容易受到檢測者的自身水平影響[3]。若檢測人員的專業水平欠佳，或因涂片均勻度、顯微鏡質量等客觀因素造成較高的漏檢率，不利于病情的及時診斷及治療[4]。本次研究主要通過選取本院門診進行陰道分泌物檢測的286例女性患者作為研究對象，探討陰道分泌物五聯卡與常規手工檢測的聯合應用的臨床價值，其具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年2月-2015年2月于本院門診進行陰道分泌物檢測的286例女性患者作為研究對象。分別對患者進行常規手工檢測（A組）、陰道分泌物五聯卡檢測（B組）以及聯合兩種檢測（C組）。其中A組患者年齡23~58歲，平均（37.6±4.6）歲；B組患者年齡24~53歲，平均（38.7±4.6）歲；C組患者年齡25~56歲，平均（39.1±3.6）歲。所選患者均主訴以白帶增多、有異味、外陰瘙癢為主，用無菌拭子取陰道后穹隆分泌物，經期、性生活后以及行陰道灌洗后的標本除外。所有患者年齡、病程等基本情況均無統計學差異（P>0.05），具有可比性。所有患者均對本組研究內容充分知情，并在入組前自愿簽署知情同意書，符合倫理學原則。

1.2 標本采集 所有受檢者均采用無菌拭子于陰道后穹隆處進行分泌物的采集，排除患者經期、行陰道灌洗后以及性生活后采集的樣本，將納入樣本及時交由檢驗科進行檢測。

1.3 試劑來源 陰道五聯卡檢測試劑盒選取鄭州安圖綠科生物工程有限公司生產產品，嚴格依照使用說明書進行白細胞酯酶、過氧化氫、pH、唾液酸苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶以及脯氨酸苷酶的檢測[5]。

1.4 檢測方法

1.4.1 BV診斷標準 采用Amsel臨床診斷標準：（1）陰道的分泌物比較稀薄均勻；（2）陰道分泌物pH>4.5；（3）胺試驗呈現陽性；（4）線索細胞。以上四項只需具備3項即可診斷為細菌性陰道炎，BV感染一般表現為白色或灰白色的分泌物。

1.4.2 常規手工檢測 采用Donders等提出的濕片法進行診斷，將分泌物滴加在載玻片上，用鹽水進行稀釋，再用×40倍的高倍鏡觀察分泌物中的乳酸桿菌、白細胞、背景菌落以及基地旁細胞等，再對觀察項目的分級進行評分，若達到3分以上，則可診斷為需氧性陰道炎[6]。

1.4.3 陰道分泌物五聯卡檢測 依據試劑盒使用說明書進行操作，首先，將6~8滴稀釋液滴入試管中，將帶有陰道分泌物的無菌拭子置入試管中，待分泌物充分溶于稀釋液后取出拭子。再將液體搖勻，并使用加樣滴管分別在聯檢卡上的每個孔內滴入1滴溶液，同時需將顯色液滴加在唾液酸苷酶孔內[7]。保持37 ℃的溫度，并于1 min后進行pH值的觀察。將終止液滴加在乙酰氨基葡萄糖苷酶孔內，根據比色卡來進行結果的讀取。將檢測結果輸入實際配套軟件中進行統計分析。

1.5 觀察指標 （1）分別比較兩種檢測方式下白細胞、乳酸桿菌、滴蟲菌、念珠菌以及BV的檢出率。（2）比較五聯卡檢測與顯微鏡檢測BV的符合率。

1.6 統計學處理 所有數據均使用SPSS 17.0軟件進行統計分析，計量資料用標準差（s）表示，計量資料組間比較采用獨立樣本t檢驗，計數資料以百分率（%）表示，采用 字2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3種檢測方式檢出率的比較 A組和B組的白細胞與BV檢出率均顯著低于C組，比較差異具有統計學意義（P<0.05），而在乳酸桿菌、滴蟲菌以及念珠菌的檢出率上比較差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

表1 三組檢測方式檢出率的比較 例（%）

2.2 不同檢測方法對BV診斷結果的比較 五聯卡檢測與顯微鏡對BV的檢測結果符合率為77.0%（57/74），組間差異無統計學意義（ 字2=3.165，P>0.05），見表2。

表2 不同檢測方法對BV診斷結果的比較 例

3 討論

細菌性陰道炎BV主要是陰道內厭氧菌的混合感染導致的陰道微生態失衡，通常表現出白帶增多、白帶帶有魚腥臭味以及外陰部位的瘙癢等癥狀[8]。陰道通常具有較多種類的厭氧菌，依據不同的病菌種類，又可將其分為棒狀桿菌陰道炎、嗜血桿菌性陰道炎、加特納菌性陰道炎等[9]。這類病菌感染可通過公共環境中的坐便器、浴池、衛生紙等進行傳播，還可經由性接觸傳播，是臨床常見的婦科病癥之一。有資料統計，女性細菌性陰道炎的發病大約有10%源于男性的病癥傳播。該疾病可引起較高的宮頸炎、盆腔炎等疾病，甚至會造成患者的不孕病癥。給患者帶來了巨大的傷害。因此，為了避免病情的進一步惡化，需及時進行診斷并采取及時的治療[10]。部分婦女錯認為經常進行抗生素或藥用溶液對陰道的清洗可減輕陰道炎癥，然而過度使用藥物則會導致陰道內的酸堿平衡紊亂，反而增加了細菌性陰道炎的可能性[11]。有研究對785例陰道炎患者進行了檢測，結果顯示AV感染率為13.0%，BV感染率為64.7%，合并BV+AV感染率為11.2%，其他類型感染率為46.5%，可見BV感染為最常見的陰道炎感染[12]。還有研究發現BV檢測陽性率高達24.9%，患病率偏高；BV感染通常會引起剖宮產產婦的產褥感染發病率，嚴重威脅婦女的身體健康。例如由BV導致的患者早期流產現象主要是因為大量的厭氧性細菌產生過多的磷脂酶A2，導致子宮內局部細胞組織的磷脂分解，前列腺素的合成增加[13]。目前醫學中在AV、CV等感染的研究方向偏多，因此常會忽略了BV的檢測和治療，為了保障婦女的優質生活，BV的檢測與治療同樣不可忽視。為了降低婦女的BV感染，緩解其臨床病癥，需及時進行陰道分泌物的檢測。臨床上通常將pH試驗、如染色鏡檢線索細胞、濕片鏡檢等檢測方法作為主要的診斷標準，然而這類常規的手工檢測手段卻存在較大的局限性[14]。pH檢驗的敏感性及敏感性均有限，染色鏡檢線索細胞也容易受到樣本材料的客觀影響，此類檢測手段均依靠工作人員的手工完成，操作熟練度以及專業操作水平均是影響檢測結果的重要因素，大大影響了檢測結果的準確性[15]。而五聯卡檢測法主要是通過陰道分泌物分別在白細胞酯酶、過氧化氫、pH、唾液酸苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶以及脯氨酸苷酶下的檢測。白細胞酯酶是陰道宿主細胞反應酶的標志物，常存在于粒細胞內，只有在受到細菌侵襲時才會得到釋放；過氧化氫一般可起到維持陰道微環境穩定的作用，其指標水平與乳酸桿菌成正比；唾液酸苷酶是在陰道受到BV感染時出現的一類胞外酶，其含量會隨病菌數量的增加而上升，可通過測量該指標的含量來評估病菌在陰道內的繁殖狀況；乙酰氨基葡萄糖苷酶屬于念珠菌特異性酶，其指標水平直接反應了念珠菌的感染情況；脯氨酸苷酶的指標水平可在加德納菌或動彎桿菌的侵蝕下發生一定程度的改變。總而言之，五聯卡檢測法是通過陰道分泌物與試劑之間的相互作用來進行陰道炎的評估，該診斷措施操作簡單，無需手工進行，且用時較短，規避了檢測員的主觀因素以及樣本、設備等客觀因素對其診斷準確率的影響，大大提高了診斷的特異性及敏感性。

徐建英等[16]對1015例婦女的陰道分泌物進行了檢查，并對檢查結果進行了統計學分析，分別采用五聯卡試劑以及傳統的濕片鏡檢方法對患者的陰道分泌物進行檢測，對白細胞、念球菌以及細菌性陰道炎的檢出率進行比較，其中五聯卡檢測對于乳酸桿菌的檢測率為99.6%，對白細胞的檢出率為89.0%，對細菌性陰道炎的檢出率為99.6%，對滴蟲性陰道炎的檢出率為97.1%，相較于傳統的手工檢測法，五項指標同時檢測可更加全面的反應陰道的感染情況，同時，將檢測結果輸入配套的軟件系統，可直接進行智能分析，并打出檢測報告，效率更高，具有較高的臨床推廣價值。五聯卡中的試劑過氧化氫可在檢測中充分反應陰道內乳酸桿菌的生態情況，可直接觀測陰道的微生態環境是否存在異常。由于細菌性陰道炎BV的部分厭氧性細菌存在較高的唾液酸苷酶活性或脯氨酸氨基肽酶活性，據大量臨床學者的研究發現，在漏檢的BV中大約11.4%具有唾液酸苷酶活性，大約4.6%具有脯氨酸氨基肽酶活性。若采用多種酶聯合的檢測，例如采用五聯卡進行檢測，可以更加全面的診斷及判定BV病癥，及時對患者做出適當的治療方案。秦澤鴻等[17]對143例婦女的陰道分泌物分別進行了五聯卡與傳統檢測方法的對比研究，結果可見五聯卡對于BV、白細胞以及念球菌的檢出率均明顯高于傳統檢測組，可見五聯卡的檢測較傳統的檢測方式具有十分明顯的優勢，大大提高了病菌陽性率的檢出率，在兩種檢測方式聯合應用的情況下可提高陰道炎病原體診斷的準確性。

本次研究通過對286例門診婦科檢測的患者作為研究對象，分別對患者進行了3種檢測方式的對照實驗，結果常規手工檢測時的白細胞與BV檢出率均顯著低于陰道分泌物五聯卡與常規手工聯合檢測的檢出率，而在乳酸桿菌、滴蟲菌以及念珠菌等病菌的檢出率上比較差異不顯著。可見采用陰道分泌物的五聯卡檢測大大提高了BV陰道炎的檢出率，有助于患者及時采取相應的治療措施，避免病情的進一步惡化。同時，為了探究常規手工檢測與陰道分泌物五聯卡檢測的優劣性，對兩種檢測手段的檢測結果進行了對比分析，結果五聯卡檢測與顯微鏡對BV的檢測結果符合率為77.0%（57/74），組間差異無統計學意義，然而五聯卡檢測與聯合檢測結果的符合率為94.9%（74/78）。由此可見，五聯卡檢測的符合率更高，更有利于疾病的診斷及治療，有效降低了BV感染的漏診率。

綜上所述，陰道分泌物的五聯卡檢測與常規手工檢測的聯合應用可明顯提高BV感染的診斷準確性，并且操作簡便，精確度高，對于婦科炎癥的治療具有顯著價值，值得臨床積極推廣。

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