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玉米須濃縮液輔助降血脂作用研究*

2015-05-16 09:17:18丁琳劉吉成關宏侯惠玲
中國醫學創新 2015年34期
關鍵詞:劑量血清模型

丁琳 劉吉成 關宏 侯惠玲

玉米須(英文:corn silk,學名:stigma maydis)是禾本科作物玉米的花柱和柱頭,又名玉麥須、棒子毛,是我國傳統的中藥材。《現代實用中藥》中記載:玉米須為利尿藥,對腎臟病、浮腫性疾病、糖尿病等有效。近年來,許多國內外學者對玉米須的藥理作用及有效成分展開了研究,現代藥理學研究表明:玉米須具有抗氧化、利尿、降糖、抗抑郁、抗疲勞、抗高血脂、抗腫瘤以及抗炎等作用[1-6]。玉米須化學成分主要包括:多糖類化合物、黃酮類化合物,皂苷類化合物,氨基酸類化合物和揮發性成分等[7-9]。研究表明:具有降血糖活性的多糖類可以顯著提高肝臟中己糖激酶、葡萄糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶的活性,以及降低血漿甘油三酯和膽固醇水平[10]。近年來,許多中藥的保健功能得到越來越多的關注,許多中藥相關的保健品被開發出來。玉米須作為傳統的中藥材,其藥理作用也比較明確[11]。同時衛生部在衛監督函〔2012〕306號中聲明:玉米須在我國有一定的食用歷史,未發現安全性問題,可作為普通食品管理。以上基礎為玉米須保健品的開發提供了依據,本實驗以不同濃度的玉米須濃縮液為受試物,考察其對大鼠血脂的影響。采用《保健功能評價方法》中輔助降血脂實驗方案,以高能飼料喂養Wister大鼠,同時灌胃給予不同濃度的玉米須濃縮液,以大鼠血清中總膽固醇,甘油三酯,低密度脂蛋白,肝臟系數以及肝臟組織病理學考察為實驗指標,考察玉米須濃縮液對高能飼料喂養下大鼠高血脂的預防作用,同時也為開發玉米須濃縮液作為保健品提供了理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 原料 玉米須由齊齊哈爾醫學院醫藥科學研究院提供,基礎飼料由齊齊哈爾醫學院動物實驗中心提供,高脂飼料由北京華阜康生物科技股份有限公司提供,許可證號:SCXK(京)2014-0008。高脂飼料配方:豬油10%、蔗糖15%、蛋黃粉15%、酪蛋白5%、膽固醇1.2%、膽酸鈉0.2%、碳酸氫鈣0.6%、石粉0.4%、基礎飼料料52.6%。

1.1.2 試劑 四氧嘧啶(Sigma公司)、葡萄糖(Acros公司)、甲醛(沈陽新化試劑廠)、磷酸氫二鈉(天津凱通試劑有限公司)、磷酸二氫鈉(天津凱通試劑有限公司)。

1.1.3 主要儀器 全自動生化儀(日本日立公司)、生物顯微鏡(日本奧林巴斯)、組織脫水機(日本櫻花公司)、手動輪轉式切片機(德國徠卡公司)。

1.1.4 實驗動物 雄性清潔級Wister大鼠購于哈爾濱醫科大學實驗動物學部,許可證號:SCXK(黑)2013-001。

1.2 方法

1.2.1 玉米須濃縮液制備 將玉米須樣品粉碎,在沸水浴下浸提1 h,過濾,重復4次,合并濾液,濃縮成濃度為0.25、0.5和1 g/mL(相當于玉米須量)的濃縮液,作為實驗治療藥物。

1.2.2 實驗動物分組及給藥 購入的Wister大鼠適應環境1周后,隨機分為五組,每組10只。分組如下:正常對照組,高脂模型組,玉米須濃縮液低、中、高劑量組(簡稱低、中、高劑量組)。正常對照組喂食鼠基礎飼料,其余各組喂食高脂飼料。試驗期間,正常對照組和高脂模型組給予2 mL/d蒸餾水,低、中、高劑量組分別給予0.25、0.5、1 g/mL濃度的玉米須濃縮液,給藥體積為1 mL/100 g BW,1次/d,連續灌胃30 d,實驗期間動物自由飲水和攝食。體重,進食量記錄1次/周,同時觀察玉米須濃縮液對實驗動物生長的影響。末次給藥后禁食過夜,取血后分離血清同時取肝臟并稱重記錄。

1.2.3 指標檢測 全自動生化儀測定血清總膽固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、血清低密度脂蛋白(LDL-C)含量。肝臟系數=肝臟濕重(g)/體重(100g),肝臟病理組織學檢測:HE染色法觀察肝臟組織病理變化。

1.3 統計學處理 使用SPSS 11.0統計軟件進行分析,計量資料采用(s)表示,比較采用t檢驗,采用單因素方差分析,并用LSD法比較各組間的差異,以P<0.05為差異有統計學意義。

表1 玉米須濃縮液對大鼠體重的影響(s) g

表1 玉米須濃縮液對大鼠體重的影響(s) g

*與正常組比較,P<0.05;△與高脂模型組比較,P<0.05

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表2 玉米須濃縮液對大鼠進食量的影響(s) g

表2 玉米須濃縮液對大鼠進食量的影響(s) g

*與高脂模型組比較,P<0.05

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2 結果

2.1 玉米須濃縮液對大鼠體重的影響 由表1可知,經過4周喂養后,高脂模型組大鼠的體重最高,與正常組比較差異有統計學意義(P<0.05);各劑量組大鼠平均體重均低于高脂模型組大鼠,與高脂模型組比較差異均有統計學意義(P<0.05),并且有一定的量效關系。試驗第2周時,高脂模型組大鼠的體重增長迅速,與正常組比較差異有統計學意義(P<0.05);各劑量組大鼠在玉米須濃縮液的干預下,其體重增長較緩慢,顯著低于高脂模型組,與高脂模型組比較差異有統計學意義(P<0.05)。結果提示:玉米須濃縮液可以顯著抑制高脂飼料喂養下的大鼠體重的異常增加,對于體重的控制有一定的作用。

2.2 玉米須濃縮液對大鼠進食量的影響 由表2可知,在第4周時,各劑量組大鼠的進食量均小于高脂模型組,其中高劑量組大鼠的進食量最少,并且在試驗的第3周時,高劑量組大鼠的進食量就已經顯著低于高脂模型組,差異均有統計學意義(P<0.05)。結果提示:玉米須濃縮液可以減少高脂飼料喂養下的大鼠的進食量。

2.3 玉米須濃縮液對大鼠血脂的影響 由表3可知,高脂模型組與正常組相比,血清中總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量顯著上升,差異有統計學意義(P<0.05),說明實驗性大鼠高血脂模型造模成功。在大鼠血清TC、TG含量方面,高劑量組和中劑量組的大鼠血清TC、TG含量與高脂模型組比較,差異均有統計學意義(P<0.05),中劑量組影響較大,但與高劑量作用效果比較差異無統計學意義(P>0.05)。在大鼠血清低密度脂蛋白(LDL-C)含量方面,高劑量組大鼠的血清LDL-C含量與高脂模型組比較差異有統計學意義(P<0.05),其他兩個劑量組作用不明顯,與高脂模型組比較差異無統計學意義(P>0.05)。結果提示:中劑量的玉米須濃縮液能夠有效地抑制高血脂大鼠血清TC和TG的含量,高劑量的玉米須濃縮液可以有效降低高血脂大鼠血清LDL-C的含量。

表3 玉米須濃縮液對大鼠血脂的影響(s) mmol/L

表3 玉米須濃縮液對大鼠血脂的影響(s) mmol/L

*與正常組比較,P<0.05;△與高脂模型組比較,P<0.05

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2.4 玉米須濃縮液對大鼠肝臟系數的影響 由表4可知,高脂模型組大鼠肝臟系數與正常組比較差異有統計學意義(P<0.05),說明高脂模型組大鼠肝臟可能發生病變。玉米須濃縮液各劑量組中,高劑量組的大鼠肝臟系數顯著低于高脂模型組,差異有統計學意義(P<0.05),其他兩組差異無統計學意義(P>0.05)。結果提示:高劑量的玉米須濃縮液能夠緩解高脂飼料喂養下大鼠的肝臟病變,降低肝臟系數。

表4 玉米須濃縮液對大鼠肝臟系數的影響(s)g/100 g BW

表4 玉米須濃縮液對大鼠肝臟系數的影響(s)g/100 g BW

*與正常組比較,P<0.05;△與高脂模型組比較,P<0.05

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2.5 玉米須濃縮液對大鼠肝組織形態的影響 由圖1可知,高脂模型組大鼠的肝臟組織中有明顯的脂肪空泡,且數量較多,說明肝臟脂肪變性明顯。玉米須濃縮液劑量組中,高劑量組和中劑量組大鼠的肝臟組織中脂肪空泡比較少,甚至趨近與正常組大鼠的肝臟組織。結果表明,玉米須濃縮液能夠抑制肝臟組織脂肪變性,預防脂肪肝的形成。

圖1 大鼠肝臟組織切片HE染色圖

3 討論

近年來由于人們生活水平不斷提高,日常飲食中多出現高蛋白、高脂等食材,通過飲食攝入的脂肪量大大增加,再加上日常工作繁重,運動量下降等原因,人體血液中脂肪含量長期處于偏高的狀態,高脂血癥出現的概率也顯著增加[12]。高脂血癥對于人體的危害是比較大的,有數據顯示,我國近年來心血管疾病導致的死亡占居民總死亡原因的39.4%,而心血管疾病多是由高血脂導致的動脈硬化引起的,脂肪肝與高血脂也有密切關系[13]。關于高脂血癥的診斷標準,目前國際和國內尚無統一的方法,既往認為總膽固醇濃度>5.17 mmol/L(200 mg/dL)可定為高膽固醇血癥,新的標準建議在LDL-C濃度>130 mg/dL時開始藥物治療,以LDL-C濃度<100 mg/dL為治療目標。

近年來,中藥用來治療高血脂癥得到越來越多人認可,并且人們對中醫藥結合治療的效果比較滿意[14]。本實驗方案的設計參照了國家保健食品功能評價中輔助降低血脂功能檢驗實驗方案,在實驗中,使用高脂飼料喂養大鼠,模擬日常生活中的高脂飲食,高脂飲食引起的內在病理機制以痰濕為主,其痰濕的物質基礎與血脂異常有關[15]。結果上看,高脂模型組大鼠的血清甘油三酯和總膽固醇均顯著高于正常組,表明這種飲食方式造成大鼠體內血脂的異常升高,大鼠實驗性高血脂造模成功。造模的同時對大鼠給予玉米須濃縮液進行干預治療,中劑量的玉米須濃縮液對TG、TC含量升高有明顯抑制作用,高劑量的玉米須濃縮液對LDL-C有明顯抑制作用。由此可見,玉米須濃縮液對高脂飲食所致大鼠血脂升高有明顯的抑制作用,能夠預防大鼠的高血脂形成。

臟器系數又稱臟體比,是實驗動物某臟器的重量與其體重之比值。正常時各臟器與體重的比值比較恒定,動物病變后,受損臟器重量可能發生改變,故臟器系數也隨之而改變。臟器系數增大,表示臟器充血、水腫或增生肥大等;臟器系數減小,表示臟器萎縮及其他退行性改變。本實驗中,高劑量玉米須濃縮液對于大鼠肝臟系數的增大有顯著的抑制作用,說明其可以在一定程度上緩解高脂飼料喂養下的大鼠肝臟的病變,同時在大鼠肝組織HE染色結果上看,玉米須濃縮液可以緩解大鼠肝臟組織的脂肪變性,抑制脂肪肝的形成。

從實驗結果和上述分析中,初步認定玉米須濃縮液對大鼠高血脂有一定的抑制作用,能夠在高脂飲食的誘導下緩解大鼠血清甘油三酯、總膽固醇的升高,具有輔助降低血脂的保健功能,對玉米須濃縮液保健品的開發提供了理論依據。

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