葡萄砧木在馴化過程中生理指標(biāo)的比較研究

李曉

[摘 要] 以葡萄砧木'SO4'、'5BB'的試管苗、開瓶馴化后的試管苗以及移栽成活的苗木為研究材料，測定了它們枝條在馴化后的根系活力、可溶性糖、可溶性蛋白、葉綠素含量的變化進行綜合評價，最終得出結(jié)論。

[關(guān)鍵詞] 葡萄砧木 試管苗 生物學(xué)特性 生理指標(biāo)

[中圖分類號] S663.1 [文獻標(biāo)識碼] B [文章編號] 1003-1650 （2015）09-0152-02

砧木，進行嫁接栽培，或稱“砧化栽培”，已成為世界各主要葡萄栽培生產(chǎn)國發(fā)展葡萄的重要舉措口。離體繁殖的試管苗能否大量應(yīng)用于開發(fā)生產(chǎn)，取決于試管苗是否有較高的移栽成活率，因此提高試管苗的成活率具有重要的現(xiàn)實意義和實際應(yīng)用價值。

1 試驗設(shè)計與方法

1.1 試驗材料

1.1.1閉瓶在恒溫箱中的生長期為40天的5BB和SO4試管苗。

1.1.2從恒溫箱取出在弱光下訓(xùn)練5天后開瓶在強光下訓(xùn)練5天的5BB和SO4試管苗。

1.1.3馴化后成活的生長期為2個月的5BB和SO4苗木。

1.2 試驗方法

1.2.1生根壯苗的培養(yǎng)

1.2.1.1光培煉苗

試管苗生根培養(yǎng)35～40d以后，選擇根長1～3cm、苗高5cm左右的發(fā)育良好的試管壯苗放在強光下，不打開瓶塞，使試管苗在自然強光的照射下鍛煉3～5d，在一定程度上提高移栽成活率。

1.2.1.2透氣煉苗經(jīng)過二次煉苗后，試管苗的根系數(shù)量增多，部分有側(cè)根，活力提高；葉片光合能力增強。鍛煉過程中因光照漸強，易致高溫，故應(yīng)遮蔭。

1.2.2過渡移栽

1.2.2.1移栽基質(zhì)的準(zhǔn)備

用蛭石和珍珠巖的比例為3：1的基質(zhì)混勻并參雜熟化且含有機質(zhì)多的表土，腐熟好的牛、羊、馬糞，粗細均勻、透氣性好的沙，拌勻過篩待用。對基質(zhì)進行高壓、烘烤或藥劑滅菌，同時還需定期使用一定濃度的殺菌劑，以便更有效地保護幼苗，如濃度800～1000倍的多菌靈、托布津等，噴藥間隔宜7～10d一次。裝填育苗缽時要把袋底裝上營養(yǎng)土至1/4處，待用。

1.2.2.2移栽技術(shù)

將生根試管苗小心從瓶中取出，在20攝氏度的水中浸泡約十分鐘，換水兩次洗凈根部的培養(yǎng)基，在生根劑溶液中浸根3～5分鐘，栽于準(zhǔn)備好的育苗缽中，每個育苗缽中栽植1株，移栽前，先將基質(zhì)澆透水，然后用鑷子或細竹筷夾住苗后種植在育苗缽內(nèi)，移栽過程需注意不窩根、不繞根、不傷葉試管苗根部，使根均勻分布于育苗缽中，再用基質(zhì)填滿剩余3/4的空間，裝滿后在地上輕墩幾下使苗根于營養(yǎng)土貼緊，土面距營養(yǎng)缽邊沿1cm左右，最后澆足定根水，噴灑一定劑量的殺菌劑，置于陽光充足、平整、潮濕的地面上，用塑料小拱棚保濕，大約十五天左右。

1.2.2.3苗期管理

這是影響移植成活率的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，特別注意以下幾方面

第一，保濕并適當(dāng)遮蔭。保持移栽環(huán)境內(nèi)空氣相對濕度達到80%～95%。但基質(zhì)中的水分不宜過多，否則會使苗根頸處濕度過大，感染雜菌而爛莖死亡。故宜采用在移栽苗葉面和小拱棚內(nèi)空間內(nèi)人工噴細霧的方法，噴霧次數(shù)依外界天氣情況而定。移栽后還要注意遮蔭，避免中午強光直射，使棚內(nèi)溫度保持在25℃，最高不超過30℃。

第二，通風(fēng)。 移植后1周開始通風(fēng)，早期只在溫度過高時通風(fēng)，每次1～2h，以后逐漸延長通風(fēng)時間直至完全揭除棚膜，此時新的根系生長。同時還需人工噴霧，保持拱棚內(nèi)一定的空氣濕度。揭棚10～15d后才可進行常規(guī)管理。

第三，防病保苗。移栽苗在高溫，高濕，弱光條件下，最易感病菌。主要在根頸褐變和腐爛，地上部分枯萎后死亡。一般在移苗前使用800倍液多菌靈對介質(zhì)進行消毒的解決方案，移栽后立即與一定濃度的撲海菌、多菌靈等殺菌劑進行根灌或噴施，成活后每周處理1次，并每次配合追施由大量，微量鐵鹽組成液肥和水。

1.2.3生理指標(biāo)的測定

1.2.3.1葉綠素：用80%的丙酮提取法測定；

1.2.3.2植物體內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)：用考馬斯亮藍G-250染色法測定；

1.2.3.3可溶性糖：用葸酮法測定；

1.2.3.4根系活力：用甲烯藍法測定。

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄砧木品種在不同時期的葉片可溶性糖含量

由圖知，品種5BB在整個馴化時期中可溶性糖的含量都高于SO4。不同葡萄砧木和品種的植物組織和細胞可溶性糖含量與其抗寒性密切相關(guān)，可溶性糖含量越高，增加的幅度越大，則植物抗寒性越強，所以，5BB較適應(yīng)寒冷的氣候并能茁壯成長。

圖1. 兩個品種在處理中的可溶性糖含量（%）差異

2.2 葡萄砧木品種在不同時期的根系活力

葡萄砧木試管苗在瓶內(nèi)生根，生長速度較快，5～7天即伸入培養(yǎng)基內(nèi)，移栽時部分成褐色，已栓質(zhì)化，一段時間后葡萄砧木試管苗能迅速長出大量的新根，蒸騰速率恢復(fù)，吸收功能大幅提高，逐漸滿足地上部分對水分和養(yǎng)分的需求，小苗開始生長。由圖知，品種5BB在馴化的過程中根系的活力較強，移栽過程中較易恢復(fù)生長。

圖2. 兩個品種在處理中的根系活力的差異

2.3 葡萄砧木品種在不同時期葉片的蛋白質(zhì)含量

S04在每個馴化階段的蛋白質(zhì)含量顯著高于5BB且變化差異較5BB小，可溶性蛋白的親水性較強，能明顯增強細胞的持水力，其含量的增加可以使細胞束縛更多的水分，還可以減少原生質(zhì)因結(jié)冰而傷害致死的機率，從而提高其抗寒性。所以砧木SO4比5BB較適應(yīng)寒冷的地區(qū)移栽。

圖3. 兩個品種在處理中可溶性蛋白質(zhì)含量（%）的變化差異

2.4 葡萄砧木品種在不同時期葉片的葉綠素含量

在馴化過程中，葡萄試管苗氣孔開張度逐漸減小，蒸騰速率大幅度降低，光飽和點逐漸上升，所以最大凈光合速率呈現(xiàn)上升趨勢，葉綠素濃度逐漸增加。由圖知，兩者的葉綠素含量均有上升的趨勢，5BB葉片內(nèi)葉綠素含量稍高于SO4。

圖4. 兩個品種在處理中葉綠素含量的變化差異

3 討論

萄砧木品種在生長環(huán)境相同的情況下， 硬枝扦插困難，一方面受基因控制，另一方面，扦插時間和栽培技術(shù)措施也有一定的影響。實驗中兩個品種的各個生理指標(biāo)與成活率雖然呈現(xiàn)一定的線性關(guān)系，但是試驗所用的材料的種類還是相對較少，實驗規(guī)模有限，因此還有待于擴大實驗樣本的容量，進一步研究其他品種。試驗中雖然經(jīng)過馴化后移栽到基質(zhì)中的葡萄試管苗成活了，但是其長勢非常微弱，尤其是品種SO4，經(jīng)過觀察其長出的新根特別少。這種情況也不是移栽中的難題，早有研究認(rèn)為，葡萄插條在10℃以上才能發(fā)根，20～28℃發(fā)根速度加快。葡萄根原基形成所需要的溫度較萌芽高。在12℃條件下，中柱鞘活動極為緩慢，在25℃～28℃時最適宜其活動、分裂、能快速形成新根。

4 總結(jié)

砧木5BB在整個馴化過程中可溶性糖的含量、含量的增加幅度都高于SO4且各階段間的根系的活力較強，葉片內(nèi)葉綠素含量稍高于SO4。SO4在每個馴化階段的蛋白質(zhì)含量顯著高于5BB，且蛋白質(zhì)含量變化差異較5BB小，綜合比較，砧木5BB的長勢較SO4的好。