液基薄層細胞檢測與HPV—PCR熒光定量分析應用于宮頸癌及癌前病變診斷的臨床意義

曹佳萍

[摘要] 目的 探討TCT聯合HPV-PCR應用于宮頸癌及其癌前病變診斷的臨床意義。 方法 對2011年1月～2014年2月期間我院婦科診治的1600例已婚患者進行TCT、HPV-PCR檢查，對TCT不明確的不典型鱗狀細胞（ASC-US）以上、HPV-PCR陽性368例患者再行陰道鏡宮頸多點活檢。 結果 1600例患者中TCT檢測陽性80例（5.0%），HPV-PCR檢測陽性368例（23.0%）；80例TCT檢測陽性患者，經陰道鏡宮頸多點活檢檢查后，54例慢性宮頸炎、6例輕度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅰ）、8例中度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅱ）、10例重度宮頸上皮瘤病變和原位癌（CIN Ⅲ）、2例鱗狀細胞癌（SCC）。368例HPV檢測陽性患者，經陰道鏡宮頸多點活檢后，307例慢性宮頸炎、27例輕度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅰ）、17例中度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅱ）、13例重度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅲ）、4例鱗狀細胞癌（SCC）。 結論 TCT、HPV-PCR檢查各有優缺點，但聯合檢測具有高效、便捷等優勢，能明顯提高宮頸癌及癌前病變的陽性檢出率，可成為宮頸病變篩查的最佳方法。

[關鍵詞] TCT；HPV-PCR熒光定量分析；宮頸癌；癌前病變

[中圖分類號] R737.33 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2015）17-0038-03

宮頸癌作為婦科比較常見的惡性腫瘤之一，是由宮頸上皮內瘤變（CIN）逐漸演變為浸潤癌的過程，存在較長的、可逆性癌前病變[1，2]。只有早期篩查、早期診斷宮頸癌及癌前病變，才能更好地指導治療[3]。液基薄層細胞檢測（TCT）作為宮頸病變的常規檢測方法，具有信息量大、背景清晰、便于閱讀等諸多優點，被廣泛應用于宮頸病變的篩查診斷中[4，5]。有研究表明，人乳頭狀瘤病毒（HPV）是導致宮頸癌發病的主要原因，HPV-PCR熒光定量分析檢測能夠提高宮頸癌及癌前病變的篩查敏感度[6，7]。而電子陰道鏡在判斷宮頸病變性質、范圍、類型方面具有較高的活檢陽性率[8]。本研究選取我院婦科診治的1600例已婚患者進行TCT、HPV-PCR檢查，對于TCT不明確的不典型鱗狀細胞（ASC-US）以上、HPV-PCR陽性患者368例再進行陰道鏡宮頸多點活檢，探討TCT聯合HPV-PCR篩查應用于宮頸癌及癌前病變診斷的臨床意義，從而更好地指導早期診斷和治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年1月～2014年2月期間我院婦科診治的1600例已婚女性為研究對象，年齡22.0～67.0歲，平均（42.0±5.0）歲。所有患者均接受TCT、HPV-PCR檢查，對于TCT分級在不典型鱗狀細胞（atypical squamous cells，ASC-US）以上的80例患者及HPV-PCR陽性368例患者，再進行陰道鏡宮頸多點活檢。

1.2 檢查方法

無菌棉球擦凈宮頸分泌物，將宮頸刷插入宮頸管順時針轉圈后，取出置入細胞保存液小瓶。

1.2.1 TCT標本采集及檢查方法 分離宮頸分泌物標本中的黏液、血液、炎性細胞、上皮細胞等成分，經過制片、人工巴氏染色等相關處理后鏡下檢查。根據2001年陰道細胞學的分類及報告細則（TBS）分為4個級別[5]：正常范圍（WNL）、不明確的不典型鱗狀細胞（ASC-US）、低度鱗狀上皮內瘤變（LSIL）、重度鱗狀上皮內瘤變（HSIL）、鱗狀細胞癌（SCC）。

1.2.2 HPV-PCR檢查方法 通過PCR反向點雜交法，利用亞能生物技術深圳有限公司的“人乳頭癌病毒基因分型（23型）檢測試劑盒，檢測18種高危型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83型。專用宮頸管刷，刷取宮頸管內脫落細胞標本，移至專用標本液中，折斷刷柄，蓋好瓶蓋送檢，經HPV-PCR提取、PCR擴增、雜交、洗膜、顯色等方法，根據斑點顯現的有無判斷結果，依據藍色斑點顯現位置判斷HPV基因型，多點顯色即為多重感染。

1.2.3 陰道鏡檢查方法 觀察鱗狀上皮、柱狀上皮交界處上皮組織及血管，3%醋酸涂抹宮頸后，觀察交界處上皮及血管情況，繼而涂抹盧戈氏碘液，不著色組織為陽性區。觀察陰道鏡圖像、邊界清晰程度、血管擴張及毛細血管間距等情況，在異常圖像或可疑部位取多點活檢。活檢診斷分為子宮頸黏膜慢性炎、輕度宮頸上皮內瘤變（CIN Ⅰ）、中度宮頸上皮內瘤變（CIN Ⅱ）、重度宮頸上皮內瘤變（CINⅢ）和宮頸癌。對于TCT檢測陽性、HPV檢測陽性、陰道鏡圖像異常患者，陰道鏡下宮頸多點活檢。

2 結果

2.1 TCT檢查結果

1600例患者中TCT檢測陽性80例（5.0%），包括ASC-US、LSIL、HSIL3個級別的細胞，無SCC檢出。其中，組織病理學檢查（CIN+SCC）共26例（32.5%），見表1。

2.2 高危型HPV-PCR檢查結果

1600患者中368例HPV-PCR檢測陽性（23.0%），其中55例（14.9%）診斷為高危型陽性HPV，313例（85.1%）診斷為高危型陰性HPV，見表2。

表2 368例高危型HPV-PCR檢查及其病理學檢查結果[n（%）]

2.3 HPV-PCR高危型、TCT檢測結果比較

368例HPV-PCR高危型標本中，經過病理組織學檢查發現，其中55例高危型陽性和26例TCT陽性，19例中HPV-PCR與TCT檢查均為陽性，306例HPV-PCR與TCT檢查均為陰性，見表3。

表3 HPV-PCR高危型、TCT檢測結果比較

3 討論

宮頸癌作為目前危及婦女健康和安全的常見惡性腫瘤，其發病率僅次于乳腺癌，多數患者就診時已經處于晚期，極大地威脅患者的生命安全[9]。因此，早期發現、早期治療宮頸癌及癌前病變對于宮頸癌的防治具有非常重要的臨床意義[10，11]。

TCT通過TBS細胞學分類診斷標準對宮頸細胞進行診斷，是宮頸疾病的常規檢查方法[12]。但是，鱗狀上皮、柱狀上皮交界處細胞不好采集，導致篩查敏感度降低，容易出現漏診。有報道稱，人乳頭瘤病毒（HPV）是宮頸癌的主要致病因素[13]。HPV-PCR病原學檢查已成為宮頸癌早期診斷的篩查方法，適用于宮頸癌病變前期的廣泛篩查[14]。但是，部分感染HPV的婦女在自身免疫清除HPV病毒作用下，僅有少數進展為宮頸癌，所以，HPV-PCR篩查宮頸癌的檢查方法具有一定程度的局限性[15]。本研究中，1600例患者中TCT檢測陽性80例（5.0%），HPV-PCR檢測陽性368例（23.0%），結果表明HPV-PCR的檢測陽性率相對較高。

本研究中，80例TCT檢測陽性患者，經陰道鏡宮頸多點活檢后，54例慢性宮頸炎、6例輕度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅰ）、8例中度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅱ）、10例重度宮頸上皮瘤病變和原位癌（CIN Ⅲ）、2例鱗狀細胞癌（SCC）。368例HPV檢測陽性患者，經陰道鏡宮頸多點活檢后，307例慢性宮頸炎、27例輕度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅰ）、17例中度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅱ）、13例重度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅲ）、4例鱗狀細胞癌（SCC），結果表明陰道鏡、TCT、HPV-PCR檢查作為宮頸癌及癌前病變篩查的重要檢查方法，相互之間具有互補作用[16]。

陰道鏡直視下宮頸多點活檢是宮頸癌檢查的金標準，但是該檢查方法具有一定的創傷性，一定程度上影響其臨床應用范圍。陰道鏡直視下宮頸多點活檢能夠有效提高宮頸疾病的敏感度，避免活檢取材的盲目性[17]。對于TCT不明確的不典型鱗狀細胞（ASC-US）以上、HPV-PCR陽性患者，進行陰道鏡宮頸多點活檢[18-20]。

總而言之，HPV-PCR檢查雖然具有較高的檢出率，但是其檢查費用相對較貴，而TCT檢查操作簡單、經濟實惠，因此，HPV-PCR和TCT檢查作為宮頸癌及癌前病變篩查的重要檢查方法，相互之間具有互補作用，在患者經濟條件許可的情況下，建議聯合檢查。TCT、HPV-PCR聯合檢測能夠取長補短，提高宮頸癌及癌前病變的陽性檢出率，降低臨床漏診率。

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（收稿日期：2015-04-28）