阿托伐他汀對不同ApoE基因型冠心病患者血脂調(diào)控影響的臨床研究*

鄭文武，李正業(yè)，李 翔，黃 立，蔣 燦，劉 盼，黃冬梅，劉 茜(.瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院心內(nèi)科，四川瀘州 646000；.四川省瀘州市敘永縣人民醫(yī)院心內(nèi)科 646400；.四川省瀘州市人民

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·論 著·

阿托伐他汀對不同ApoE基因型冠心病患者血脂調(diào)控影響的臨床研究*

鄭文武1，李正業(yè)2△，李 翔3，黃 立2，蔣 燦1，劉 盼1，黃冬梅1，劉 茜1(1.瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院心內(nèi)科，四川瀘州 646000；2.四川省瀘州市敘永縣人民醫(yī)院心內(nèi)科 646400；3.四川省瀘州市人民

醫(yī)院心內(nèi)科 646000)

目的 運用限制性片段長度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)(PCR-RFLP)技術(shù)，檢測冠心病患者ApoE基因型以及阿托伐他汀對不同ApoE基因患者血脂調(diào)控的影響，探討冠心病的發(fā)病機制及阿托伐他汀對其預(yù)后的影響。方法 選取2013年1～12月瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院心內(nèi)科收治的冠心病住院患者116例作為冠心病組，另取同期健康體檢者50例作為健康對照組，通過PCR-RFLP技術(shù)測定ApoE基因型，測定冠心病組服用阿托伐他汀治療前及治療12周后的血脂水平，分析基因型與調(diào)脂療效的關(guān)系。結(jié)果 冠心病患者中，ApoE E3/4、E4/4基因型和ε4等位基因頻率顯著高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；ε4等位基因組，血脂TC和LDL-C水平顯著高于其他等位基因組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；阿托伐他汀治療12周后，ApoE E2/2+E3/2、E3/3與E4/3+E4/4等位基因組比較，治療后患者血漿中的TC、LDL-C和HDL-C水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論 ApoE基因型E3/4、E4/4及ε4等位基因有可能參與了冠心病的發(fā)生、發(fā)展過程，阿托伐他汀對ApoE E2/2+E3/2、E3/3等位基因組冠心病患者降脂效果更好，而對E4/3+E4/4等位基因組冠心病患者效果不確切。

冠心病； ApoE基因； 基因多態(tài)性； 阿托伐他汀； 血脂

隨著人們生活水平的提高，人類疾病也發(fā)生著明顯的變化，冠心病現(xiàn)已成為威脅人類身體健康的重大疾病之一，其發(fā)病率、病死率正在逐年上升，但發(fā)病機制仍然不清楚，主要為多種危險因素相互累積的結(jié)果，其中脂質(zhì)代謝紊亂是導(dǎo)致冠心病主要的獨立危險因素[1-3]。近年來，已有大量基礎(chǔ)和臨床研究表明，冠心病也是一種由多種內(nèi)在遺傳因子和外在環(huán)境因素互相作用而導(dǎo)致的疾病[4-6]。本文主要探討冠心病患者ApoE基因型，以及阿托伐他汀對不同的ApoE基因型患者血脂調(diào)控的影響，從分子水平探討冠心病的發(fā)病機制及阿托伐他汀對其預(yù)后的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1～12月瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院心內(nèi)科收治的冠心病住院患者116例作為冠心病組，所有患者均經(jīng)選擇性冠脈造影初次診斷為冠心病，其中男60例，年齡56～75歲；女56例，年齡58～74歲；平均(60.5±8.4)歲，均為一支及以上血管腔徑狹窄大于或等于50%者，均排除家族性高膽固醇血癥、脂肪肝、糖尿病、甲狀腺疾病、腎臟疾病、嚴重高血壓及肝臟疾病。另取同期健康體檢者50例作為健康對照組，其中男26例，女24例；年齡55～69歲，平均(57.3±9.2)歲，排除高血壓、肝、腎和內(nèi)分泌代謝性疾病。

1.2 標本采集 所有研究對象抽血前至少低脂飲食3 d，禁食12 h以上，取靜脈血4 mL，分為兩管，每管各2 mL，其中1管加入乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝劑抗凝，用于ApoE基因型；另一管不加抗凝劑，需分離出血清，用于檢測血脂水平；兩管血樣均需置于-20 ℃冰箱凍存。

1.3 方法 采用多聚酶鏈式反應(yīng)-限制性內(nèi)切酶片段長度方法(PCR-RFLP)測定冠心病組和健康對照組ApoE基因型，比較冠心病組與健康對照組ApoE基因型及等位基因分布頻率的差異；測定冠心病組服用阿托伐他汀20 mg/d治療前及治療12周后的血脂水平，分析基因型與調(diào)脂療效的關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1 ApoE基因型與等位基因頻率分布 冠心病組中ApoE E3/4、E4/4基因型和ε4等位基因頻率顯著高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；而E2/3、E3/3、ε2和ε3則略低于健康對照組，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 冠心病組、健康對照組ApoE基因型及等位基因頻率分布[n(%)]

2.2 ApoE基因型多態(tài)性與血脂水平的比較 ApoE ε4等位基因組，血脂TC和LDL-C顯著高于其他等位基因組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而TG和HDL-C在ApoE等位基因組中差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

2.3 阿托伐他汀治療前后ApoE不同等位基因型血脂水平比較 ApoE E2/2+E3/2、E3/3與E4/3+E4/4等位基因組，阿托伐他汀治療后患者血漿中的TC、LDL-C和HDL-C差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，TG差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表3。

表2 ApoE基因型多態(tài)性與血脂水平的比較±s)

注：與ε4相比較，aP<0.05。

表3 阿托伐他汀治療前后各ApoE等位基因血脂水平的比較±s，mmol/L)

3 討 論

近年發(fā)現(xiàn)冠心病發(fā)病率越來越高，且發(fā)病年輕化，直接對人類健康構(gòu)成了嚴重威脅。目前研究證實，ApoE基因多態(tài)性與冠心病具有相關(guān)性，經(jīng)過多種研究發(fā)現(xiàn),血脂及冠狀動脈粥樣硬化與ApoE之間存在著非常密切的關(guān)系，ApoE是冠心病早發(fā)的預(yù)測因子，ApoE可能作為一個遺傳因素參與動脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展[7]。通過上述試驗發(fā)現(xiàn)，ApoE E3/4、E4/4基因型和ε4等位基因頻率顯著高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，由此提示ApoE基因型E3/4、E4/4及ε4等位基因有可能參與了冠心病的發(fā)生、發(fā)展過程；其次，在冠心病患者中，ε4等位基因組與血脂TC和LDL-C水平升高有顯著關(guān)系，而對血脂TG和HDL-C影響不顯著，提示ε4等位基因的表達是脂質(zhì)代謝紊亂的重要危險因素，其已成為冠心病易發(fā)的重要遺傳標志，而對于ε2的作用仍存在著很大的爭議，有學者認為其是冠心病的保護因子，也有人認為是誘發(fā)因子[8-10]。在對于ε3的看法上，目前的研究暫時不明確。冠心病的嚴重程度也與ApoE基因多態(tài)性有著密切相關(guān)性，通過試驗研究發(fā)現(xiàn)，不同基因型的冠心病組與健康對照組中ε4等位基因攜帶者均伴有TC、LDL-C及ApoB水平升高，且比健康對照組升高更明顯，這與大多數(shù)研究測得的ε4等位基因變異影響血膽固醇和ApoB水平的結(jié)果相符合[10-11]。研究還發(fā)現(xiàn)，無論是冠狀動脈單支病變或是多支病變的，其ε4等位基因頻率均比健康對照組高，同時，多支病變的ε4等位基因頻率比單支病變者高，而多支病變患者的ε2等位基因頻率低于單支病變患者，這些結(jié)果都表明ε4等位基因的表達頻率與冠狀動脈狹窄的嚴重程度呈正相關(guān)[11-12]。他汀類藥物是羥甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，HMG-CoA還原酶是膽固醇在體內(nèi)合成過程中早期的限速酶，他汀類藥物通過對HMG-CoA還原酶的抵制達到降脂的作用，目前在全世界他汀類藥物已得到了廣泛使用，它已成為防治冠心病的一線處方用藥[13-14]。但在臨床中，他汀類藥物的降脂效果存在很大的個體差異，服用他汀類藥物后不同個體間LDL-C水平下降的程度差異較大,有很大一部分患者經(jīng)過用藥后均達不到降脂目標；而且服用他汀類藥物后出現(xiàn)的不良反應(yīng)在不同個體間也有差異，這可能與基因遺傳學方面有關(guān)。本研究中冠心病患者在給予阿托伐他汀治療后，ApoE E2/2+E3/2、E3/3等位基因組TC、LDL-C和HDL-C血脂水平顯著低于E4/3+E4/4等位基因組，由此提示，阿托伐他汀對ApoE E2/2+E3/2、E3/3等位基因組冠心病患者降脂效果更好，療效更佳，而對E4/3+E4/4等位基因組冠心病患者效果不確切，從而得出冠心病患者調(diào)脂及冠脈狹窄治療療效與ApoE基因多態(tài)性相關(guān)。

[1]Mohan AV,Fazel R,Huang PH,et al.Changes in geographic variation in the use of percutaneous coronary intervention for stable ischemic heart disease after publication of the clinical outcomes utilizing revascularization and aggressive drug evaluation(COURAGE) trial[J].Circ Cardiovasc Qual Outcomes,2014,7(1):125-130.

[2]Kinkuolie AO,Paynter NP,Padmanabhan L,et al.High-density lipoprotein particle subclass heterogeneity and incident coronary heart disease[J].Circ Cardiovasc Qual Outcomes,2014,7(1):55-63.

[3]Stitziel NO,Peloso GM,Auer PL,et al.Association of low-frequency and rare coding-sequence variants with blood lipids and coronary heart disease in 56 000 whites and blacks[J].Am J Hum Genet,2014,94(2):223-232.

[4]Espinola-Klein C,Savvidis S,Kopp H.Peripheral artery disease as supplemental diagnosis in coronary heart disease-Influence on diagnostics,treatment and prognosis[J].Dtsch Med Wochenschr，2014,139(S1):40-42.

[5]Jelinek MV,Santamaria JD,Best JD,et al.Reversing social disadvantage in secondary prevention of coronary heart disease[J].Int J Cardiol,2014,171(3):346-350.

[6]Van Kempen BJH,Ferket SB,Kavousi M,et al.Performance of Framingham cardiovascular disease(CVD) predictions in the rotterdam study taking into account competing risks and disentangling CVD into coronary heart disease(CHD) and stroke[J].Int J Cardiol,2014,171(3):413-418.

[7]雷玉艷,張晨,汪幸思,等.新疆維、哈兩民族載脂蛋白E等位基因多態(tài)性與冠心病關(guān)聯(lián)性研究[J].中國免疫學雜志,2012,28(9):807-809.

[8]劉金鳳,馬洪勝,李峰.ApoE基因多態(tài)性與脂質(zhì)代謝的相關(guān)性[J].中國老年學雜志,2012,32(9):1802-1804.

[9]黃躍斌,何印蕾.ApoE基因多態(tài)性、hs-CRP與冠心病的相關(guān)性研究[J].中國老年學雜志,2009,29(22):2864-2866.

[10]章蓓蓓,何鳳屏,徐新.載脂蛋白E的基因多態(tài)性與冠心病關(guān)系的研究進展[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2009,30(2):144-146.

[11]張潔.辛伐他汀聯(lián)合阿托伐他汀鈣片治療高血脂合并冠心病效果觀察[J].湖南中醫(yī)藥大學學報,2013,33(12):23.

[12]許力壯,單愛軍,劉海華,等.不同劑量阿托伐他汀對冠心病患者冠脈搭橋術(shù)后血脂和心功能的影響[J].中國老年學雜志,2013,33(23):5789-5791.

[13]楊彥平,劉文慧.阿托伐他汀鈣輔治冠心病36例療效觀察[J].臨床合理用藥雜志,2013,6(28):39-40

[14]許允,石聯(lián)鳳,江慶,等.阿托伐他汀對老年血脂正常冠心病患者治療療效及預(yù)后影響[J].臨床醫(yī)學工程,2013,20(3):310-311.

Clinical study on influence of atorvastatin on blood lipid regulation in coronary heart disease patients with different ApoE genotypes*

ZHENGWen-wu1,LIZheng-ye2△,LiXiang3,HUANGLi2，JIANGCan1，LIUPan1，HUANGDong-mei1,LIUQian1

(1.DepartmentofCardiology,AffiliatedHospitalofLuzhouMedicalCollege,Luzhou,Sichuan646000,China;2.DepartmentofCardiology,XuyongCountyPeople′sHospital,Luzhou,Sichuan646400,China;3.DepartmentofCardiology,LuzhouMunicipalPeople′sHospital,Luzhou,Sichuan646000,China)

Objective To observe ApoE genotypes in the patients with coronary heart disease(CHD) by using the PCR-RFLP technique,to observe the impact of atorvastatin on blood lipid regulation in the patients with different ApoE genes,and to investigate the pathogenesis of CHD and the influence of atorvastatin on prognosis.Methods 116 patients with CHD in the cardiology department of the Affiliated Hospital of Luzhou Medical College from January to December 2013 were selected as the CHD group,and contemporaneous 50 individuals undergoing physical examination were selected as the healthy control group.The ApoE genotypes were detexcted by using the PCR-RFLP technique.The blood lipid level before atorvastatin treatment and after 12-week treatment was detected.The relation between the genotypes and the lipid regulation effect was analyzed.Results The frequency of ApoE E3/4,E4/4 genotypes and ε4 allele in the CHD group were significantly higher than those in the control group,the differences were statistically significant (P<0.05);the TC and LDL-C levels in the ApoE ε4 allele group were significantly higher than those in the other allele groups,the differences were statistically significant (P<0.05).Compared the ApoE E2/2+E3/2,E3/3 allele group with the E4/3+E4/4 allele group after 12-week atorvastatin treatment,the plasma levels of TC,LDL-C and HDL-C had statistical differences (P<0.05).Conclusion ApoE genotype E3/4,E4/4 as well as ε4 allele might participate in the occurrence and development process of CHD.Atorvastatin has better lipid-lowering effect in the patients with ApoE E2/2+E3/2,E3/3 allele,while has inexact effect in the patients with E4/3+E4/4 allele.

coronary heart disease; ApoE gene; gene polymorphism; atorvastatin; blood lipid

四川省衛(wèi)生和計劃生育委員會基金資助項目(12195)；瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院基金課題(11238)。

鄭文武，男，碩士，副教授，主要從事心血管疾病方面的研究。△

，E-mail:Lzy641207@sohu.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.18.010

A

1672-9455(2015)18-2671-03

2015-04-20

2015-04-25)