GC-ECD及GC-MS法測定祖卡木顆粒及其部分原料藥中20種有機氯農藥殘留量

楊光勇， 葛 婧, 王偉萍

(新疆維吾爾自治區食品藥品檢驗所， 烏魯木齊 830004)

GC-ECD及GC-MS法測定祖卡木顆粒及其部分原料藥中20種有機氯農藥殘留量

楊光勇， 葛 婧, 王偉萍

(新疆維吾爾自治區食品藥品檢驗所， 烏魯木齊 830004)

目的 建立測定維藥祖卡木顆粒及其部分原料藥中20種有機氯農藥殘留的氣相色譜法和氣質聯用法。方法 分別采用乙腈、CARBON/PSA固相萃取柱對祖卡木顆粒及其部分原料藥進行提取和凈化，MS和ECD分別進行檢測，根據色譜保留時間和質荷比信息對樣品進行定性分析，GC-ECD法進行定量分析。以DB-5MS色譜柱對待測組分進行分離，柱溫采用程序升溫方式，柱流量1 mL/min，進樣口溫度230℃，ECD溫度300℃；離子源為EI源，解離電壓70 eV，離子源溫度240℃，傳輸線溫度250℃，四級桿溫度150℃，采用SCAN模式，掃描質荷比范圍m/z 45～400。結果 20種有機氯農藥分離良好(分離度≥1.512)，各組分平均回收率為72.4%～108.9%(n=6)，有機氯類農藥在0.002～0.500μg/mL濃度范圍內呈良好的線性關系(r2≥0.997 1)。結論 該方法簡便、準確且可靠，可以為祖卡木顆粒質量標準的完善提供參考依據。

祖卡木顆粒； 固相萃取；GC-ECD；GS-MS； 農藥殘留

有機氯農藥的化學性質穩定，在環境中降解緩慢，并可通過生物鏈富集在動物和植物體內，危害較大。我國已于20世紀80年代禁止使用有機氯農藥，但至今仍能在水域、土壤、生物體內檢出。祖卡木顆粒是由山柰、睡蓮花、破布木果、薄荷、大棗、洋甘菊、甘草、蜀葵子、大黃、罌粟殼10味中藥制成的顆粒劑，適用于感冒咳嗽、咽喉腫痛等癥狀[1]。其采用的多種植物器官性藥材在種植過程中可能會吸收農藥并有殘留，但目前未見相關研究報道。殘留農藥的提取和凈化方式主要有超臨界流體萃取[2-3]、固相萃取[4-5]、微波輔助提取[6-7]、免疫親和色譜等技術[8-9]，GC-ECD法對于痕量級的有機氯農藥殘留檢測具有靈敏度高和精密度好的優勢[10-12]。本研究分別采用乙腈、CARBON/PSA固相萃取柱對樣品進行提取和凈化，采用GC-MS法對樣品各組分進行定性分析，再以GC-ECD法進行定量分析，首次對祖卡木顆粒及其部分原料藥中的20種有機氯農藥殘留進行了分離分析，旨在為祖卡木顆粒質量標準的完善提供參考依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器GC-2010Plus氣相色譜儀(日本島津公司)，QP-2010Plus氣相色譜-質譜聯用儀(日本島津公司)，超聲波振蕩器(上?？茖С晝x器有限公司)，旋轉蒸發儀(日本東京理化器械公司)，METTLER AE200S電子天平(德國梅特勒-托利多公司)，固相萃取裝置(美國安捷倫公司)，固相萃取CARBON/PSA小柱(Waters公司)。

1.2 試藥祖卡木顆粒、山柰、睡蓮花、大棗、洋甘菊、甘草均由某生產廠家提供。農藥殘留標準品：艾氏劑、狄氏劑、順氯丹、反氯丹、P,P′-DDE、P,P′-DDD、O,P′-DDT、P,P′-DDT、異狄氏劑、七氯、環氧七氯、六氯代苯、α-BHC、β-BHC、δ-BHC、林丹、五氯硝苯(購自農業部環境保護科研監測所，濃度均為100 μg/mL)，五氯苯胺(100 μg/mL)、甲基五氯苯硫醚(100 μg/mL)和氧氯丹(100 μg/mL)購自德國。乙腈(Fisher公司)為色譜純，正己烷(Honeywell Burdick & Jackson公司)、甲苯(Merck-Millipore公司)均為農藥殘留級。

2 方法與結果

2.1 儀器條件

2.1.1 氣相色譜條件 以DB-5MS(30 m×0.25 mm,0.25 μm)彈性石英毛細管色譜柱對待測組分進行分離；采用程序升溫方式，柱溫程序為：100℃維持1 min，10℃/min升至220℃維持5 min，8℃/min升至250℃維持3 min，30℃/min升至290℃維持11 min；柱流量1 mL/min；進樣口溫度230℃，進樣量1 μL，分流比10；ECD溫度300℃。

2.1.2 質譜條件 電離方式：離子源為EI源，解離電壓為70 eV，離子源溫度為240℃，傳輸線溫度250℃ ，四級桿溫度150℃，SCAN模式，掃描m/z范圍為45～400。

2.2 供試品溶液制備精密稱取經研磨(祖卡木顆粒)或粉碎(藥材)并過3號篩(50目)的供試品5 g，置于25 mL容量瓶中，加入20 mL乙腈，超聲提取20 min，過濾，收集濾液；再加20 mL乙腈，重復上述操作，合并2次收集的濾液，置旋轉蒸發儀上，30℃蒸發至約5 mL。取上述濃縮液置于CARBON/PSA 凈化管中，收集流出液，并用45 mL乙腈∶甲苯(3∶1)洗脫，收集并合并流出液，30℃旋轉蒸發至近干，用正己烷溶解至5 mL，即為供試品溶液。

2.3 標準品溶液的測定及系統適用性

2.3.1 GC-ECD測定結果 取各農藥殘留混合對照溶液1 μL注入氣相色譜儀，結果顯示各峰分離度均≥1.512，理論塔板數≥479 366，色譜圖見圖1。

圖1 標準品的GC-ECD色譜圖

(1：α-BHC；2：六氯代苯；3：β-BHC；4：林丹；5：五氯硝苯；6：δ-BHC；7：五氯苯胺；8：七氯；9：甲基五氯苯硫醚；10：艾氏劑；11：氧氯丹；12：環氧七氯；13：反氯丹；14：順氯丹；15：P,P′-DDE；16：狄氏劑；17：異狄試劑；18：P,P′-DDD；19：O,P′-DDT；20：P,P′-DDT)

2.3.2 GC-MS測定結果 取各農藥殘留混合對照溶液1 μL注入氣質聯用儀，在既定的色譜質譜條件下進行掃描，根據保留時間對各組分進行分析，分別選取2～3個質荷比離子進行定性分析，見圖2、表1。

圖2 標準品的TIC圖

2.4 線性范圍分別吸取上述有機氯農藥標準溶液1 mL置于100 mL容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，作為標準溶液儲備液；分別吸取標準溶液儲備溶液0.1、0.2、0.5、5、10、25 mL置于50 mL容量瓶中，正己烷稀釋至刻度，作為標準曲線梯度溶液，濃度分別為0.002、0.004、0.01、0.1、0.2、0.5 μg/mL。分別取各梯度濃度的對照品溶液1 μL注入氣相色譜儀，記錄實驗結果。以濃度(C)為橫坐標，相應的峰面積(A)為縱坐標，計算回歸方程。結果表明：有機氯類農藥在0.002～0.500μg/mL濃度范圍內呈良好的線性關系(r2≥0.997 1)。各組分回歸方程及R2值見表1。

2.5 回收率試驗稱取樣品細粉6份，每份1g，精密稱定，置25mL量瓶中，分別精密加入0.5μg/mL的標準品溶液1mL，按上述供試品溶液制備方法和測定條件測定含量，各組分的平均回收率見表1。

表1 各組分保留時間、線性回歸方程及回收率

2.6 樣品測定結果精密量取制備好的祖卡木顆粒及藥材溶液1μL注入氣質聯用儀，分別根據色譜保留時間和質荷比信息對樣品中各色譜峰進行定性分析。排除假陽性干擾后，再精密量取陽性檢出的樣品溶液1μL注入氣相色譜儀，根據峰面積以標準曲線法計算各殘留農藥的含量，結果見表2。

表2 供試品中農殘含量測定結果/(μg/kg)

3 結論

本研究分別考查了DB-5MS型、DB-624型、RTX-3型等不同型號色譜柱在不同色譜柱溫下對待測組分的分離能力，最終確定上述色譜條件。同時考查了不同超聲提取時間、不同洗脫液組成比例以及不同洗脫體積對待測組分含量的影響。建立了氣相色譜法及氣質聯用法同時檢測祖卡木顆粒及所含部分藥材中20種有機氯農藥殘留的方法，該方法簡便，可操作性強，在實現準確定量的同時，有效排除了假陽性的干擾，各組分分離良好，極大地簡化了操作過程，節約成本，有望為相關質量標準的完善提供技術支持。

[1] 衛生部藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準維吾爾藥分冊[S].烏魯木齊:新疆科技衛生出版社,1998:175.

[2] 戴建昌,張興,段苓.超臨界萃取技術在農藥殘留分析中的應用研究進展[J].農藥學學報, 2002,4(3):6-11.

[3] 薄爾琳,于基成,曹遠銀.超臨界流體萃取技術在農藥殘留分析中的應用[J].安徽農科學, 2006,34(15):3743-3746.

[4] 觀文娜,劉文民,趙景紅,等.固相萃取技術及其在農殘和有機污染物方面的應用[J].現代科學儀器,2007,17(1):11-13.

[5] 姚青.分散固相萃取-氣相色譜法同時測定黃瓜中的多種農藥殘留[J].質量技術監督研究,2011,15(3):29-31.

[6] 吳金浩,李愛,劉桂英.微波輔助萃取-氣相色譜法檢測裙帶菜中的多氯聯苯和有機氯農藥殘留[J].環境化學,2013,32(1):156-161.

[7] 張本山,于淑娟,曾新安,等.微波萃取氣相色譜法測定淀粉中14種有機氯農藥殘留[J].分析測試學報,2011,30(3):344-348.

[8] 韋林洪,劉曙照,邵秀金,等.綠磺隆克百威三唑磷多抗體免疫親和色譜技術研究[J].農業環境科學學報,2009,28(10):2211-2216.

[9] 劉曙照,韋林洪,徐維娜.克百威的免疫親和色譜分析研究[J].色譜,2005,23(2):134-137.

[10] 郭青,鄧鳴,寧青,等.采用GC-ECD和GC-MS分別測定并比較甘草鋅顆粒及復心片中二十種有機氯農藥殘留量[J].中成藥,2008,11(30):1624-1628.

[11] 粟華生,邱莉,周堅,等.SPE-GC-ECD法測定人參藥材中21種有機氯農藥殘留量[J].藥物分析雜志,2010,30(8):1484-1492.

[12] 張權,陳文生,洪亮,等.MSPD-GPC凈化GC-ECD法測定辣椒醬中8種有機氯農藥殘留分析[J].食品科學,2014,35(8):295-298.

(本文編輯 施洋)

Determination of twenty organochlorine pesticide residues in Zukamu Granules and part of its crude drug by GC-ECD and GC-MS

YANG Guangyong，GE Jing，WANG Weiping

(InstitutionforFoodandDrugControlXinjiangUyghurAutonomousRegion，Urumqi830004，China)

Objective To establish a method for determination of 20 organochlorine pesticide residues in Zukamu Granules and part of its crude drug. Methods Acetonitrile and CARBON/PSA SPE were used to extract and purify Zukamu Granules and part of its crude drug, ECD and MS were introduced as the detections respectively, the column DB-5MS was used for the separations of target pesticides, column flow was at 1 mL/min， the inlet was set at 230℃ and ECD at 300℃， ion source was EI，electron energy was at 70eV, and the source temperature was set at 240℃, transfer line and quadrupole were set at 250℃ and 150℃, scan mode was used, the range is m/z 45～400. Results 20 organochlorine pesticide were separated well by this method (Resolution ≥1.512), the recovery rate was at the range of 72.4%～108.9%, there were good linear relationships between the peak area and concentration at the range of 0.002～0.500 μg/mL (R2≥0.997 1)． Conclusion The method is simple, accurate reliable, and can provide reference basis for improving quality standard of Zukamu Granules．

Zukamu Granules； SPE； GC-ECD； GC-MS； pesticide residues

國家藥品(維藥)標準提高研究課題項目(793)

楊光勇(1983-)，男，本科，藥師，研究方向：藥品與食品理化檢驗。

R

A

1009-5551(2015)12-1500-04

10.3969/j.issn.1009-5551.2015.12.011

2015-3-12]