牛奶中微量硫氰酸鈉含量的檢測

李富蘭

（四川理工學院 材料與化學工程學院，四川 自貢，643000）

牛奶營養豐富，易消化吸收，是人們日常生活中不可缺少的食品之一。所以牛奶品質的檢驗對于人們的生活具有極大的意義。牛乳中因含有豐富的蛋白質，為微生物提供了良好的生長環境，極易腐敗變質。在牛乳中摻入硫氰酸鈉后可有效抑菌、保鮮及延長牛乳的保存期。目前，我國衛生部在食品安全方面的工作力度逐漸加大，2008年12月衛生部發布的《食品中可能違法添加的非食用物質和易濫用的食品添加劑品種名單（第一批）》中明確規定乳及乳制品中的硫氰酸鈉屬于違法添加物質[1－2]。

硫氰酸鈉的毒性主要由其在人體內釋放的氰根離子引起。氰根離子在體內能很快與細胞色素氧化酶中的三價鐵離子結合，抑制該酶的活性使組織不能利用氧而導致人昏迷。另外有報道稱，由于硫氰酸鹽在人體內代謝可形成硫氰酸，可干擾人的甲狀腺功能，導致非缺碘性甲狀腺腫，影響人體正常生理代謝[3]。

對于硫氰酸鹽測定方法的研究已有很多的報道[4－7]，如毛細管電泳法、高效液相色譜法、離子色譜法等。而分光光度法因其靈敏、精確、快速和簡便的工作特點，使其在復雜組分系統中，不需要分離，就可以檢測出其中所含的極少量物質，因此它應用于實際生活中的各個領域。為快速、簡便的測定牛奶中硫氰酸，保證牛奶的質量，試驗利用硫氰酸鈉與三價鐵反應生成硫氰酸鐵絡合離子，使溶液呈血紅色來進行測量，并對牛奶中可能存在的干擾元素進行干擾測定，確定有無干擾；最后對樣品進行分析以及回收率測定。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器與試劑

牛奶樣品：市售牛奶。

紫外－可見分光光度計（上海美譜達儀器有限公司），AR1140型電子分析天平（梅特勒.托利多儀器上海有限公司），電熱鼓風干燥箱DHG－9075A（上海和羽良電子科技有限公司），精密酸度計PHS－3VCA 型（上海大普儀器有限公司），電熱恒溫水浴鍋DK－98－1型（天津市泰斯特儀器有限公司），玻璃儀器 若 干、鹽 酸 硫 酸 鐵 銨 （NH4Fe（SO4）2·12H2O），雙氧水（H2O2），三氯乙酸（CCl3COOH），硝酸（HNO3），硫氰酸鈉三氯乙酸標準儲備液：準確稱取10.000 0g三氯乙酸于干凈燒杯中，用蒸餾水溶解定容至1 000mL。

硫酸鐵銨溶液（100μg／mL）：準確稱取硫酸鐵銨0.861 1g，用6mol／L 的鹽酸溶液溶解，再用蒸餾水定容至至1 000 mL。硫氰酸鈉儲備液（1 000μg／mL）：準確稱取硫氰酸鈉1.418 0g，用蒸餾水溶解并定容至1 000mL

硫氰酸鈉標準溶液（100μg／mL）：用移液管吸取10.00mL硫氰酸鈉儲備液于100mL容量瓶中，用蒸餾水定容至100mL。所用化學試劑均為分析純，水為二次蒸餾水。

1.2 最佳條件的選擇

1.2.1 測定波長 準確移取100μg／mL硫氰酸鈉標準液0mL和1.0 mL 于25 mL 比色管中，加入1.0mL 硝酸和1.0 mL 硫酸鐵 銨標 準液，振蕩搖勻，用蒸餾水定容至25mL。以試劑空白作參比，用1cm 比色皿，在400～600nm 下掃描其吸收曲線，確定的硫氰酸鐵最大吸收波長。

1.2.2 硝酸用量 準確移取0.50mL硫氰酸鈉標準溶液，分別加入0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80mL、1.00 mL、1.20 mL、1.40 mL、1.60 mL、1.80mL和2.00mL 的硝酸，加入1.0mL 硫酸鐵銨標準液，振蕩搖勻，用蒸餾水定容至25mL。以試劑空白作參比，用1cm 比色皿，最大吸收波長下測定吸光度，確定硝酸的最佳用量。

1.2.3 硫酸鐵銨用量 準確移取0.50mL硫氰酸鈉標準溶液，加入1.0mL硝酸，分別加入硫酸鐵銨0.30mL、0.50 mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00 mL、3.00 mL 和4.00 mL，振蕩搖勻，用蒸餾水定容至25mL。以試劑空白作參比，用1cm 比色皿，在最大吸收波長下測定吸光度，確定顯色劑的最佳用量。

1.3 校正曲線和精密度試驗

在7支25mL的容量瓶中分別加入100mg／L硫氰酸鈉標準溶液0.00 mL、0.50 mL、1.00 mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL和3.00mL，加入最佳硝酸用量和最佳顯色劑用量，振蕩搖勻，用蒸餾水定容至25mL。以試劑空白作參比，用1cm 比色皿，在最大吸收波長下測定吸光度，以硫氰酸鈉濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線。稱取樣品7份，在最佳條件下進行檢測，根據標準曲線可得試樣中的硫氰酸鈉含量。并計算相對偏差RSD。

1.4 牛奶中硫氰酸鹽的測定

吸取牛奶20.0mL 于100mL 錐形瓶中，加入約60.0mL三氯乙酸溶液，充分搖蕩使樣品分散完全。加入過氧化氫溶液1.0 mL，在60℃水浴放置5min，冷卻后轉入100 mL 容量瓶中，用三氯乙酸溶液定容到刻度，振蕩搖勻過濾，濾液待用。

準確移取濾液10.0mL于兩支比色管中，加入1.0mL 硝酸，再加入1.0mL 硫酸鐵銨標準溶液，振蕩搖勻，用蒸餾水定容至25mL，按試驗方法測定吸光度，通過標準工作曲線求出樣品濃度。

2 結果與分析

2.1 絡合物的吸收光譜曲線

由圖1可知，隨著檢測波長的增大，絡合物的吸光度也隨之變大，在462nm 處有最大吸收，故選其為試驗的測定波長。

圖1 硫氰酸鐵絡合物在不同波長的吸光度Fig.1 Absorbance of ferric thiocyanate complex at different wavelength

2.2 不同HNO3和顯色劑用量的吸光度

由圖2可知，HNO3加入量為1.0～1.5吸光度較高，在1.0mL左右的吸光度最大，故試驗添加硝酸1.0 mL 為宜。由圖2 還可知，顯色劑用量在1.0～2.0mL的吸光度平穩，當硫酸鐵銨為1.5mL時，吸光度為0.163，繼續增加其用量，吸光度變化不大，綜合考慮選擇硫酸鐵銨用量為1.5mL。

圖2 HNO3和顯色劑不同用量的吸光度Fig.2 Absorbance of different amount of HNO3 and crystal violet

2.3 校正曲線和精密度

以硫氰酸鈉濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線，其線性回歸方程為A＝0.274 3x＋0.001 9，線性相關系數R＝0.999 8。稱取樣品7份，在最佳條件下進行檢測，其相對標準偏差RSD＝2.38%＜5%，表明該方法重現性較好。

2.4 樣品的測定

按試驗最佳方法測定市售牛奶中的微量硫氰酸鈉，測得硫氰酸鈉的濃度為0.83μg／mL。

在最佳的操作條件下，采用標準加入法測定牛奶樣品中硫氰酸鈉含量，按試驗方法操作，平行測定5 次。從表中可知，該方法的加標回收率為99.0%～101.8%，表明該方法準確度高，可滿足分析需要。

表 分光光度法測定牛奶中硫氰酸鈉的回收率Table Recovery rates of sodium thiocyanate in milk measured by spectrophotometric method

3 結論

試驗研究了分光光度法測定硫氰酸鈉的方法，研究了測量波長、酸度、顯色劑加入量等對測量結果的影響。結果表明，在硝酸用量為1.0 mL（pH 為5.5）的介質中，硫氰酸鈉與三價鐵反應，生成紅棕色絡合物。該絡合物在462nm 具有最大吸光度，該分光光度法測定精度高且快速準確。

[1]劉 園，鄒 潔.乳品中硫氰酸鹽的來源及其風險分析[J].乳業科學與技術，2013（4）：36－38

[2]謝一平，梁晨曦.淺談食品添加劑與人體健康[J].中國食品工業，2009（7）：52.

[3]顧 欣，黃士新，李丹妮，等.乳中硫氰酸鈉對人類健康的風險評估[J].中國獸藥雜志，2010，44（9）：45－49.

[4]王丹慧，高 娃，李 梅.原料乳中硫氰酸鈉摻假定性檢測方法[J].中國乳品工業，2008，36（7）：57－58.

[5]何書美，陳曉燕.硫氰化物測定法進展[J].河北師范大學學報：自然科學版，1999，23（3）：388－391

[6]李衛群，單勝艷，朱 慧.分光光度法測定乳與乳制品中硫氰酸鈉的含量[J].中國食品添加劑，2010（3）：103－104.

[7]吳劍平，顧 欣，李丹妮，等.毛細管電泳法檢測牛奶中硫氰酸鈉質量濃度[J].中國乳品工業，2012（3）：53－56.