偽狂犬基因缺失疫苗滴鼻免疫對商品豬群gE抗體的影響

祖海濤　朱連德（勃林格殷格翰動物保健（中國）有限公司，北京100027）

豬病防控

偽狂犬基因缺失疫苗滴鼻免疫對商品豬群gE抗體的影響

祖海濤朱連德
（勃林格殷格翰動物保健（中國）有限公司，北京100027）

摘要：偽狂犬病是嚴重危害規模化養豬的重要疾病之一。豬只一旦感染偽狂犬病毒，將會終身帶毒，成為豬場的隱患。通過本次試驗可以發現，如果使用合適的疫苗，并按照正確的操作方法，滴鼻免疫偽狂犬gE基因缺失疫苗，可以有效阻止野毒對商品豬群的感染，降低商品豬群的野毒陽性率。

關鍵詞：豬偽狂犬病；滴鼻免疫；gE基因缺失疫苗

豬偽狂犬病是由皰疹病毒I型豬偽狂犬病毒引起的一種急性傳染病。可導致懷孕母豬流產、產木乃伊胎、弱仔；新生仔豬大批急性死亡，伴有嘔吐、腹瀉及發抖、震顫和運動失調等神經癥狀；中大豬發生呼吸道疾病，并繼發嚴重的細菌感染；導致豬只免疫抑制，對其他疫病的易感性增加。

豬偽狂犬病是危害養豬業最嚴重的傳染病之一，給養豬業造成了巨大的經濟損失。西方發達國家在九十年代相繼制定和啟動了該病的根除計劃，取得了很好的成效。該病在我國廣泛存在并引發巨大損失，2010年以后，我國豬場的偽狂犬野毒陽性率明顯增加，我國一些省區和部分高級別大型豬場正積極啟動豬偽狂犬病根除計劃。

由于豬一旦感染偽狂犬病毒，將會終生帶毒，所以感染豬就像一顆定時炸彈，隨時都有可能向外界排毒，使周圍的易感豬感染發病。在一些飼養管理條件較差的豬場，就會造成豬偽狂犬病的持續反復流行，使商品豬的成活率維持在較低水平，而呼吸道病的發病率維持在較高水平。因此在偽狂犬病病毒陽性場選擇一種既可以避免母源抗體的干擾又能預防偽狂犬病毒潛伏感染的免疫程序是大家追求的目標。為此，我們在種豬企業內進行了偽狂犬gE基因缺失疫苗滴鼻免疫試驗，現報告有關試驗結果供大家參考。

1材料和方法

1.1豬場的選擇

某規模化種豬企業，共有5個豬場，每個豬場獨立運營、生產，對其中兩個豬場（豬場1、豬場2，均為偽狂犬野毒陽性豬場）做有關豬偽狂犬gE基因缺失疫苗的滴鼻免疫試驗。

豬場1現存欄經產母豬600頭，主要飼養純種大白、杜洛克。單點式飼養管理，自繁自養，全進全出。仔豬在21日齡斷奶，斷奶當天轉入保育舍，70日齡從保育舍轉入育肥舍。隨機抽取50頭母豬，采樣檢測結果顯示偽狂犬gE抗體陽性豬有50頭，偽狂犬野毒抗體陽性率達100%。豬場遠離養殖高密度區，自然防疫條件較好。

豬場2現存欄經產母豬1 000頭，主要飼養純種大白、長白、杜洛克。飼養模式和豬場1相同，隨機抽取50頭母豬，采樣檢測結果顯示偽狂犬gE抗體陽性豬有38頭，偽狂犬野毒抗體陽性率達76%。

兩個豬場主要疫苗的免疫程序相同。其中母豬：高致病性藍耳病活疫苗（JX株）在空懷期跟胎免疫；豬瘟高效細胞疫苗普免，3次/年；某國產豬偽狂犬弱毒疫苗普免，4次/年。仔豬：14日齡免疫高致病性藍耳病活疫苗（JX株）；28日齡、63日齡免疫豬瘟高效細胞疫苗；55日齡、90日齡免疫豬偽狂犬基因缺失疫苗（Bartha-K61株，某國產公司）。

1.2分組和采樣方案

在豬場1中將同一單元產房的豬群隨機分為3組，第一組仔豬出生后3天內使用某進口偽狂犬gE基因缺失疫苗滴鼻；第二組仔豬出生后3天內使用某國產偽狂犬gE基因缺失疫苗滴鼻；第三組仔豬出生后不做滴鼻免疫，作為對照組。仔豬轉入保育舍、轉入育肥舍時均按照一對一轉欄，并保證3組豬群飼養環境相同。仔豬在50日齡、90日齡均肌肉注射免疫某國產偽狂犬gE基因缺失疫苗，母豬也注射免疫該國產偽狂犬gE基因缺失疫苗，所用疫苗均為Bartha-K61株。

試驗過程中，抽取55日齡、85日齡、145日齡豬群血液，分離血清，送合作實驗室檢測。

在豬場2中，按照同樣的試驗設計做重復試驗。

1.3 gE-ELISA操作方法

檢測試劑盒均為美國IDEXX公司生產，操作方法以及結果判定參照試劑盒說明書進行。S/N值≤0.6時，為陽性(+)；S/N值＞0.7時，為陰性(-)；0.6＜S/N值≤0.7時，為可疑(±)。在進行豬場結果判定和統計時，只要豬場有一個樣品為陽性，則該場判定為偽狂犬病野毒陽性場。

2結果

豬偽狂犬gE抗體檢測結果詳見表1、表2、圖1、圖2。

圖1豬場1 gE抗體檢測結果

gE抗體陽性率

對檢測結果進行詳細對比，發現在母豬、商品豬群按照相同的免疫程序肌肉注射相同的偽狂犬疫苗情況下，如果增加滴鼻免疫，可降低商品豬群偽狂犬gE抗體陽性率。與對照組及滴鼻免疫國產偽狂犬疫苗組相比，使用某進口偽狂犬疫苗滴鼻免疫后，商品豬群的gE抗體陽性率最低。重復試驗也均驗證了試驗的結果。

3討論

近年來，由于生豬引種、頻繁調運以及其他疾病的暴發，給豬偽狂犬病的控制帶來了一定困難，加上引種時的隔離檢疫措施抓得不嚴，豬偽狂犬病病毒的變異等導致豬偽狂犬病的傳播很快。據有關資料統計，該病已在某些地區的一些規模化豬場流行，種豬的gE抗體陽性率達30%～60%，有的甚至超過90%；某些豬場的仔豬死亡率相當高，給生產造成巨大的經濟損失。從該病流行的特點分析，豬群健康帶毒的情況尤其值得重視，雖然經過免疫接種，但健康帶毒的豬只仍可排毒，并引發下一輪感染，且難以清除病原，偽狂犬病毒的隱性感染是造成此現象的主要原因之一。病毒感染后，可在豬的神經系統中定植，造成豬只的終生潛伏感染。當豬只處于應激狀況下，潛伏感染的偽狂犬病病毒會被激活，病毒大量復制，并導致豬只發病。

表1豬場1 gE抗體檢測結果

表2豬場2 gE抗體檢測結果

在控制豬偽狂犬病病毒的潛伏感染時，滴鼻免疫高質量的豬偽狂犬弱毒疫苗是最有效的防制方法之一。仔豬在出生后3日齡內滴鼻免疫豬偽狂犬弱毒疫苗，2小時即可建立起豬只的黏膜免疫，保護豬只不受偽狂犬野毒的感染。同時，疫苗毒通過鼻黏膜在豬只的神經系統尤其在三叉神經節中占位，阻止野毒感染后進入神經系統，從而起到預防豬只潛伏感染的目的。

滴鼻免疫在豬場凈化偽狂犬野毒方面有著重要作用。據《豬病學》描述，母源抗體保護和基因缺失疫苗的應用，增加了感染所需病毒的劑量，但是不能有效阻止偽狂犬野毒在豬體內的脫衣殼和潛伏感染。可見，凈化野毒的第一步，也是最重要的一步就是制止入侵，而滴鼻免疫是制止入侵的最佳手段之一。滴鼻免疫不受母源抗體干擾，刺激機體的黏膜免疫系統產生保護力。因為母源抗體主要游離于組織液、血清、淋巴液中，在黏膜表面只存在少量的分泌性抗體IgA，這些抗體中和不了疫苗毒，不會影響疫苗發揮作用。

滴鼻免疫時，疫苗需要滿足以下幾個方面的要求，否則會對疫苗滴鼻免疫效果產生不良影響。

⑴疫苗的佐劑類型：油性佐劑的偽狂犬疫苗會嚴重影響仔豬滴鼻免疫的效果；

⑵毒株的類型：豬偽狂犬疫苗的TK基因是嗜神經基因，如果TK基因缺失，會影響疫苗毒在神經系統內的占位能力，從而影響滴鼻免疫的效果，不能有效阻止野毒在神經系統內的占位潛伏感染；

⑶滴鼻免疫的方法：專用稀釋液稀釋疫苗后，使用專用滴鼻頭，用連續注射器滴鼻，保證在足夠的壓力下疫苗均勻噴灑在仔豬鼻黏膜內；

⑷環境的穩定性：滴鼻免疫時，疫苗需均勻噴灑在鼻黏膜上，所以疫苗對環境的穩定性有較高的要求。

通過上述試驗可以得出：在豬偽狂犬野毒陽性豬場內，使用高質量的豬偽狂犬弱毒疫苗滴鼻免疫，可以減輕商品豬群偽狂犬病毒的感染壓力，降低感染比例，推遲野毒感染時間。

中圖分類號：S858.28

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4645(2015)12-0047-03

收稿日期：2015-08-26