HPLC 法測定蒙藥材鐵桿蒿不同部位中綠原酸的含量

佟皎薇 李佳林

(內蒙古自治區人民醫院，內蒙古 呼和浩特 010017)

本品系民族醫習用藥材，蒙古名哈日沙布嘎，為菊科植物鐵桿蒿Artemisia sacrorum Ledeb.別名萬年蒿，在民族醫藥及民間中應用廣泛。鐵桿蒿全株能入藥。蒙醫為殺粘蟲，燥協日烏素，解痙，消腫止痛［1］;中醫為清熱解毒，涼血止痛。藥理研究表明，具有抗腫瘤、抗氧化、保肝利膽作用［2］。綠原酸可作為藥材質量控制成分之一。

1 儀器與試劑

1.1 儀器：1100 型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)，TJ-912 型色譜分析平臺(太極計算機公司)。

1.2 試藥：綠原酸對照品由中國藥品生物制品檢定所提供;乙腈為色譜純;其他均為分析純試劑;水為純化水;鐵桿蒿自采(2013年8月底內蒙古呼和浩特市大青山壩口村)。

2 實驗方法與結果

2.1 色譜條件：色譜柱Kromasi -C18 (4.6mm×200mm，5μm)，流動相乙腈-3mL·L-1磷酸溶液(12 ︰88)，波長328nm，進樣10μL。在此條件下樣品中綠原酸與其它組分有較好的分離，見圖1。

2.2 對照品溶液的制備及線性關系考察：精密稱取干燥至恒質量的綠原酸對照品適量，置棕色量瓶中，甲醇溶解，配制成1mL 含0.28 mg 綠原酸溶液，作為對照品溶液。分別精密量取綠原酸對照品溶液0.25，0.5，1，2，3，4 和5mL，置于10mL 量瓶內，用甲醇稀釋至刻度，按上述色譜條件進行測定。結果，在7 ～140μg·mL-1濃度范圍內以峰面積(A)與對照品質量濃度(C)進行回歸，其線性關系良好。回歸方程：A=5452.5 +7008.4 C，r=0.999。

2.3 供試品溶液的制備：取本品根、莖、花葉與地上部位，粉碎，過100 目篩，精密稱定70mg，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10mL，稱質量，超聲處理50min ，放冷，稱重，用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過，取續濾液備用，即得。

2.4 穩定性實驗：取同一份供試品溶液，分別在0，1，2，4h進樣測定，以綠原酸峰面積值計算RSD =0.19%。結果表明，供試品溶液在4h 內穩定。

2.5 精密度實驗及重復性實驗：吸取同一批供試品溶液，在上述色譜條件下重復進樣6 次，測得綠原酸峰面積RSD=0.13%。取同批藥材地下部位按2.3 項下平行制備6 份樣品溶液，并按2.1 項下測定，綠原酸的平均含量=0.35%，RSD=0.54%。

2.6 加樣回收率實驗：取同批藥材地上部位已知含量的樣品6 份，每份取約30mg，精密稱定，依次精密加入分別加入0.1mL(每mL 含綠原酸4.20 mg)對照品溶液，揮去溶劑，按供試品溶液的制備操作，測定含量，計算回收率。綠原酸平均回收率為103.6%，RSD=3.31%。

2.7 樣品測定：取鐵桿蒿藥材不同部位，按2.3 項下方法制備供試品溶液，按擬定的色譜條件測定綠原酸含量，結果根部0.260%，莖枝0.422%，花葉0.222%，平均含量0.301%。

3 小 結

我區是鐵桿蒿主要產地，目前尚無含量測定標準。其中鐵桿蒿抗氧化與保肝利膽作用與綠原酸藥理作用有一定的聯系，故綠原酸可以作為鐵桿蒿質量評價標準之一。

［1］國家藥典委員會.藥品標準蒙藥分冊［S］.1998，38.

［2］王心喜，金光洙.中藥萬年蒿化學成分及藥理研究進展［J］.中藥材，2010，33(5)：831 -833.