蒙藥紅花中羥基紅花黃色素A 在大鼠體內(nèi)含量變化的實(shí)驗(yàn)研究△

娜仁滿都拉 白梅榮 烏日漢 桂 榮

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

紅花Carthamus tinctorius L 是蒙藥臨床常用的藥材之一。2004年版《中華本草.蒙藥卷》中收載，具有涼血，鎖脈，調(diào)經(jīng)，清肝，強(qiáng)身，止痛，消腫作用［1］。大量資料顯示［2-10］，羥基紅花黃色素A 有良好的抗腦缺血、神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用，抗血小板和抗心肌缺血作用，抗凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集活性，抗炎活性，細(xì)胞保護(hù)活性，抗腫瘤活性。

本實(shí)驗(yàn)通過紅花測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)大鼠血清和肝組織的羥基紅花黃色素A 含量，以期為紅花保肝作用的研究奠定基礎(chǔ)。

1 材 料

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器：LC-20AT日本島津高效液相儀，包括UV檢測(cè)器，二元梯度泵，LC soLusion 色譜工作站;TD4 -I 型離心機(jī)(長(zhǎng)沙);BS 224S 型電子天平(北京賽多利斯儀器有限公司)。

1.2 試劑與藥品：甲醇(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司);磷酸(分析純，天津市天力化學(xué)試劑有限公司);紅花(由內(nèi)蒙古民族大學(xué)提供)。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：雄性SD 種大鼠40 只，體重為200 ±10g ，由長(zhǎng)春市億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，SCKK(吉)-2011 -0004。

2 方 法

2.1 樣品采集：按體重將大鼠隨機(jī)分為10 組，每組6 只，實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水的條件下，按3.87g/kg 灌胃給予大鼠紅花溶液，分別于灌胃后10min，30min，45min，1h，1.5h，2h，3h，4h，8h 以10% 水合氯醛麻醉大鼠，腹主動(dòng)脈取血，3000r/min 離心10min，分離血清，同時(shí)取出肝組織，用生理鹽水沖凈組織表面血跡及內(nèi)容物，拭干，裝入自封袋中，-80℃保存，備測(cè)組織中指標(biāo)性成分。

2.2 血清和組織樣品的處理及其供試品溶液的制備：準(zhǔn)確稱取肝臟重量，按重量(g)：體積(mL)=1：4 的比例加入4倍體積的生理鹽水，冰水浴條件機(jī)械勻漿，3000r/min，離心10 分鐘，取上清液，待測(cè)備用。

分別取空白及10min，30min，45min，1h，1.5h，2h，3h，4h，8h 的含藥血清和肝組織勻漿液各2mL，加甲醇4mL［11］，渦旋混勻30s，10000r/min 的條件下離心10min，取上清液，吹干，殘?jiān)?00μL 甲醇溶解，過0.22μm 微孔濾膜，25μL進(jìn)樣分析。

2.3 色譜條件：色譜柱為VenusiL MP C18 (4.6mm ×300mm，5μm)，柱溫為30℃，流速為1mL/min;進(jìn)樣量25μL，流動(dòng)相為甲醇(A)-0.7%磷酸水溶液(B)，檢測(cè)波長(zhǎng)為390nm。洗脫程序10% ～25%A(0 ～10min)，25% ～40%A(10 ～15min)，40% ～45% A(15 ～20min)，45% ～50%A(20 ～30min)，50% ～55% A(30 ～40min)，55% ～70%A(40 ～60min)，70% ～75% A(60 ～65min)，75% ～85%A(65 ～70min)，80% ～100%A(70 ～75)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 大鼠肝組織中羥基紅花黃色素A 含量分析：肝組織中已檢測(cè)到羥基紅花黃色A。10min 時(shí)最低，3h 時(shí)最高，8h時(shí)也能檢測(cè)到羥基紅花黃色素A，不同時(shí)間的峰面積詳見下表1。

10min 30min 45min 1h 2h 3h 4h 8h峰面積19052 20492 46655 49342 58966 154119 30873 15739時(shí)間

3.2 血清中羥基紅花黃色素A 含量變化分析：血清中已檢測(cè)到羥基紅花黃色A。10min 最低，1h 時(shí)最高，8h 檢測(cè)不到羥基紅花黃色素A，不同時(shí)間的峰面積詳見下表2。

10min 30min 45min 1h 2h 3h 4h 8h峰面積時(shí)間30617 42770 76174 344282 172378 74388 43382 -

4 結(jié)論與討論

紅花具有保肝作用的蒙藥材之一，蒙醫(yī)學(xué)是以三根學(xué)說(赫依、希拉、巴達(dá)干)(近似中醫(yī)的氣、熱、寒)解釋機(jī)體生理和病理現(xiàn)象，而蒙藥是蒙醫(yī)防治疾病的有力武器。大部分蒙藥材來源與中藥材相同。蒙藥主要以蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論和蒙藥藥性理論為指導(dǎo)，在加工制作和用法上具備了蒙藥特色。即蒙藥以十七種效能來補(bǔ)偏救弊，調(diào)整機(jī)體內(nèi)部的“三根”的偏盛和偏衰，可達(dá)到防病、治病和健身的目的。紅花雖然是中蒙藥通用的藥材，但在蒙藥藥性理論和蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論的指導(dǎo)下，在肝臟疾病的治療中發(fā)揮著重要的作用。因而被譽(yù)為“肝臟之好”的美名。大量的臨床資料也均證實(shí)，紅花為君藥的蒙藥復(fù)方制劑是肝臟的急性和慢性疾病的首選藥物。

傳統(tǒng)藥多為口服給藥，給藥后藥物從給藥部位吸收進(jìn)入血液后，有循環(huán)系統(tǒng)運(yùn)送到體內(nèi)各臟器及靶點(diǎn)而達(dá)到藥效目的。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，羥基紅花黃色A 是保肝作用的主要成分之一，有效成分通過血液分布到各臟器或主要靶點(diǎn)，才能發(fā)揮作用并達(dá)到藥效作用。本實(shí)驗(yàn)通過動(dòng)態(tài)觀察羥基紅花黃色素A 在肝組織和血清中含量變化，為設(shè)計(jì)紅花保肝作用的給藥方案及臨床合理用藥提供參考，并為進(jìn)一步系統(tǒng)研究紅花保肝作用藥效物質(zhì)基礎(chǔ)奠定方法和思路。

［1］國家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會(huì).中華本草.蒙藥卷［M］.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2004.

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