高脂模型長爪沙鼠生化指標(biāo)變化

唐菀澤，向 樂，林東子，劉慧明，覃燕梅，丁 航

（1.廣東醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室，廣東東莞523808；2.東莞市慢性病防治院檢驗科，廣東523008）

高脂模型長爪沙鼠生化指標(biāo)變化

唐菀澤1，向 樂1，林東子2，劉慧明1，覃燕梅1，丁 航1

（1.廣東醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室，廣東東莞523808；2.東莞市慢性病防治院檢驗科，廣東523008）

目的 觀察高脂飼料喂養(yǎng)14周的長爪沙鼠生化指標(biāo)變化。方法 選取雄性長爪沙鼠20只，隨機(jī)分為高脂飼料組和對照組，每組10只。對照組喂養(yǎng)普通飼料，高脂飼料組喂養(yǎng)含1.0%膽固醇、20.0%豬油的高脂飼料。14周后頜下靜脈叢采血，檢測血糖（GLU）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等。結(jié)果 高脂飼料組長爪沙鼠血清TC、LDL-C、TG、HDL-C水平[分別為（14.27±2.97）、（4.72±1.94）、（3.04±1.22）、（3.43±0.90）mmol/L]明顯高于對照組[分別為（1.72±0.22）、（0.19±0.09）、（1.53±0.49）、（1.46±0.25）mmol/L]，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。GLU水平[（6.47±0.55）mmol/L]低于對照組[（8.19±1.02）mmol/L]，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 高脂飼料喂養(yǎng)能明顯升高長爪沙鼠血脂水平，導(dǎo)致長爪沙鼠高脂血癥。

疾病模型，動物； 沙鼠亞科； 血清； 實(shí)驗室技術(shù)和方法； 生化指標(biāo)

隨著我國經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，人們生活水平普遍提高，生活方式也發(fā)生了很大改變，飲食習(xí)慣部分轉(zhuǎn)向高脂、高蛋白飲食，高脂血癥發(fā)病率明顯升高，高脂血癥是動脈硬化、高血壓、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（冠心病）和糖尿病等多種心、腦血管疾病非常重要的危險因素。近年來，我國居民死亡的主要原因之一就是以動脈粥樣硬化和冠心病為主的心、腦血管疾病[1]。鑒于高脂動物模型在研究心、腦血管疾病機(jī)制及開發(fā)抗心、腦血管疾病藥物方面的重要作用，故建立穩(wěn)定、可靠、易復(fù)制且與臨床癥狀相似的高脂動物模型顯得尤為必要。長爪沙鼠又稱為蒙古沙鼠（mongolian gerbil），具有獨(dú)特的生物學(xué)特征，是一種多功能性嚙齒類動物，血漿脂質(zhì)代謝和人非常相似，被認(rèn)為是研究人類脂質(zhì)代謝的良好實(shí)驗?zāi)Ｐ蛣游颷2]。本研究選用長爪沙鼠作為實(shí)驗動物，進(jìn)一步改進(jìn)高脂飼料配方，分析高脂飼料喂養(yǎng)后長爪沙鼠血清生化指標(biāo)變化，探索建立高脂血癥模型長爪沙鼠的方法，為研究心、腦血管疾病發(fā)生及發(fā)展機(jī)制和藥物研制提供參考，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗動物 選取清潔級雄性長爪沙鼠（由遵義醫(yī)學(xué)院寄生蟲教研室提供）20只。在廣東醫(yī)學(xué)院動物中心飼養(yǎng)，溫度23～25℃，濕度60.0%，分別給予普通鼠飼料和配方高脂飼料，自由飲水。

1.1.2 主要試劑及儀器設(shè)備 血糖（glucose，GLU）診斷試劑盒（批號：ZCAPRN006）、三酰甘油（triacylglycerol，TG）診斷試劑盒（批號：ZCJUNM004）、總膽固醇（total cholesterol，TC））診斷試劑盒（批號：ZCOCTM011）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）診斷試劑盒（批號：ZCAPRN014）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）診斷試劑盒（批號：ZCMAYN003）、德國Eppendorf公司5417R型高速臺式離心機(jī)、日立7180全自動生化分析儀等。

1.1.3 動物飼料 普通飼料購自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗動物中心，高脂飼料委托廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗動物中心按配方加工制作。飼料配方為79.0%基礎(chǔ)飼料、20.0%豬油、1.0%膽固醇，鈷-60照射滅菌。

1.2 方法

1.2.1 動物分組及標(biāo)本采集 將20只長爪沙鼠隨機(jī)分為高脂飼料組和對照組，每組10只。對照組喂養(yǎng)普通飼料，高脂飼料組喂養(yǎng)高脂飼料。正常自由飲水、進(jìn)食，觀察動物進(jìn)食情況和精神狀態(tài)。14周后用2.0%戊巴比妥鈉33.3 mg/kg腹腔注射麻醉，麻醉起效后參照文獻(xiàn)[3]方法從頜下靜脈叢真空采血，4℃放置30min，4℃、3500r/min離心10 min，收集血清樣品待測。

1.2.2 血清生化指標(biāo)測定 采用日立7180全自動生化分析儀和配套試劑檢測長爪沙鼠GLU、TG、TC、HDL-C、LDL-C等。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以±s表表示，采用單因素方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

高脂飼料組長爪沙鼠血清TC水平達(dá)（14.27±2.97）mmol/L，LDL-C水平達(dá)（4.72±1.94）mmol/L，TG、HDL-C水平也明顯升高，與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。GLU水平低于對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組長爪沙鼠GLU及血脂水平比較（±s表，mmol/L）

表1 兩組長爪沙鼠GLU及血脂水平比較（±s表，mmol/L）

注：與對照組比較，aP＜0.01。

組別對照組高脂飼料組n GLU TC TG HDL-C LDL-C 10 10 8.19±1.02 6.47±0.55 1.72±0.22 14.27±2.97a1.53±0.49 3.04±1.22a1.46±0.25 3.43±0.90a0.19±0.09 4.72±1.94a

3 討 論

高脂血癥是血清TG、TC、LDL-C水平升高和HDL-C水平降低的一種代謝異常疾病，通常伴動脈硬化、冠心病、高血壓、糖尿病等心、腦血管疾病[4]。心、腦血管疾病發(fā)生的前期病理基礎(chǔ)是動脈粥樣硬化[5]，而引起動脈粥樣硬化的重要危險因素是脂質(zhì)代謝紊亂[6]，所以，建立接近人類脂質(zhì)代謝異常的高脂動物模型對研究動脈粥樣硬化，了解心、腦血管疾病發(fā)生及發(fā)展機(jī)制，開發(fā)抗動脈粥樣硬化藥物具有重要意義。目前，已有的研究表明，不同種類高脂血癥動物模型表現(xiàn)出不同GLU、血脂水平異常[7-8]。有關(guān)長爪沙鼠高脂模型的建立已有不同的文獻(xiàn)報道，其主要區(qū)別在于選用不同配方的高脂飼料喂養(yǎng)，有研究選用含1.0%膽固醇、0.5%膽鹽、7.0%豬油、10.0%蛋黃粉的飼料喂養(yǎng)長爪沙鼠15 d后測定TG水平，結(jié)果顯示，與對照比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）[2]。也有研究在建立長爪沙鼠高脂血癥動脈模型時在飼料中添加了膽酸鹽和丙硫氧嘧啶[9]。而不同配方的高脂飼料形成的模型效果也不同。目前，中國大多數(shù)高脂血癥者血液TC水平升高同時伴TG水平升高，因此，建立一種TC、LDL-C水平升高同時伴TG水平也升高的高脂動物模型更具有研究意義。本研究選用含20.0%豬油和1. 0%膽固醇的高脂飼料喂養(yǎng)長爪沙鼠14周，結(jié)果顯示，長爪沙鼠脂質(zhì)代謝明顯紊亂，不但血清TC、LDL-C水平明顯增高，血清TG水平也顯著上升，從（1.53±0.49）mmol/L升至（3.04±1.22）mmol/L，與臨床血脂異常Ⅱa型高脂血癥較接近[10]。另外本研究在設(shè)計高脂飼料配方時為避免藥物相互影響，未添加膽酸鹽和丙硫氧嘧啶。本研究同時測定了GLU水平，結(jié)果顯示，高脂飼料喂養(yǎng)14周后長爪沙鼠GLU較普通飼料喂養(yǎng)者GLU有所降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），因此，有關(guān)高脂飼料喂養(yǎng)對長爪沙鼠GLU的影響尚需進(jìn)一步觀察、探討和驗證。

總之，本研究通過分析高脂模型長爪沙鼠各項生化指標(biāo)的變化，為模擬臨床高脂血癥類型的動物實(shí)驗研究提供了實(shí)驗基礎(chǔ)。

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Study on changes of biochemical indicators in hyperlipidemia model of Mongolian gerbils

Tang Wanze1，Xiang Le1，Lin Dongzi2，Liu Huiming1，Qin Yanmei1，Ding Hang1
（1.Teaching and Researching Section of Biochemistry and Molecular Biology，Guangdong Medical College，Dongguan，Guangdong 523808，China；2.Department of Clinical Laboratory，Dongguan Municipal Hospital for Prevention and Treatment of Chronic Diseases，Guangdong 523008，China）

ObjectiveTo observe the change of serum biochemical indicators in Mongolian gerbils fed by 14-week highfat diet.Methods20 male Mongolian gerbils were selected and randomly divided into the high-fat fodder group and the control group，10 cases in each group.The control group was fed with common fodder，while the high-fat fodder group was given the highfat fodder containing 1.0%cholesterol and 20.0%lard.The venous blood was collected by submaxillary venous plexus after 14 weeks.The serum GLU，TG，TC，HDL-C and LDL-C，etc.were detected.ResultsThe levels of serum TC，LDL-C，TG and HDLC in the high-fat fodder group were（14.27±2.97），（4.72±1.94），（3.04±1.22），（3.43±0.90）mmol/L respectively，which were significantly higher than（1.72±0.22），（0.19±0.09），（1.53±0.49），（1.46±0.25）mmol/L in the control group respectively，the differences were statistically significant（P＜0.01），but the GLU level was lower than that in the control group without statistical difference [（6.47±0.55）mmol/L vs.（8.19±1.02）mmol/L，P＞0.05].ConclusionThe high-fat fodder feeding can significantly increase serum lipid level in Mongolian gerbils and induces its hyperlipidemia.

Diseasemodels，animal； Gerbillinae； Serum； Laboratorytechniquesandprocedures； Biologicalparameters

10.3969/j.issn.1009-5519.2015.24.006

A

1009-5519（2015）24-3704-02

2015-10-28）

廣東省高等學(xué)校人才引進(jìn)專項資金資助項目（粵財教[2013]246號）。

唐菀澤（1989-），女，廣東羅定人，碩士研究生，主要從事脂質(zhì)代謝的研究；E-mail：tangwanze@sina.com。

丁航（E-mail：462579515@qq.com）。