穆鳳揚,穆鳳文, 穆鳳鳴,陳志會,馬憲東(亳州市永剛飲片廠有限公司,安徽 亳州 236800)
苦參殺蚊蟲活性研究
穆鳳揚,穆鳳文, 穆鳳鳴,陳志會,馬憲東
(亳州市永剛飲片廠有限公司,安徽 亳州 236800)
摘 要:以苦參、苦楝、曼陀羅和白頭翁為原料,研究了苦參及其組方不同提取物對按蚊幼蟲和成蟲的毒殺作用,發現苦參組方的乙醇提取物對成蚊的毒殺作用較好,本實驗對應研發綠色家居殺蟲劑具有一定的價值前景。
關鍵詞:苦參;蚊蟲;孑孓;活性
苦參(Sophora ftavescens Afit.)為豆科槐屬植物。多生在山坡、沙地、草坡、灌木林中及田野附近,全國各地均有分布。苦參作為醫藥使用,據文字記載已有二千多年的歷史。藥理實驗表明,苦參對痢疾桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌和乙型鏈球菌有明顯抑制作用[1];苦參能抑制或殺滅藍氏賈第鞭毛蟲和阿米巴原蟲,在體外其醇浸膏有抗滴蟲作用[2]。苦參堿在治療慢性肝炎和肝纖維化等方面已得到廣泛的應用。
為進一步開發利用苦參植物資源,研制開發新型植物源性殺蚊蟲藥品,本研究以蚊蟲為試驗對象,對苦參及其組方的不同溶劑提取物殺蚊蟲活性[3,4]進行測定,現報道如下。
1.1 材料
試驗選擇蚊蟲幼蟲孑孓和成蟲為研究對象,試驗材料為苦參根、苦楝、白頭翁和曼陀羅:中藥材采購與亳州中藥材交易市場,經亳州職業技術學院劉耀武副教授鑒定,60℃烘干,粉碎過30目篩,低溫條件下保存備用。
1.2 試驗方法
(1)藥材提取。稱取上述苦參兩份,每份10 g,分別用100 mL蒸餾水和100 mL乙醇室溫提取24 h,除去藥渣得上清液,備用;苦楝、白頭翁和曼陀羅各10 g,分別用100 mL 蒸餾水和100 mL乙醇室溫提取24 h,除去藥渣得上清液,備用。
(2)供試蚊蟲。選取按蚊幼蟲孑孓(2日齡,體長2-3 mm)21組,每組10只放置于20 mL培養液中備用;選取按蚊成蟲10組,每組10只放置于封閉的三角燒瓶中,備用。
(3)室內毒力測定。每種供試提取物設4~5 個劑量,每次處理按蚊成、幼蟲各10 只,4 次重復,試驗均以對應濃度的乙醇溶液為對照。以孑孓在施藥后的死亡時間為參數,測定提取物對按蚊幼蟲孑孓的毒力;以按蚊成蟲在不同濃度乙醇提取夜中的游泳時間為參數,測定提取物對按蚊成蟲的毒力。
(4)結果計算。總死亡時間表示在試驗過程中實驗組試按蚊的死亡情況,它反映了含苦參樣品對按蚊總的毒殺情況,但它不能排除試驗過程中的誤差,即在試驗過程中由于其他因素引起按蚊的死亡情況,采用校正死亡時間表示的試驗結果可以排除由于其它因素造成的試驗誤差,校正死亡時間按下公式計算。
校正死亡時間 = 實驗組死亡時間/(1-1/對照組死亡時間)
2.1 苦參毒殺孑孓效果測定結果
取4組含10只孑孓的20 mL培養液,分別加入苦參水提物2 mL、4 mL、10 mL和20 mL,第五組用濾網取10只孑孓放置于20 mL水提物中。觀察孑孓在含苦參提取物中的游泳時間,以每組孑孓死亡5只(死亡率=50%)的時間為參數記為死亡時間,時間單位為分鐘,以孑孓在水中的生存時間為空白組,空白組死亡時間為無限大。由此看出,苦參水提物對孑孓具有較強的毒殺活性,且水提物濃度越大,其對孑孓的毒殺作用越強,在未經稀釋的水提物中孑孓死亡時間為5.0 min,苦參水提物對孑孓的毒力如下。
第一組:體積比濃度10:1 10只 死亡時間41分鐘 校正死亡時間41分鐘
第二組:體積比濃度5:1 10只 死亡時間34分鐘 校正死亡時間34分鐘
第三組:體積比濃度2:1 10只 死亡時間28分鐘 校正死亡時間28分鐘
第四組:體積比濃度1:1 10只 死亡時間9分鐘 校正死亡時間9分鐘
第五組:體積比濃度0:1 10只 死亡時間5分鐘 校正死亡時間5分鐘
試驗組取4組含10只孑孓的20mL培養液,分別加入苦參乙醇提物2mL、4mL、10mL和20mL,第五組用濾網取10只孑孓放置于20mL水提物中。觀察孑孓在含苦參提取物中的游泳時間,以孑孓死亡50%的時間為參數記為死亡時間,時間單位為分鐘;對照組分別以對應濃度的乙醇溶液做空白試驗,觀察孑孓的死亡時間。不同濃度的乙醇對孑孓有一定的毒殺作用,不同濃度苦參乙醇提取物對孑孓的毒殺作用強于相應的苦參水提物對孑孓的毒殺作用,在未經稀釋的乙醇提取物中孑孓死亡時間為3.0 min。
2.2 苦參組方毒殺孑孓效果測定結果
試驗組取4組含10只孑孓的20 mL培養液,分別加入苦楝乙醇提物2mL、4mL、10mL和20mL,第五組用濾網取10只孑孓放置于20mL水提物中。觀察孑孓在含苦楝提取物中的游泳時間,以孑孓死亡50%的時間為參數記為死亡時間,時間單位為分鐘;對照組分別以對應濃度的乙醇做空白試驗,觀察孑孓的死亡時間。
取苦參、苦楝、曼陀羅和白頭翁乙醇提取液各25 mL,混合均勻,備用;試驗組取4組含10只孑孓的20mL培養液,分別加入上述提取液化合物2mL、4 mL、10 mL和20 mL,第五組用濾網取10只孑孓放置于20 mL提取液化合物中。觀察孑孓在含提取物中的游泳時間,以孑孓死亡50%的時間為參數記為死亡時間,時間單位為分鐘;對照組分別以對應濃度的乙醇做空白試驗,觀察孑孓的死亡時間。
苦參、苦楝、曼陀羅和白頭翁乙醇提取液組方對孑孓的毒殺作用明顯強于苦參或苦楝乙醇提取液對孑孓的毒殺作用,在較低的乙醇濃度和提取物濃度下,孑孓的死亡時間明顯縮短,組方提取物稀釋一倍,孑孓的死亡時間為5.0 min,在未經稀釋的乙醇提取物中孑孓死亡時間為2.0 min,苦楝水提物對孑孓的毒力見表1。

表1 苦參、苦楝、曼陀羅和白頭翁乙醇提取.液對幼蟲的毒殺
對于蟲齡(體長)不同的孑孓個體來說,其個體間的抗藥性和耐藥性具有一定的差異,蟲齡較大的孑孓死亡時間偏長,蟲齡較小的孑孓死亡時間偏短(沒有考慮孑孓性別的影響)。
2.3 苦參組方毒殺按蚊成蟲效果測定結果
試驗組取4組含10只按蚊成蟲,分別加入苦參乙醇提取物2 mL、4 mL、10 mL和20 mL,第五組按蚊成蟲放置于20 mL乙醇提取物中。觀察按蚊成蟲在含苦參提取物中的游泳時間,以按蚊成蟲死亡50%的時間為參數記為死亡時間,時間單位為分鐘;對照組分別以對應濃度的乙醇做空白試驗,觀察孑孓的死亡時間(表2)。

表2 苦參乙醇提取液對按蚊成蟲的毒殺
苦參、苦楝、曼陀羅和白頭翁提取液各一份混合均勻后,通過該混合液對按蚊成蟲的毒殺作用研究,結果發現苦參組方乙醇提取液稀釋到含乙醇25%時(提取物的濃度同時降低)對按蚊成蟲起到速殺作用。
植物中含有對有害生物具有很高活性的物質,其作用方式和作用機制亦不同于一般的化學合成農藥,而且對環境安全。本研究表明,苦參組方具有較強的毒殺按蚊幼蟲和成蟲,可以克服化學殺蟲劑氣味濃重和不適的缺陷;對進一步開發無公害,家居型殺蟲劑具有較強的指導價值。
參考文獻:
[1]趙玉英,張如意.苦參化學成分研究概況[J].天然產物研究與開發,1991,3(03):93.
[2]牛奎之.苦參的藥理和臨床應用[J].中國中西醫結合雜志,1995,15(11):698.
[3]李貴明,周琳.苦參?印楝素微乳劑最佳配比與殺蟲效果研究[J].江蘇農業科學,2011,6,203.
[4]鄭方強,劉忠德,裴翠花.苦參總生物堿提取工藝優化及殺蚜蟲活性研究[J].2008,1,43.
項目基金:2013安徽省質量工程項目—省級藥學特色專業(2013jxtd067);2014安徽省質量工程項目-藥品質量檢測技術省級特色專業(2014tszy055)。
作者簡介:穆鳳揚(1986-),男,回族,安徽亳州人,工程師,研究方向:中藥質量管理與控制。