云南翠雀花的生藥學研究*

李學芳，符德歡，王 麗△，蒲星宇，周培軍

（1.云南省藥物研究所，云南昆明650111；2.云南白藥集團創新研發中心，云南昆明650111；3.云南省中藥和民族藥新藥創制企業重點實驗室，云南昆明，650111）

云南翠雀花為毛茛科翠雀屬植物云南翠雀花Delphinium yunnanense Franch.的干燥根。又名月下參、小草烏、米草烏、飛燕草、喏嘟西哩（彝族名）[1-2]。生于1 000～2 400m 的山坡草叢、或灌木叢潮濕處。我國大部分地區均有分布，其中云南巧家、峨山、施甸、魯甸、昆明、嵩明、祿勸、雙柏、楚雄、江川、景東、鶴東、洱源、硯山、元江、文山等地分布較多[3]。其始載于《滇南本草》，味苦、平、性溫熱。具有祛風濕，散寒止痛，通絡散瘀之功。用于風濕關節痛，胃寒疼痛，跌打損傷，小兒口腔炎，肺結核，咳嗽。彝族用根溫中止痛，化痰止咳。還可用于胃痛[4-5]。經查閱文獻，其主要含有生物堿（非成癮性鎮痛作用的二萜生物堿類）、皂苷類成分[6]及異亮氨酸、蛋氨酸、賴氨酸等17 種氨基酸及多種礦質元素，如K、Na、Mg、P、Ca、Co、Cu、Zn、Mn 等[7]。在生藥學研究方面尚屬空白。故本文擬對其根進行生藥學方面系統的研究，為其深入研究和開發利用提供一定的理論依據。

1 實驗材料與方法

1.1 藥材

藥材采于巧家、昆明、嵩明、祿勸，經中國科學院昆明植物所分類鑒定室鑒定為毛茛科翠雀屬植物云南翠雀花Delphinium yunnanense Franch. 的干燥根。

1.2 試劑

堿性苦味酸試劑、硅鎢酸試劑、碘-碘化鉀試劑、碘化汞鉀試劑、80%乙醇、95%乙醇、100%無水乙醇、TO 型生物透明劑、0.1%固綠、0.5%番紅、石蠟、生物組織固定液。

1.3 儀器

FA2004N 電子分析天平（上海分析儀器公司），組織攤片烤片機（CS-Ⅳ型）、生物組織刀刃磨機（MD-Ⅱ型）、BM-IX 生物組織冷凍包埋機、CS-Ⅳ型攤片烤片機、QP-Ⅲ生物組織切片機、TS-12A 生物組織自動脫水機（湖北孝感儀器公司），MicrE400 Nikon 顯微鏡、數碼顯微照相機（日本尼康公司），GZX-9030 MBE 數顯鼓風干燥箱、101A-2E 電熱鼓風干燥箱（上海通用儀器公司），生物超聲波清洗器（SK3200LHC）、ZF-Ⅰ型三用紫外分析儀（上海分析儀器公司）。

1.4 實驗方法

按傳統植物分類方法和藥材鑒定方法，制作云南翠雀花根橫切面及粉末制片等進行觀察比較、描述分析。并按常規方法進行化學成分鑒別及薄層色譜實驗。

2 實驗結果

2.1 性狀鑒別

根圓柱形，長2～6cm，直徑1～6mm。表面棕褐色，具彎曲縱紋及根痕；根頭處殘留葉柄殘基及中空的莖基。質脆，易折斷，斷面黃白色，較平坦。氣微、味辛、苦（見圖1）。

圖1 云南翠雀花藥材圖

2.2 顯微鑒別

2.2.1 根橫切面特征

后生皮層細胞棕色，1～2 列；皮層寬，細胞狹條形，切向延長；有石細胞及纖維單個散在或數個成群；內皮層不甚明顯。韌皮部寬廣，韌皮射線細胞略切向延長，徑向排列較整齊。形成層成環。木質部導管束3 束，呈放射狀排列；木射線寬，細胞徑向排列整齊。本品薄壁細胞中充滿淀粉粒。（見圖2）。

圖2 云南翠雀花（根）橫切面圖

2.2.2 粉末特征

粉末灰白色。①后生皮層細胞黃色或黃棕色，表面觀類方形或不規則形，有的壁呈瘤狀增厚突入細胞腔。②石細胞類長方形、三角形、多角形或長條形，壁稍厚或較厚，紋孔及孔溝明顯。③淀粉粒較多，單粒圓形、長圓形或橢圓形，直徑8～20μm，臍點呈點狀或人字形；復粒由2～3 分粒組成。④導管主為螺紋、具緣紋孔或網紋導管，直徑15～50μm。⑤纖維長條形或長梭形，壁稍厚或較厚，有的一邊較厚，紋孔明顯。（見圖3）。

圖3 云南翠雀花（根）粉末特征圖

2.3 理化鑒別

取藥材粗粉5g，加入0.5%鹽酸乙醇溶液35mL，置水浴中回流10min，趁熱過濾，濾液加硅鎢酸試劑，有灰白色沉淀產生。

取藥材粗粉5g，加入0.5%鹽酸乙醇溶液35mL，置水浴中回流10min，趁熱過濾，濾液加碘-碘化鉀試劑，有紅棕色沉淀產生。

取藥材粗粉5g，加入0.5%鹽酸乙醇溶液35mL，置水浴中回流10min，趁熱過濾，濾液加碘化鉍鉀試劑，有黃色沉淀產生。

取藥材粗粉5g，加入0.5%鹽酸乙醇溶液35mL，置水浴中回流10min，趁熱過濾，濾液加苦味酸試劑，有淺黃色沉淀產生。

2.4 薄層鑒別

2.4.1 供試液的制備

稱取4 個不同產地樣品粉末各5g，加90%乙醇20mL，超聲提取30min，（59kHz），過濾，濾液用氨水調節pH 為11，用5mL 正丁醇萃取，即得供試品溶液。

2.4.2 展開劑的篩選

提取物采用多種展開劑試其效果[8]：氯仿，氯仿-乙醇（1∶1），氯仿-乙醇（2∶1），氯仿-乙醇（3∶1），氯仿-乙醇（4∶1），氯仿-乙醇（5∶1），氯仿-乙醇（6∶1），氯仿-乙醇（7∶1），氯仿-乙醇（8∶1），氯仿-乙醇（9∶1），正丁醇，正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶2），正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶1），正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶0），正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶1.5）展開，晾干，噴灑顯色劑，觀察其展開效果，發現用正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶1.5）效果最好，有較好的重現性。

2.4.3 實驗結果

照薄層色譜法（《中華人民共和國藥典》2010 版一部附錄）[9]，吸取上述4 個不同產地供試液10μL，點于同一硅膠G 薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水，4∶1∶1.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀顯色，置紫外光燈（254nm）下檢視，4 個不同產地藥材供試液在同一硅膠G 板相同位置上顯相同顏色的熒光斑點。（見圖4）

圖4 云南翠雀花的薄層色譜圖

3 小結與討論

翠雀屬植物全世界約有350 種，中國約有165種，云南有49 種，13 變種[3]。云南翠雀花為民間常用中草藥，其資源豐富，療效較好，具有較好的開發前景。通過對云南翠雀花植物來源、藥材性狀、顯微特征、理化鑒別及薄層色譜研究可得，云南翠雀花在各鑒定項中均具有明顯的鑒定特征。此結果可為其今后的深入研究及與同屬植物的鑒定提供一定的理論依據。

[1] 云南省藥物研究所. 云南天然藥物圖鑒（第3 卷）[M]. 昆明：云南科技出版社，2005：166.

[2] 中國科學院《中國植物志》編輯委員會. 中國植物志·27卷[M]. 北京：科學出版社，1979：433.

[3] 中國科學院昆明植物研究所. 云南植物志·11 卷[M]. 北京：科學出版社，2000：135，108.

[4] 蘭茂原著，于乃義，丁蘭馥，胡月英，等整理. 滇南本草[M].昆明∶云南科技出版社，2000：679-680.

[5] 國家中藥管理局《中華本草》編委會. 中華本草（第3 卷）[M]. 上海：上?？茖W技術出版社，1999：1184.

[6] 梁妍，郝小燕，楊小生. 云南翠雀花中生物堿成分的研究[J]. 中成藥，2009，（31）5：795-796.

[7] 鐘惠民，蓋翠娟，陶銀鳳，等. 云南翠雀花化學成分的測定[J]. 氨基酸和生物資源，2013，35（4）：41-43.

[8] 張文文，楊敬輝，陳露，等. 麻鏈霉菌NF0919 菌株發酵液有效成分薄層色譜分離的展開劑優化[J]. 天然產物研究與開發，2014，26（3）：370-373.

[9] 中華人民共和國國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典（一部）[M]. 北京：中國中醫藥科技出版社，2010：28.