注射用曲札茋苷與常用輸液配伍穩定性研究*

唐嘉悅，方 芳，陳云建△

（1.云南中醫學院，云南昆明650500；2.昆明制藥集團股份有限公司，云南昆明650100）

曲札茋苷是從蓼科植物拉薩大黃（Rheum lhasaense A. J. Li et P. K. Hsiao）的干燥根或根莖中提取出的有效成分之一?；瘜W名為3，5，3′，4′-四羥基茋-3-O-β-葡萄糖苷，屬二苯乙烯苷類化合物。近年研究表明二苯乙烯苷類化合物具有抗氧化清除自由基[1-2]、抗腫瘤[3]、降血脂[4-6]、抗動脈粥樣硬化[7-9]等生物活性。本文將模擬臨床用法，對注射用曲札茋苷與0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液在4 種條件下的配伍穩定性進行考察[10-15]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UltiMate 3 000 型液相色譜儀（美國戴安公司），BP221S 型電子天平（sartrous 公司），FE20 型pH 計（梅特勒-托利多公司），KBF240 型光照箱（德國Binder 公司），YB-2 型澄明度檢測儀（天大天發科技有限公司）。

1.2 試藥

注射用曲札茋苷（昆明制藥集團股份有限公司，規格：20mg/瓶，批號：21021031-02）；0.9%氯化鈉注射液（昆明南疆制藥有限公司，批號：B121022D2）；5%葡萄糖注射液（昆明南疆制藥有限公司，批號：B121122）；10%葡萄糖注射液（昆明南疆制藥有限公司，批號：C121006）；曲札茋苷對照品（昆明制藥集團股份有限公司，純度：99.5%）；甲醇（色譜純，SIGMA，批號：S93191）；所有用水均為注射用水。

2 方法和結果

2.1 配伍液的配制

模擬臨床用法，各取注射用曲札茋苷2 支（約相當于曲札茋苷40mg）用適量0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液溶解后，再注入至100mL0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液中搖勻。取配伍后的溶液分別密閉，放置于室溫、低溫2～8℃避光、室溫避光、室溫強光照（4 500lx±500lx） 條件下，于0，2，4，6，8h 進行考察。

2.2 外觀

取配伍后的溶液，按考察時間點取樣，置于澄明度檢測儀下檢測其澄明度，溶液應澄清。溶液顏色依照中國藥典2010 版一部附錄XI A 第一法檢測，其溶液顏色應低于黃色4 號標準比色液。

2.3 降解產物

取配伍后的溶液，按考察時間點取樣，作為供試品溶液。精密量取供試品溶液1mL 置于100mL量瓶中加入75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。依照含量測定方法中的色譜條件進行檢測，考察藥液放置過程中主藥的降解產物。

2.4 pH 值

取配伍好的溶液，按考察時間點取樣，依照中國藥典2010 年第一版附錄VII G 進行檢測。

2.5 含量

2.5.1 溶液的配制

2.5.1.1 對照品溶液的配制

精密稱取20mg 曲札茋苷對照品，置于50mL量瓶中，加入適量75%甲醇，溶解，稀釋，定容，搖勻；精密量取1mL 置10mL 量瓶中，加入75%甲醇定容后搖勻。

2.5.1.2 供試品溶液的配制

按考察時間點取樣，精密量取配伍液1mL 置于10mL 量瓶中，加入75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.5.2 色譜條件

色譜柱：Cosmosil C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈（A）：0.1%磷酸（B），梯度洗脫0～25min，15%～30%A，25～30min，30%～40%A，30～35min，40%～15%A，35～40min，保持15%A 不變；流速：1.0mL/min；檢測波長：319nm；進樣量：10μL。理論塔板數按曲札茋苷計算應不低于8 000。曲札茋苷的保留時間為12.5min，色譜圖如圖1。

2.5.3 方法學驗證

2.5.3.1 線性關系考察

精密稱取曲札茋苷對照品適量，分別稀釋成濃度為0.495，0.990，1.98，7.92，15.84，19.80，39.60，99.0，198.0，396.0μg/mL 的溶液。精密量取10μL進高效液相色譜儀進行測定，以對照品的濃度（μg/mL）為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線，計算回歸方程，得到線性回歸方程：Y=43.164x+2.7561，r=0.999 9（n=10）結果表明曲札茋苷在0.495μg/mL～396μg/mL 范圍內線性關系良好。

2.5.3.2 精密度實驗

精密稱取注射用曲札茋苷6 份，制備供試品溶液，記錄色譜圖，測定峰面積。結果：注射用曲札茋苷峰面積的相對標準偏差（RSD）為0.034%（n=6）。

2.5.3.3 穩定性實驗

精密稱取注射用曲札茋苷供試品及曲札茋苷對照品適量，分別配制成供試品溶液及對照品溶液，避光放置。分別于0，2，8，14，24，38h 用高效液相色譜儀進行測定，考察對照品和供試品溶液的穩定性。結果：注射用曲札茋苷供試品溶液和曲札茋苷對照品溶液的峰面積的相對標準偏差（RSD）分別為0.276%、0.576%，表明其在室溫避光條件放置38h 穩定。

2.5.3.4 重復性實驗

由同一分析人員精密稱取注射用曲札茋苷供試品6 份，依照含量測定項下測定，求各份供試品含量及含量的相對標準偏差，結果平行操作測定的6 份供試品溶液含量的相對標準偏差（RSD）為1.50%（n=6）。

2.5.3.5 回收率實驗

精密稱取曲札茋苷對照品約10mg 置于100mL量瓶中，溶解，稀釋，定容作為對照品儲備液。精密稱取注射用曲札茋苷供試品約120mg（約相當于曲札茋苷20mg），置于100mL 量瓶中，溶解，稀釋，定容作為供試品儲備液。分別精密量取供試品儲備液9 份，每份1mL 置10mL 量瓶中，每3 份分別精密加入對照品儲備液1mL、2mL、5mL，稀釋定容。配制成30，40，50μg/mL 3 個水平的溶液，共9 份。計算加樣回收率分別為100.41%，100.90%，100.64%，RSD 值分別為1.01%，1.03%，0.98%.

圖1 注射用曲札茋苷色譜圖（曲札茋苷主峰保留時間：12.413min）

2.6 配伍穩定性實驗結果

2.6.1 外觀及pH 考察

取配伍后的溶液，分別置于室溫、低溫2～8℃避光、室溫避光、室溫強光照（4 500lx±500lx）條件下，并于0，2，4，6，8h 分別觀察其外觀并測定其pH。結果表明：注射用曲札茋苷與0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液配伍后在室溫、低溫2～8℃避光、室溫避光條件下外觀均為淺黃色澄清液體，pH 均無顯著性變化，在強光照室溫條件下，外觀也為淺黃色澄清液體，pH 有明顯下降，見表1。

表1 注射用曲札茋苷與3 種輸液在4 種條件下8h 內pH 值

2.6.2 含量測定

將配伍后的溶液，分別置于室溫、低溫2～8℃避光、室溫避光、室溫強光照（4 500lx±500lx）條件下，并于0，2，4，6，8h 分別測定其含量。結果表明：注射用曲札茋苷與0.9%氯化鈉注射液、10%葡萄糖注射液、5%葡萄糖注射液配伍后在室溫、低溫2～8℃避光、室溫避光條件下含量均無顯著性變化，在強光照室溫條件下，含量有明顯降低，見表2。

表2 注射用曲札茋苷與3 種輸液在4 種條件下8h 內含量測定結果

2.6.3 降解產物考察

取配伍后的溶液分別置于室溫、低溫2～8℃避光、室溫避光、室溫強光照（4 500lx±500lx）條件下，并于0，2，4，6，8h 分別測定其降解產物。結果表明：注射用曲札茋苷與0.9%氯化鈉注射液、10%葡萄糖注射液、5%葡萄糖注射液配伍后在低溫2～8℃避光、室溫避光條件下降解產物均無顯著性變化，在室溫條件下降解產物略有增加。在強光照室溫條件下，降解產物有明顯增，結果見表3。

表3 注射用曲札茋苷與3 種輸液在4 種條件下8h 內降解產物測定結果

3 討論

①結果表明：注射用曲札茋苷與0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液配伍后在室溫、低溫2～8℃避光、室溫避光條件下8h 內含量、降解產物、pH 值、外觀均無顯著性變化。可見其在這3 種條件下與0.9%氯化鈉注射液，5%葡萄糖注射液，10%葡萄糖注射液配伍穩定，為臨床用藥提供了理論依據。

②注射用曲札茋苷與0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液在室溫強光照條件下8h 內含量、pH 均有明顯下降，降解產物有明顯增多，證明其在光照條件下不穩定，因此在臨床用藥時應注意避光。

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