抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體粉飼料添加劑的研制

張桂榮劉玉梅武桂梅王振輝*劉 軍

(1.吉林農業科技學院,吉林吉林 132101; 2.吉林省白山市松樹鎮畜牧站,吉林白山 234704; 3.吉林正業生物制品股份有限公司,吉林吉林 132101)

抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體粉飼料添加劑的研制

張桂榮1劉玉梅2武桂梅1王振輝1*劉 軍3

(1.吉林農業科技學院,吉林吉林 132101; 2.吉林省白山市松樹鎮畜牧站,吉林白山 234704; 3.吉林正業生物制品股份有限公司,吉林吉林 132101)

當雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體效價達到1∶320倍時,收集免疫雞蛋分離卵黃,減壓低溫干燥制成卵黃抗體細粉并進行抗體效價測定和安全檢驗。最后將合格的卵黃抗體細粉以不同比例加入雛鴨飼料,對雛鴨進行預防量飼喂后強毒攻毒試驗及強毒攻毒后治療量的飼喂試驗、小區域雛鴨飼喂試驗。結果:預防試驗為每kg飼料添加30g卵黃抗體粉末時,攻毒保護率為85.0%;治療試驗為每kg飼料添加50g卵黃抗體粉末時,發病治愈率達到65.0%以上;小區域試驗表明:卵黃抗體粉末預防量添加組比同期常規飼養組總發病率降低11%,抗生素用量降低12.3%,增重率提高9%。有效的防治了雛鴨病毒性肝炎病。

雛鴨肝炎病毒;卵黃抗體;飼料添加劑;免疫效果

雛鴨肝炎病毒[1]感染是危害養鴨業極其嚴重的傳染病。按獸醫法規的要求，控制雛鴨肝炎病的措施是嚴格的檢疫、凈化和飼養管理工作，然而由于檢疫上的諸多困難。在當前發病率增高的情況下，本研究采用分離到的雛鴨肝炎病毒制備的滅活抗原，免疫健康的產蛋雞，制備卵黃抗體粉添加到飼料中，取得較好的免疫效果。

1 材料

菌株從吉林雙遼鴨場等數家鴨場分離鑒定的雛鴨肝炎病毒。各種試劑和儀器由吉林農業科技學院生物制藥實驗室制備和保存。

2 方法

2.1 抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體干燥粉末制備與檢驗[2]

2.1.1 卵黃抗體粉末制備 將雞蛋用自來水沖洗污物后，用0.05%百毒殺浸泡3～5min，再用75%酒精浸泡擦一遍，晾干，在無菌條件下將高免蛋打破，倒入蛋清分離器中分離蛋清，把留下的蛋黃倒入滅菌的組織搗碎機中高速攪拌2～3min制成勻漿，用雙層滅菌紗布過濾，進行50℃減壓真空干燥，將干燥的卵黃無菌粉碎分裝于250ml中性瓶中密封，于4℃保存。

2.1.2 卵黃抗體粉末檢驗 按無菌檢驗操作規程進行。蛋雞的免疫與卵黃抗體效價已經做完并發表核心期刊上

2.1.3 安全檢驗 隨機選取2日齡健康雛鴨40只，隨機分成4組，第一組每只飼喂卵黃抗體粉末0.5g，第二組每只飼喂卵黃抗體粉末1g，第三組每只飼喂卵黃抗體粉末1.5g，連續服用3d，第四組作為空白對照，相同條件隔離飼養10d記錄結果。

2.2 抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體飼料添加劑免疫試驗[3]

2.2.1 預防添加量試驗 選1日齡健康、體重相當的肉雛雞100只，隨機分成5組，1～4組為試驗組，第5組為對照組。對4個試驗組每1kg基礎日糧中依次分別添加10g、20g、30g、40g的抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體粉，對照組不添加。各組分開隔離喂養，連續飼喂3d。然后每只試驗雛鴨連同對照雛鴨各肌肉注射DVH標準強毒，隔離飼養在吉林正業股份責任公司提供的負壓過濾消毒免疫室內，飼養觀察20d，記錄結果。

2.2.2 治療添加量試驗 選1日齡健康、體重相當的肉雛鴨100只，隨機分成5組，1～4組為試驗組。每組試驗雛鴨各肌肉注射DVH標準強毒株，隔離飼養在吉林正業股份責任公司提供負壓過濾消毒免疫室內3d，待100%左右雛雞發病時，4個試驗組每kg基礎日糧中分別飼喂添加40g、50g、60g、70g的抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體粉飼料飼喂3d之后，繼續用無抗體飼料飼喂10d。第5組為強毒攻毒對照組。觀察記錄各組試驗雛鴨的變化。

2.2.3 小區域試驗 對雙遼鴨場不同飼養批次共計1 000雛鴨從3日齡開始，在基礎日糧飼料里添加30g/kg的抗雛鴨肝炎病毒卵黃抗體粉末，飼喂3d，同未添加組同條件飼養50d統計發病率、飼養成本。

3 結果與分析

3.1 DVH卵黃抗體干燥粉末檢驗結果

制備的卵黃抗體粉末雖然污染少量的細菌，但均沒有致病性；四種劑量的雛雞飼喂試驗均安全；卵黃抗體經過干燥脫水后卵黃抗體效價高達到1∶4048倍數。證明低溫減壓干燥處理沒有影響卵黃抗體效價，而且達到較好的濃縮目的，便于卵黃抗體4℃長期保存與應用。

3.2 卵黃抗體預防添加量試驗結果

從表1可知：預防免疫卵黃抗體添加量為3%、4%時，攻毒保護率均為85.00%；治療時卵黃抗體添加量為5%，6%，7%時，治愈率分別為 65%，75%，65%?？芍兄频碾r鴨肝炎病毒卵黃抗體具有較好的免疫特異性。攻毒后對照組雛鴨全部死亡，死亡雛鴨都有典型的雛鴨病毒肝炎癥狀[1]，故抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體預防添加量為3%時和治療量5%時比較合適。

表1 卵黃抗體粉飼料添加劑免疫試驗結果

3.3 小區域試驗結果

卵黃抗體飼料添加組較同期普通飼養組總發病率降低11%，抗生素用量降低12.3%，增重率提高7.7%。證明抗雛鴨病毒性肝炎卵黃抗體粉末的添加，較好的控制了疾病的發生，而且其他疾病的發生率也就隨之降低，總體經濟效益顯著提高9%。

4 討論

卵黃抗體[3]（IgY）是禽類B淋巴細胞在抗原物質刺激下所產生并沉積在卵黃中的能與抗原發生特異性反應的一種免疫球蛋白，是禽類在長期進化過程中形成的用于提高抵抗力的物質。卵黃抗體作為綠色藥物，是較理想的抗生素替代品。由于雛鴨消化系統尚未發育完全，消化酶對IgY消化作用較弱，故可將一定量的針對某些疾病的 IgY 添加到飼料或飲用水中，一部分可經小腸吸收，起到被動免疫作用。本試驗研究證明小劑量的卵黃抗體添加劑可以起到預防作用，而大劑量的在發病初期還有治療作用。卵黃抗體無污染，無殘留，對機體不會產生危害，是一種良好的飼料添加劑。由于雛鴨病毒性肝炎是一種高度致死性急性傳染病。尤其是3～20日齡的雛鴨以發病急，死亡快特點，而且疫苗接種不能很好控制，使用其卵黃抗體飼料添加劑能夠有效地降低家雛鴨發病率與死亡率，提高生產性能，增加養鴨戶的經濟效益。但卵黃抗體作為添加劑進行大規模的應用還存在一定的問題[4]，如特異性毒株的選擇問題，卵黃抗體的穩定性保護和貯存、污染防治等問題，針對各種疾病的卵黃抗體的開發研制，還需要更多專家努力。但可預見，卵黃抗體在飼料添加劑中的應用具有廣闊的前景[4]。

5 結論

抗雛鴨病毒性肝炎病卵黃抗體效價到達1：320倍以上時，制成卵黃抗體干燥粉末，預防添加量為3%時，攻毒保護率可達85%，治療添加量為5%時，治愈率可達65%以上。卵黃抗體添加組比同期普通飼養組總發病率降低7%，抗生素用量降低 12%，增重率提高9 %。

[1] 【美】B.W卡爾尼克.禽病學（第十版）[M].北京：中國農業出版社，1999：92-152.

[2] 劉海生，楊增岐，張淑霞等.抗仔豬大腸埃希菌病高免卵黃抗體粉的研制[J].動物醫學進展，2009，30（9）：15-19.

[3] 韓水仲，田澤華，趙津子等.卵黃抗體在飼料添加劑中的應用[J].中國飼料，2010，（15）：3-7.

[4] 武桂梅，王振輝，張桂榮，等.抗雞白痢沙門氏桿菌病卵黃抗體粉飼料添加劑的研制[J].黑龍江畜牧獸醫科技版，2013，（1）：66-107.

吉林省教育廳“十二五”科研項目：吉教科合字[201]

張桂榮（1962—），女，吉林省公主嶺市人，碩士，副教授，主要從事動物藥理學和動物傳染病實驗教學工作。

王振輝（1964—），男，吉林省伊通縣人，碩士，教授，主要從事生物藥物教學、研究工作。