IL-- 8與乙型肝炎病毒感染的研究進展

毛學鋒，任 蓉

玉林市中心血站檢驗科，廣西 玉林 537000

白細胞介素-8（interleukin,IL-8）作為一種最主要的趨化因子，對中性粒細胞、T淋巴細胞、嗜堿性粒細胞等細胞有趨化作用，在抗病毒和局部炎癥反應中起重要作用。乙型肝炎病毒（HBV）感染者感染后的結局可為急性肝炎、慢性肝炎、無癥狀攜帶者、也可發展為肝硬化、肝衰竭和肝細胞肝癌，此結局與IL-8緊密聯系。本文就IL-8與乙型肝炎病毒感染者的關系進行綜述。

1 HBV感染的過程和結局

HBV屬于引起非細胞病變的嗜肝DNA病毒。HBV的感染和復制不會直接造成肝細胞的損傷［1］，而是：HBV侵入機體后，通過血液侵入肝細胞內，復制、增殖成熟的HBV，這些成熟的HBV被釋放后，又侵入其它健康的肝細胞，如此不斷地感染和復制，從而激發自身的肝細胞發生了免疫反應，最終誘發了肝細胞的免疫損傷。受感染的肝細胞迅速識別病毒DNA后，分泌I型干擾素（IFN-α/β）：其誘導肝細胞合成抗病毒蛋白，從而抑制病毒復制；IFN-α/β同時活化并誘導趨化肝內的單核/巨噬細胞、NK細胞、樹突狀細胞（dendritic cells,DC）等免疫細胞，通過聚集活化的免疫細胞分泌干擾素γ（IFN-γ）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、IL-8、白細胞介素12（IL-12）等細胞因子，最終控制和清除HBV,并吞噬、殺傷、溶解受感染的肝細胞；一些被吞噬的病毒顆粒和凋亡細胞碎片在溶酶體內消化并加工成病毒抗原肽，之后呈遞給T、B淋巴細胞,從而產生針對HBV抗原特異性的細胞克隆，并加以增殖和分化，最后啟動適應性免疫系統。病毒介導的免疫反應被認為是肝炎、肝硬化和原發性肝癌等肝臟損傷性疾病的病因［2］。

2 IL-8

2.1 IL-8簡介

IL-8又稱為趨化因子CXCL8（C-X-C motif Ligand 8），也被稱為 NAP-1（neutrophil activation protein 1），是第一個被克隆并含有ELR結構的趨化因子，編碼基因3～10C定位于人第4號染色體（q19～q21），其堿基序列與PE4、IP-10有高度的同源性［3］。IL-8開放閱讀框架編碼一個含99個氨基酸的多肽，N端的信號肽也包括在內。成熟的IL-8有多種分子形式，是在N端剪接的差異造成的，且最常見的是含72和78個氨基酸殘基的多肽［4］。IL-8結合趨化因子受體白細胞介素-8受體α（IL8RA，又叫CXCR1）和白細胞介素-8受體β（IL8RB,又叫CXCR2）后，不僅對中性粒細胞有很強的趨化作用，還對T淋巴細胞、單核/巨噬細胞等有趨化作用［5］。中性粒細胞、單核/巨噬細胞、T淋巴細胞等多種免疫細胞以及HBV感染的肝細胞等都能分泌IL-8，內毒素（LPS）、白細胞介素1（IL-1）、TNF-α又可刺激其大量表達［6］。

2.2 IL-8與HBV的關系

IL-8是機體內重要的炎癥遞質，肝臟內的肝細胞、星狀細胞、枯否細胞等細胞均能產生和分泌，與肝臟局部炎性反應有關。其具有刺激細胞生長、促進細胞分化和加速肝細胞急性期蛋白合成等功能，參與炎癥損傷過程，在HBV感染引起的肝炎、肝硬化和肝癌等肝臟損傷性疾病中起重要作用。

3 HBV感染者IL-8的表達

研究顯示，除隱匿性肝炎外，急性、慢性及重型乙型肝炎患者血清IL-8水平均高于健康對照者，這表明IL-8在清除體內感染病毒中具有重要作用［7-10］。在慢性乙肝不同疾病階段血清細胞因子的研究中發現，活動期患者血清IL-8水平高于非活動期患者，而活動期患者血清IL-8與非活動期患者血清IL-8均高于健康對照者［1］，并且活動期患者外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）中IL-8mRNA水平很高，特別是對干擾素治療無應答的病人：病人在接受IFN-α治療治療期間，由于不能有效清除血中HBV，PBMCs中IL-8mRNA水平居高不下，導致肝臟炎癥損傷；而對干擾素治療有應答的病人，其隨著治療的進行，體內HBV逐漸被有效清除或抑制了，PBMCs中IL-8mRNA水平逐步下降，這可能是機體的一種免疫自穩方式［7］。HBV感染者血清中IL-8水平增高能誘導和促進中性粒細胞趨向、粘附于血管內皮細胞并損傷內皮細胞，加重了肝臟炎癥細胞浸潤，使炎性介質釋放更多，加劇肝臟局部炎癥反應和肝細胞的損害［11］。

除HBV感染后的肝炎與IL-8的水平有關之外，研究表明，乙肝后肝硬化患者外周血中IL-8分子水平及其mRNA水平表達均升高，且病毒復制組較病毒非復制組高，表明患者病情嚴重程度也與IL-8的水平的高低與有關［12-13］。在HBV的作用下，除了肝細胞本身分泌IL-8外，還可誘導其合成大量TNF-α，過量的TNF-α可進一步刺激肝細胞、枯否細胞、PBMCs、內皮細胞等合成和釋放大量的IL-8；肝硬化患者存在一定程度腸內菌群紊亂，部分腸道菌群產生LPS釋放入血，與TNF-α共同刺激單核/巨噬細胞、血管內皮細胞等合成分泌IL-8，使其血清IL-8水平偏高［14］。此外，肝硬化患者肝臟纖維組織增生可合成多種細胞外基質（ECM），并釋放致纖維化因子TGF-β和MCP-1、MIP-2等趨化因子，使血清IL-8水平進一步升高，呈現明顯炎癥表現。隨著疾病進程進展，肝細胞受損加重，全身高動力循環，門脈高壓，多系統受累，血清IL-8水平不斷升高，以失代償期水平最高。在外周血高濃度IL-8的趨化作用下，大量淋巴細胞、單核細胞等炎癥細胞聚集至肝臟感染部位，產生免疫應答和（或）炎癥反應［15］，在清除病毒感染的同分泌更多IL-8等炎癥因子，進一步誘導單核細胞、淋巴細胞等在肝臟內的聚集活化，肝星狀細胞在反復的炎癥刺激下分泌大量膠原蛋白，促進肝臟纖維化，參與肝硬化疾病的進展［16］。

還有研究發現IL-8與惡性腫瘤有關［17］。在以旱獺為實驗動物模型，探討IL-8在慢性乙肝和肝癌中的作用時，發現旱獺IL-8基因與人類IL-8基因相似，其同樣趨化中性粒細胞，可同時在肝癌組織和非肝癌組織表達，并在非肝癌組織表達高［18］。肝癌患者血清IL-8高于正常對照組，且發生遠處轉移的肝癌患者高于未轉移的肝癌患者［19］。原發性肝癌(PHC)患者血清IL-8水平高于對照組，HBV DNA陽性組和陰性組血清IL-8水平均高于對照組，且HBV DNA陽性組血清IL-8水平高于HBV DNA陰性組，其增高應與HBV感染、肝細胞損害和肝纖維化有關［20］。據PHC患者手術前后血清IL-8及PMBC內IL-8mRNA的研究結果顯示，手術前后兩者均高于對照組，且術后一周應激性增高，3個月后仍高于正常水平［21-22］。其升高機制可能有：局部肝臟手術切除產生較大范圍的機械損傷，造成大量正常的肝細胞和癌細胞壞死，顯著增加入血的IL-8，致患者外周血表達短期內應激性增高；IL-8作為腫瘤細胞自分泌的生長因子誘導自身增殖，促進腫瘤生長［23］；IL-8以旁分泌方式與白細胞和血管內皮細胞表面的趨化性因子受體結合促使白細胞進入腫瘤組織，并引起內皮細胞增殖形成新生血管，從而加速腫瘤的發生和轉移［24］。

4 IL-8基因多態性與HBV感染的關系

細胞因子的水平與其基因多態性有關，不同的基因型有可能產生不同的蛋白或者改變轉錄效率，從而影響疾病的易感性及嚴重性［25］。IL-8基因定位于第4號染色體上,編碼IL-8的基因全長5.2kb,由4個外顯子和3個內含子組成,在其轉錄起始點-251處存在A/T多態性。IL-8基因啟動子區-251A/T多態性中各基因組頻率(AA、AT、TT)和等位基因頻率在病例組與對照組差異顯著，但在慢性HBV感染輕度、中度和重度差異不明顯［26］?；蛐蜑锳A型、TA型的慢性HBV感染者其血清IL-8水平高于基因型為TT型的慢性HBV感染者［27］。基因型為AA的HBV感染者容易發展成慢性，而基因型為TT純合子的HBV感染者較難發展成慢性，A等位基因攜帶者是T等位基因攜帶者患慢性HBV感染風險的3.08倍［26］。由于基因多態性受眾多因素（如種族背景、樣本數量等）影響，不同的人種、不同的地域、不同的病例來源都可能導致不一致的研究結果［27］，IL-8基因多態性與HBV感染結局的相關性，只有進一步在更大的獨立患者樣本及家系中進行遺傳學研究才能明確。

綜上所述，HBV感染機體后，介導以局部中性粒細胞、單核/巨噬細胞、淋巴細胞等炎癥細胞浸潤為主的感染性疾病，并引起肝炎、肝硬化和肝癌等肝臟損傷性疾病。IL-8是機體最主要的炎癥因子，對多種免疫細胞有明顯趨化和功能活化作用，引起HBV感染者肝臟的局部炎癥反應。IL-8的基因多態性對HBV感染的結局具有重要的影響。現IL-8的單克隆抗體已應用于IL-8表達陽性的患者，且治療效果良好［28-29］，推測IL-8及其受體可能成為治療HBV感染的新靶位。

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