發熱模型的研究進展

李欣芮 宋惠欣

關鍵詞：發熱；動物模型；綜述中圖分類號：R254

文獻標志碼：A

文章編號：1007-2349（2015）04-0077-03發熱大多是由于致熱岡子作用于機體，使得內熱原得以產生并釋放，使體溫在一定程度上升高。近年來，建立動物的發熱模型為解熱藥物的研究提供了非常重要的根據。到目前為止，常用的致熱原有：LPS，2，4-二硝基酚，干酵母等。近年來有關學者又研究出了腦膜炎奈瑟菌致發熱模型和新西蘭兔金黃色葡萄球菌感染性發熱模型。本文將從化學藥品造模法、生物制劑造模法和其它造模法三方面對前人研究的發熱模型綜述如下。1 化學藥品造模法1.1 2，4-二硝基酚（DNP）導致的發熱模型 DNP可以刺激細胞氧化過程，使氧化的過程受到刺激所增加的能量不能夠通過磷酰化轉變成ATP或磷酸肌酸，而以熱能散發，從而引起發熱I。陳敬然等[2]以160 mg/kg的劑量給大鼠ihDNP溶液，若大鼠溫度升高0.6℃以上，則說明造模成功。張發艷等[3]在大鼠背部 ih DNP生理鹽水混合溶液制造實熱證大鼠發熱模型、、劉亞歐等[4]于大鼠頸背部ih 2，4--二硝基苯酚（12.5mg/kg）以復制大鼠發熱模型。1.2角叉菜膠（卡拉膠）導致的發熱模型較大劑量的ih角義菜膠會引起一個持續的炎癥反應，激活巨噬細胞，從而引起發熱。王之梅等[5]用1%的卡拉膠混懸液0.1 mL給ih大鼠，制造出了發熱模型。劉亞歐等[4]于大鼠頸背部ih 20%干酵世混懸液（ 10mL/kg）以復制大鼠發熱模型。1.3

甲狀腺片導致的發熱模型 甲狀腺激素是甲狀腺片的主要成分，甲狀腺激素增多，會使代謝增強，產熱量增加，從而造成發熱。黃麗萍等611以0.6g/kg劑量的甲狀腺片，連續灌胃30 d制造出了動物發熱模型。廖梅香等[7]將甲狀腺片以0.5%的羧甲基纖維素鈉配制成所需濃度的混懸液，劑量為50mg/kg每日，連續給藥7d后，得到了需要的發熱動物模型。2 生物制劑造模法西醫學認為，發熱是某些致熱原侵入機體，溫度感受器接受體內、外環境溫度的閩值上移，從而引起了產熱增加的同時散熱減少，導致發熱。因此，一些可以造成上述現象的生物制劑就可以用來制作動物發熱模型，發熱機理較清楚，成功率相對較高。2.1脂多糖（lipopolysaccharide.LPS）導致的發熱模型到目前為止，脂多糖（ lipopolysaccharide，LPS）動物發熱模型是實驗研究里最為常用的動物發熱模型。LPS為c-菌細胞壁的主要成分，內毒素作用于巨噬細胞等，使之產生IL一l、IL-6和TNF -α，這些具有內源性致熱原效應的細胞因子作用于下匠腦體溫調節中樞，引起機體發熱。張福利等[8]研究LPS導致發熱模型的劑量從10～250Lg/kg不等，發現20μg/kg的劑量為引起大鼠發熱的最佳劑量。江啟煜等[9]分別以15μg/kg和75μg/kg劑量給SD大鼠ip濃度為25pg/mL的內毒素生理鹽水溶液制作發熱模型。金龍等[10]將家兔灌胃給藥（或靜脈注射），l天1次，連續3天，末次給藥后th，將家兔iv人腸桿菌內毒素250n～（mL·kg）建立發熱模型，陳婷等[11]將家兔經耳緣ivLPSl.5μg/Kg（攻毒）建立發熱模型。2.2疫苗引起發熱模型疫苗是減毒或滅活的細菌或病毒，當它進入動物體內時會攻擊免疫系統，迫使免疫系統產生抗體，從而能夠預防相應的細菌或病毒再次侵入動物體時造成的損害。因此，接種疫苗后，動物體的免疫系統被攻擊.就會出現暫時的發熱等不適現象。張恩戶等[12]取健康的新西蘭兔，iv劑量為0.5mL/kg傷寒、副傷寒三聯疫苗制作兔發熱模型。胡春萍等[13]將家兔經iv過期三聯疫苗-NS.稀釋液，造成發熱模型。趙嬌等[14]按0.5～2.0mL/kg給家兔靜注，注入l-2h后，可見直腸溫度上升1.0～1.5℃，持續3～4h。2.3細菌引起的發熱模型①巴氏桿菌馬健等[15]控制實驗室溫度為20qC左右，局部消毒兔頭枕部后用預冷的1 mL注射器連接5號針頭經小腦延髓池穿刺抽取腦脊液0.4mL，48h后，按1 mL多殺性巴氏桿菌菌液（含3千個活菌）/kg進行頸根部皮下注射來制作家兔發熱模型。②肺炎球菌周育平等[16]將實驗家兔將肺炎球菌菌液以1.5mL/Kg的劑量經家兔耳緣靜脈注入，制作家兔發熱模型。③腦膜炎奈瑟菌加曼·沙俄等[17]采用小腦延髓池法固定家兔，模型組家兔每只經小腦延髓池注射3×l08 cfu/mL的腦膜炎奈瑟菌溶液，注射完畢開始測體溫、觀察家兔癥候表現，此期間家兔處于自南飲水、進食狀態。④金黃色葡萄球菌李妤蓉等[18]將凝固酶陽性金黃色葡萄球菌經增菌、鑒定、再增菌等程序，最后獲得血清肉湯菌液。實驗前將實驗兔背部皮內注射6×107個金黃色葡萄球菌活菌液。⑤注射腐敗干草浸劑趙嬌等[14]將干草浸入適量水中，放在見陽處3—4周，將腐敗浸液過濾煮沸，蒸發，得到濾液。給家兔靜注，可在1h內引起發熱，持續8～10 h。⑥大腸埃希菌菌液趙嬌等[14]用生理鹽水配制成0.5 mL溶液中含l06～ 107個細菌濃度的大腸埃希菌菌液，通過給大鼠靜脈注射的方法制造發熱模型。2.4干酵母導致的發熱模型用酵母混懸液ih大鼠（或家兔），先引起動物體溫下降。一段時間后動物體溫明顯升高，并持續較長時間，局部有明顯炎癥反應，與臨床伴內臟或皮膚有明顯急性炎癥的里熱證類似，故可用此作為發熱動物模型以研究藥物的解熱效果。賈德武等[19]將大白鼠從背部ihl0%的鮮啤酒酵母混懸液3 mL/kg制成發熱模型。趙嬌等[14]用0. 5%羧甲基纖維素鈉分別制成10、5、1、0.2%啤酒酵母混懸液，給大鼠按10 mL/kg的劑量背部皮下注射。6h后體溫升高1.2～2.2℃。2.5病毒病毒致熱成分是病毒體和其所含的血細胞凝集素。黃厚才[23]將日本大耳白兔接種仙臺病毒后體溫漸生，至8h（注射N.S6h），體溫高達（40.79±0.40）℃，與造模前比較，體溫有非常顯著差異。（P<0.01）。蔡定芳等[24]將西德純種成年白毛兔ipl50兔出血熱病毒（RHFV）1mL制作兔發熱模型。3其它造模法除上述造模方法外，還有物理造模法、中藥造模法、食品提取物造模法等。3.1 物理造模法楊志仙等[22]直接利用熱水浴使大鼠高熱驚厥，隔日誘導驚厥1次，共誘導10次。魏偉等[23]直接刺激下丘腦的體溫調節中樞，從而引起體溫升高。3.2中藥造模法 賀庭楨等[24]將附子、干姜、肉桂按1：1：1的比例或者將附子、干姜按1：1比例配成中藥處方制成l00%水煎劑給大鼠灌服復制大鼠熱證模型。3.3牛奶、脫脂牛奶導致的發熱模型 陳洪等[25]把實驗豬分為不同劑量試驗組、不同品種試驗組以及不同日齡和不同體重試驗組，攻毒劑量分別為：低劑量組每1kg體重注射lmL，中劑量組每1kg體重注射2mL，高劑量組每1kg體重注射3mL。試驗豬均經下腹部ih脫脂消毒牛奶，使豬體溫升高。3.4蛋白胨導致的發熱模型劉永錄等[26]通過兔iml0%蛋白胨制作家兔發熱模型。3.5其它發熱模型筆者查閱相關文獻發現，相關研究人員用寒、熱交替法復制出了大、小鼠發熱模型。4結語到目前為止，大多數醫療用發熱模型以化學或生物致熱原為致病因子，向動物體內注入脂多糖（ LPS）、干酵母、2，4-二硝基酚等制作發熱模型。上述模型是適應西醫學角度的研究方法和應用單純西藥的藥物試驗，具有方便.耗費時間短、成功率高、對實驗條件要求也比較低等優點。雖然上述經典發熱模型與中醫外感傷寒發熱病癥有一定程度的契合，但無法完全模擬中醫理論中感受外邪的模型，所以真正符合中醫理論的傷寒發熱模型少之又少，隨著中醫藥發展的科學化，構建符合中醫理論的傷寒發熱模型迫在眉睫。在今后的實驗過程中，尋找和中醫學基礎理論相結合，符合中醫熱證的辯證特點的發熱模型是總體趨勢。可以多考慮物理法構建發熱模型，這種方法構建的發熱模型將會具有較強的實用性、適用性和可行性，同時具有深遠的社會效益和潛在的經濟價值。參考文獻：[1]唐曉峰，薛漫清，王暉，大鼠發熱機制的研究進展[J].廣東藥學院學報，2009，03：327-331.[2]陳敬然，孫紅梅，尹曉飛，等.牛黃解毒滴丸解熱鎮痛和抗炎作用實驗J.中國藥師2010 13 9 1257-1259[3]張發艷.大黃、黃連及其提取物對實熱證模型大鼠肝基岡表達譜的影響[D].山東中醫藥大學，2012.[4]劉亞歐，黃利，李利民芩術顆粒對發熱和疼痛模型鼠的解熱鎮痛作用[J].中國藥房，2014，23：2134-2136.[5]王之梅，萬鵬，黃崇剛，等.止嗽退熱合劑主要藥理作用研究[J].中國中醫急癥，2011，20（7）：1099-1100.[6]黃麗萍，彭淑紅，蒙曉芳，胡強，陳凱峰，余日躍，劉紅寧，孫建寧熱證大鼠脂肪代謝及解耦聯蛋白1 mRNA表達的相關研究[J].遼寧中醫雜志，2010，03：541-543.[7]廖梅香，李銀保，朱衛豐，等熱證大鼠模型肝臟組織中腺苷酸含量的測定[J].湖北農業科學，2010，04：954-955.[8]張福利，許宏連，馬艷春，等脂多糖對寒體、熱體、常體大鼠攻毒發熱后體溫曲線、一氧化氮的影響[J].中醫藥學報，2007，35（1）：17-19.[9]江啟煜，黃文恒，柴銀口服液對大鼠內毒素誘導發熱模型的 影響[J].貴陽中醫學院學報，2010，03：71-73.[10]金龍，李軍梅，洪曉華，等.中藥方劑對實驗性發熱模型動物體溫的影響[J]中國中西醫結合雜志，2004，Sl：236-239[11]陳婷，任秋生，楊愛東，等、山藥替代白虎湯中粳米干預發熱模型的比較研究[J].中國醫學工程，2014，08：158 +160.[12]張恩戶，趙勤，侯建平，等.補中益氣湯對家兔脾虛發熱模型體溫、腦脊液PCE_2和PO/AH區組織cAMP含量的影響[J].中醫藥學刊，2003，09：1529 - 1552.[13]胡春萍，蔣加進，石磊，等，牦牛角等6種角類藥超細粉對發熱家兔的影響[J].醫學動物制，2006，04：235-238.[14]趙嬌.白虎湯中石膏清熱作用的成分研究[D].黑龍江中醫藥大學.2012.[15]馬健，樊巧玲，周群，蔡定芳.截營湯對細菌性高熱模型家兔發熱影響的實驗研究[J].中國中醫藥科技，1995，06：28-29[16]周育平，李春生，肺炎雙球菌復制家兔溫病發熱模型的研究[J].北京中醫，2007，08：536-538.[17]加曼·沙俄，額爾敦朝魯，紀月嶺.腦膜炎奈瑟菌致蒙醫未成熟熱、成熟熱期發熱模型建立研究[J].內蒙古民族大學學報（自然科學版），2014，03：323 - 325.[18]李妤蓉，劉文利，王麗霞，等，新西蘭兔金黃色葡萄球菌感染性發熱模型的制備[J].醫學動物防制，2014.05：516-517.[19]賈德武，葉壽山抗感滴丸主要藥效學實驗研究[J].中醫藥臨床雜志，2007 ，04：351-353[20]黃厚才，家兔病毒性發熱模型的研制[J].江蘇藥學與臨床研究，1997，02：5-6[21]蔡定芳，鄔祥惠，沈白尹，等，病毒性發熱的家兔模型[J].中華傳染病雜志，1995，02：95-97[22]楊志仙，秦炯，周國平，等，發育期大鼠高熱驚厥腦損傷模型的建立[J].北京大學學報：醫學版，2002，34（3）：225 -228[23]魏偉，吳希美，李元建.藥理實驗方法學（第4版）[M].北京：人民衛生出版社，2010：769-770.[24]賀庭楨.熱結腸道型氣分證大鼠模型的構建及腸道黏膜免疫病理評價研究[D].西南大學，2014.[25]陳洪，唐廷崇，盛蘭弟，等，建立實驗室豬發熱模型[J].中國獸藥雜志，2005，11：20 - 22.[26]劉永錄，湯法銀，李艷玲，獸用中藥制劑溫毒清浸膏的解熱作用研究[J].中獸醫學雜志，2011，02：7-8.（收稿日期：2015-01-12）