外周T細胞淋巴瘤患者外周血中髓源性抑制細胞的表達及意義

李艷麗，卜慶

外周T細胞淋巴瘤患者外周血中髓源性抑制細胞的表達及意義

李艷麗，卜慶△

目的探索外周T細胞淋巴瘤（PTCL）患者外周血中髓源性抑制細胞（MDSCs）數量與預后的關系。方法收集PTCL患者23例，選取14例同期健康體檢者作為正常對照組，采用流式細胞儀檢測其外周血MDSCs/單核細胞比例，分析MDSCs數量與PTCL患者預后及臨床特征的關系。結果MDSCs在PTCL患者外周血單核細胞中所占的比例高于正常對照組［（4.59±1.41）%vs（1.36±0.59）%，P＜0.01］。PTCL化療后外周血MDSCs的表達（1.29± 2.95）%較化療前明顯降低。結外侵犯部位、骨髓侵犯、臨床分期、IPI評分不同的PTCL患者外周血MDSCs的表達差異有統計學意義（P＜0.05）。結論MDSCs在PTCL患者外周血中高表達，提示與腫瘤發生及預后不良有關。

淋巴瘤，T細胞，外周；流式細胞術；髓源性抑制細胞

髓源性抑制細胞（myeloid-derived suppressor cells，MDSCs）是一群來源于骨髓祖細胞和未成熟髓細胞，具有免疫抑制功能的髓系細胞。MDSCs被炎性介質從骨髓募集到外周，經過活化可以抑制機體對腫瘤的免疫功能，使腫瘤細胞免于被免疫系統防御，導致腫瘤的發生和發展［1］。外周T細胞淋巴瘤（peripheral T-cell lymphoma，PTCL）是指所有起源于成熟（胸腺后）T細胞和自然殺傷（NK）細胞的惡性腫瘤，具有侵襲性強、病情遷延、容易復發、預后不良等特征，目前尚無標準治療方法，常規化療方案如CHOP、EPOCH等雖近期療效尚可，但復發率仍較高，遠期生存率較低。本研究擬觀察PTCL患者外周血MDSC的數量，探討其作用及與PTCL患者預后的關系，并能否將其作為PTCL的治療靶點。

1　對象與方法

1.1研究對象收集2013年10月—2014年5月于桂林醫學院附屬醫院、桂林市人民醫院、廣西壯族自治區南溪山醫院接受治療的PTCL患者23例。所有患者臨床資料齊全，均經病理學確診證實。其中男13例，女10例，年齡11～75歲，平均（43.52±17.16）歲。選取同期健康體檢者14例作為正常對照組，其中男7例，女7例，年齡23～70歲，平均（45.79±14.31）歲。2組性別（χ2=0.149）、年齡（t=0.413）差異無統計學意義（均P＞0.05）。全部臨床特征資料均來自于患者入院的首次檢查結果：包塊直徑≥10 cm為巨大包塊，乳酸脫氫酶（LDH）正常參考值114～240 U/L。入組人員均簽署知情同意書，并獲得本單位倫理委員會批準。

1.2方法收集患者外周血（肝素鈉抗凝）后混勻，取350 μL全血，加入熒光標記抗體CD33-APC、CD11b-FITC、CD14-PE各20 μL，4℃冰箱避光孵育30 min，PBS洗滌，紅細胞裂解液裂解、洗滌、固定、重懸后，用FACS Canto（美國BD公司）檢測患者外周血MDSCs/單核細胞比例，BD FACS Diva軟件分析數據。

1.3統計學方法所有統計學數據采用SPSS 17.0軟件進行分析，計量資料若符合正態分布用±s表示，采用獨立樣本t檢驗或配對樣本t檢驗，如不符合正態分布用中位數（M）表示，采用Mann-Whitney U檢驗。計數資料采用卡方（χ2）檢驗。P＜0.05認為差異有統計學意義。

2　結果

23例患者，隨訪8個月，有7例進展，尚無死亡病例，中位無進展時間（PFS）為6個月。

2.12組MDSCs表達情況比較PTCL組和正常對照組外周血中均存在CD33+CD14-CD11b+MDSCs，但在PTCL組外周血單核細胞中所占的比例高于正常對照組［（4.59±1.41）%vs（1.36±0.59）%，t= 9.224，P＜0.05］，見圖1。PTCL組化療后外周血MDSCs的表達（1.29±2.95）%較化療前明顯降低（t= 2.10，P＜0.05）

2.2MDSCs與臨床特征的分析結果結外侵犯部位、骨髓侵犯、臨床分期、國際預后指數（international prognostic index，IPI）評分不同PTCL患者外周血單核細胞中的MDSCs比例差異有統計學意義，年齡、LDH水平、包塊大小不同PTCL患者外周血中的MDSCs比例差異無統計學意義，見表1。

Tab.1　The correlation of clinical features in PTCL patients表1MDSCs與PTCL患者臨床特征間的關系（%）

Fig.1　Results of flow cytometry showing the expression of MDSCs in the peripheral blood in patients with PTCL group and normal control group圖1　在PTCL患者和正常對照組外周血中MDSCs表達的流式結果

3　討論

人類MDSCs的分子標志目前還未確定，本研究選取的是CD33+CD14-CD11b+標志的MDSCs，與國外報道類似［2］。有研究顯示，B細胞淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤中的MDSCs表達與不良預后相關［3］，而PTCL預后不良，其機制尚未明晰，國外也少見MDSCs與PTCL相關性的研究，筆者推測MDSCs可能與PTCL的不良預后有關。

國內對于MDSCs的研究尚處于起步階段，與臨床相關的研究更是罕見。奉松青等［4］的臨床研究顯示CD14+HLA-DRlow/-MDSCs在胃癌患者外周血中的表達高于正常對照組；Christiansson等［5］以CD33+CD14-CD11b+為MDSCs的表型研究了慢性粒細胞性白血病（CML），發現CML組外周血中MDSCs的比例也要明顯高于對照組（P＜0.01），與本研究中MDSCs 在PTCL患者外周血中的比例高于正常對照組的結論一致；Gabitass等［6］證明外周血MDSCs在胰腺癌等實體瘤中顯著升高，且與腫瘤的大小和臨床分期等眾多臨床特征有關，與本研究結論相似。這提示MDSCs與腫瘤的發展、演進有著密切的關系［7］，并可能與患者預后相關。國內外尚少見關于MDSCs在外周T細胞淋巴瘤中與化療相關性的文獻報道，Wang等［8］報道CD14-CD11b+MDSCs在胃癌Ⅳ期患者化療前后外周血中比例也不一樣，提示其變化與治療有關；Tu等［9］研究結果顯示患者化療后外周血MDSCs的表達低于化療前，可能與腫瘤被清除后MDSCs的產生和募集減少有關，這也提示MDSCs有可能作為腫瘤化療效果的一種評價指標，有待更深入的觀察和研究。在本研究中，因隨訪時間較短，尚未得出MDSCs與PTCL生存期的相關性，作用機制仍需探索，需要擴大樣本量進一步開展研究。

總之，MDSCs在維持機體免疫系統平衡中起重要作用［10］。本研究證實了MDSCs在PTCL患者外周血中高表達，與多種臨床特征相關，且化療后較化療前明顯下降，因此可能是影響預后的因素。檢測MDSCs的變化有望為PTCL的療效及預后評價提供依據。

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（2014-09-09收稿2014-11-17修回）

（本文編輯李國琪）

The expression and significance of MDSCs in peripheral blood in patients with peripheral T cell lymphoma

LI Yanli，Bu Qing△
Department of Medical Oncology，the Affiliated Hospital of Guilin Medical University，Guilin 541000，China
△Corresponding AuthorE-mail：buqing1993@qq.com

ObjectiveTo study the relationship between the number of myeloid-derived suppressor cells（MDSCs）in peripheral blood and prognosis in patients with peripheral T-cell lymphoma（PTCL）.MethodsTwenty-three patients with PTCL were selected in this study and 14 healthy persons were used as the normal control.The proportion of MDSCs/mononuclear in peripheral blood was detected by flow cytometry.The correlation between the number of MDSCs and the clinical character and prognosis in patients with PTCL was analyzed.ResultsThe proportion of MDSCs in peripheral blood was significantly higher in patients with PTCL than that of healthy subjects［（4.59±1.41）%vs（1.36±0.59）%，P＜0.01］.The number of MDSCs in peripheral blood was significantly decreased after chemotherapy compared with that before treatment［（1.29± 2.95）%，P＜0.05）］.There were significant differences in MDSCs expressions in patients between different extranodal involvement，bone marrow involvement，clinical stage and IPI score（P＜0.05）.Conclusion The higher expression of MDSCs may be related to the progression in patients with PTCL.

lymphoma，T-cell，peripheral；flow cytometry；myeloid-derived suppressor cells

R733.41

ADOI：10.11958/j.issn.0253-9896.2015.03.016

廣西自然科學基金青年基金項目（2011GXNSFB018092）

桂林醫學院附屬醫院腫瘤內科（郵編541004）

李艷麗（1989），女，碩士在讀，主要從事各種惡性腫瘤的規范化治療研究

△E-mail：buqing1993@qq.com