光譜法檢測大腦神經遞質多巴胺

張慶云 蔡美娜 程銘 張麗 趙朋 董浩垚

摘要：多巴胺是人腦中一種重要的神經遞質，帕金森病等神經系統病變與其含量異常有密切的關系。目前常用的多巴胺檢測方法有光譜法、高效液相色譜法、化學修飾電極法、傳感器法、毛細管電泳法，本文就光譜法做一綜述。

關鍵詞：熒光法；化學發光法；檢測

中圖分類號：O65 文獻標識碼：A 文章編號：1006-3315（2015）07-158-001

多巴胺（dopamine， DA）是一類兒茶酚胺類物質（CAs），它存在于神經組織及體液中，是下丘腦和腦垂體腺中的一種重要的神經遞質，腦垂體內分泌功能的協調與多巴胺在腦內特定區域的分布及含量有密切關系，導致神經功能紊亂，是帕金森病（Parkinsons disease）發病的一個重要影響因素。另外，多巴胺還能夠引起心臟興奮，使血流量增加，以用于感染性休克和心源性休克。所以，進行多巴胺檢測的研究具有重要的現實意義[1]。本文就多巴胺的光譜法檢測作一綜述。

利用光譜法測定多巴胺是通過測定DA在被測定波長處的光吸收度來定量測定DA，包括熒光法和化學發光法等，這些方法簡便、快速、有效，是DA檢測中最常用的方法。

1.熒光法

湯濤等[2]報道利用鐵氰化鉀氧化DA生成多巴胺三羥吲哚，再利用鋅離子提高其熒光強度定量測定熒光，從而來測定DA。這種方法不需要對DA進行分離純化即可達到目的，操作簡便易行，分析速度快，但靈敏度仍難以滿足臨床檢驗的需要。研究發現，在堿性條件下，鄰苯二甲醛和B-巰基乙醇（OPAME）可與DA發生化學反應生成一種異吲哚類熒光物質，經400nm光波激發，產生462nm熒光，熒光強度與DA的濃度在一定范圍內呈良好的線性關系。此種方法被稱為熒光分光光度法，優點是線性范圍寬，靈敏度較高，分析速度快，操作簡便，無需昂貴的試劑和儀器。目前，已成功應用于鹽酸多巴胺在藥物制劑中含量的測定。

2.流動化學注射發光法

Nozaki等[3]報道先將硫酸根衍生物固定在微珠上，然后整體加到1ml的DA溶液中，室溫下振蕩10min，取出微珠用蒸餾水沖洗后，將其放入1ml咪唑溶液（0.1mol/L，PH=9）中，使DA的兩個酚羥基在堿性環境中與咪唑反應生成過氧化氫，最后取出50μL反應液用辣根過氧化物酶催化魯米諾流動注射化學發光法（FI-CL）分析，獲得了較好的檢測結果。該方法靈敏度較高，并且部分克服了目前用化學發光法檢測DA之前先分離的不足，可以簡化操作，減少資金設備的投資，但檢測靈敏度不能滿足臨床檢驗的需要。

參考文獻：

[1]張慶云，李佳林，鄭培，李艷霞，車雨軒，董曉東.大腦神經遞質多巴胺的檢測方法 [J]醫學研究與教育，2014，31（1）：87-90.

[2]湯濤等. 安徽醫學[J]1990 ，11 （5） ：9 - 11.

[3]Nozaki O ，et al .Luminescence ，1999 ，14 （6） ：369 - 374.