皮膚晚期糖基化終末產物與2 型糖尿病周圍神經病變的相關性研究

劉 茜 吳佳佳 王菊梅 董 林 陳若平 葉山東

糖尿病周圍神經病變(diabetic peripheral neurophathy，DPN)是糖尿病常見的慢性并發癥之一，其具體發病機制目前尚不明確，一些動物模型及臨床研究結果提示晚期糖基化終末產物(advanced glycation end products，AGEs)的形成、多元醇通路、氧化應激反應、蛋白激酶C 通路的激活等均參與了DPN 的發生發展過程，其中AGEs 的增加起到了重要的作用。Misur等［1］對2 型糖尿病(type 2 diabetes，T2DM)合并周圍神經病變的患者外周神經進行病理檢查，發現該類患者周圍神經組織中均含有大量AGEs。本研究旨在觀察皮膚AGEs 與DPN 的相關性，并探討其臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料將2012 年1 月至2012 年6 月在安徽省立醫院內分泌科住院的99 例T2DM 患者納入DM組，女性34 例，男性65 例，平均年齡(60.18±14.57)歲。所有患者的診斷均符合美國糖尿病協會2010 年T2DM的診斷標準。根據患者是否合并周圍神經病變分為兩組:合并神經病變組(DPN 組)42 例，未合并神經病變組(非DPN 組)57 例。需排除:合并糖尿病其他急慢性并發癥及其他內分泌系統疾病的患者;非糖尿病引起的肢體感覺、運動障礙及肝腎疾病患者;曾接受甲鈷胺、硫辛酸等營養神經藥物治療的患者。同期選擇35 例同期體檢的健康人群作為正常對照組(NC 組)。

1.2 方法記錄DM 組、NC 組所有研究對象的年齡、體質量和身高，計算體質量指數(bodymass index，BMI)，同時測量血壓。禁食8 ～10 h 抽取靜脈血5 mL，檢測血糖、糖化血紅蛋白(hemoglobin A1c，HbA1c)、血清總膽固醇(total cholesterol，TC)和甘油三脂(triglyceride，TG)。HbA1c 測定采用HPLC 法并參照衛生部規定的質控。皮膚AGEs 測定［2］:患者站立位，將皮膚AGEs 熒光光譜儀(中科院安光所提供)探頭置左前臂內側皮膚，掃描3 次，取平均值。

1.3 糖尿病合并神經病變的診斷采用神經缺陷評分(neuropathy disability score，NDS)判斷:根據溫度覺、針刺覺、大拇指振動覺及踝反射進行評分，溫度覺減弱或消失記1 分，正常記0 分;針刺覺減弱或消失記1分，正常記0 分;單側大拇指振動覺(0.28 Hz 音叉)減弱或消失記1 分，正常記0 分;單側踝反射消失記2分，重叩擊出現記1 分，正常記0 分。總分≥6 分診斷為PPN［3］。

1.4 統計學方法采用SPSS 19.0 進行統計分析，計量資料以±s 表示，兩組均數比較采用t 檢驗，計數資料以例表示，計數資料比較采用χ2檢驗，相關性分析采用Pearson 相關分析，以P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 DM 組與NC 組相關指標比較兩組研究對象的年齡、BMI、TG 差異無統計學意義(P ＞0.05)。與NC 組比較，DM 組空腹血糖(fasting blood glucose detection，FBG)、HbA1c、收縮壓(systolic blood pressure，SBP)、舒張壓(diastolic blood pressure，DBP)、TC 和皮膚AGEs 值升高，差異有統計學意義(P ＜0.05)。見表1。

表1 DM 組與NC 組相關指標比較(±s)

表1 DM 組與NC 組相關指標比較(±s)

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2.2 DPN 組與非DPN 組相關指標比較兩組患者的年齡、性別、FBG、HbA1c 水平、尿酸、TG、TC、BMI、SBP和DBP 差異無統計學意義(P ＞0.05)。與非DPN 組比較，DPN 組患者糖尿病病程、皮膚AGEs 水平顯著增高，差異有統計學意義(P ＜0.05)。見表2。

2.3 DM 患者皮膚AGEs 水平與NDS 相關性分析

糖尿病患者皮膚AGEs 水平與NDS 評分呈顯著正相關(r=0.965，P ＜0.05)。

表2 非DPN 組與DPN 組相關指標比較

3 討論

DPN 是慢性高血糖狀態及其各種病理生理改變引起的神經系統損傷，可累及全身神經系統任何部分，是糖尿病常見的慢性并發癥之一，累及超過50%的糖尿病患者。其發病機制目前尚不完全明確。神經膠質細胞和軸突聯系異常、神經元組織細胞的代謝異常、神經細胞營養因子缺乏、非酶糖基化產物增強氧化應激反應及蛋白激酶C 的激活等可能均參與其發病過程。王紹欣等［4］認為晚期糖基化終末產物及其受體系統在DPN 中起重要的作用。

在機體的不同組織器官中，如肝臟、腎臟、血管和皮膚等均有AGEs 的存在。AGEs 是由蛋白質和脂類等非酶糖基化反應形成的終產物，其水平變化可反映患者長期的糖代謝控制狀態，并參與糖尿病慢性并發癥的病理過程。研究［5］證實糖尿病小鼠的神經組織中AGEs 積聚可引起小鼠的脫髓鞘病變，繼而促進神經元細胞和雪旺氏細胞的死亡，導致DPN 的發病。另有研究［6］表明AGEs 水平的升高可改變誘導型一氧化氮合酶的表達水平并最終導致DPN。

皮膚熒光光譜法檢測AGEs 是一種無創光譜檢測技術，其利用AGEs 的熒光特性，首先由探頭發出激發光源，直接照射到測試者的皮膚組織上，通過收集被激發出的熒光，根據所測試數據結果計算皮膚AGEs 水平，可間接反映體內AGEs 水平［7］。Araszkiewicz 等［8］應用自體熒光光譜法對1 型糖尿病患者進行皮膚AGEs 測定，結果提示合并周圍血管病變患者的皮膚AGEs 水平較未合并周圍血管病變者明顯增高，并與微血管并發癥發生率增加相關。目前國內對皮膚AGEs與DPN 發生的相關性研究較少。本研究采用皮膚自體熒光光譜儀測定所有研究對象的皮膚AGEs 水平，結果顯示DM 患者皮膚AGEs 水平顯著高于糖代謝正常人群，且合并DPN 的患者較未合并DPN 患者皮膚AGEs 水平明顯升高，提示AGEs 水平升高可能與DPN的發生有關。本研究結果未顯示DPN 組與非DPN 組間HbA1C 存在明顯差異，可能與均為住院患者、血糖控制不佳有關。另外，本研究的樣本量較小，尚待大樣本量研究結果進一步證實。但兩組皮膚AGEs 水平存在顯著差異，提示AGEs 較HbA1c 更能反映長期的血糖控制情況。

綜上所述，糖尿病患者皮膚AGEs 水平升高在DPN 發生發展中可能起到重要作用，而有關AGEs 參與DPN 發病的深層機制有待繼續研究。皮膚熒光光譜法檢測AGEs 無創、快速、不需試劑，是一種簡單實用檢測皮膚AGEs 的方法。

［1］ Misur I，Zarkovic K，Barada A，et al.Advanced glycation endproducts in peripheral nerve in type 2 diabetes with neuropathy［J］.Acta Diabetologica，2004，41(4):158－66.

［2］ 葉成松，葉山東，王貽坤，等.皮膚晚期糖基化終末產物與糖尿病慢性腎臟疾病的相關性研究［J］.中國糖尿病雜志，2013，21(10):877－879.

［3］ 楊三梅，余峰，王貽坤，等.晚期糖基化終末產物熒光光譜檢測法在糖尿病篩查中的應用研究［J］.生物學報，2011，20(1):66－68.

［4］ 王紹欣，謝云.AGE-RAGE 系統與糖尿病周圍神經病變［J］.中國糖尿病雜志，2008，16(6):379－381.

［5］ Sekido H，Suzuki T，Jomori T，et al.Reduced cell replication and induction of apoptosis by advanced glycation end products in rat Schwann cells［J］. Biochem Biophys Res Commun，2004，320(1):241－248.

［6］ Samborski P，Naskret D，Araszkiewicz A，et al.Assessment of skin autofluorescence as a marker of advanced glycation end product accumulation in type 1 diabetes［J］.Polskie Archiwum Medycyny Wewntrznej，2011，121(3):67－72.

［7］ Papanas N，Papatheodorou K，Papazoglou D，et al.A comparison of the new indicator test for sudomotor function(Neuropad)with the vibration perception threshold and the clinical examination in the diagnosis of peripheral neuropathy in subjects with type 2 diabetes［J］.Exp Clin Endocrinol Diabetes，2008，116(2):135－138.

［8］ Araszkiewicz A，Naskret D，Niedzwiecki P，et al.Increased accumulation of skin advanced glycation end products is associated with microvascular complications in type 1 diabetes［J］.Diabetes Technol Ther，2011，13(8):837－842.