皮膚晚期糖基化終末產(chǎn)物與2 型糖尿病周圍神經(jīng)病變的相關(guān)性研究

劉 茜 吳佳佳 王菊梅 董 林 陳若平 葉山東

糖尿病周圍神經(jīng)病變(diabetic peripheral neurophathy，DPN)是糖尿病常見的慢性并發(fā)癥之一，其具體發(fā)病機(jī)制目前尚不明確，一些動(dòng)物模型及臨床研究結(jié)果提示晚期糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end products，AGEs)的形成、多元醇通路、氧化應(yīng)激反應(yīng)、蛋白激酶C 通路的激活等均參與了DPN 的發(fā)生發(fā)展過程，其中AGEs 的增加起到了重要的作用。Misur等［1］對2 型糖尿病(type 2 diabetes，T2DM)合并周圍神經(jīng)病變的患者外周神經(jīng)進(jìn)行病理檢查，發(fā)現(xiàn)該類患者周圍神經(jīng)組織中均含有大量AGEs。本研究旨在觀察皮膚AGEs 與DPN 的相關(guān)性，并探討其臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料將2012 年1 月至2012 年6 月在安徽省立醫(yī)院內(nèi)分泌科住院的99 例T2DM 患者納入DM組，女性34 例，男性65 例，平均年齡(60.18±14.57)歲。所有患者的診斷均符合美國糖尿病協(xié)會2010 年T2DM的診斷標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)患者是否合并周圍神經(jīng)病變分為兩組:合并神經(jīng)病變組(DPN 組)42 例，未合并神經(jīng)病變組(非DPN 組)57 例。需排除:合并糖尿病其他急慢性并發(fā)癥及其他內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病的患者;非糖尿病引起的肢體感覺、運(yùn)動(dòng)障礙及肝腎疾病患者;曾接受甲鈷胺、硫辛酸等營養(yǎng)神經(jīng)藥物治療的患者。同期選擇35 例同期體檢的健康人群作為正常對照組(NC 組)。

1.2 方法記錄DM 組、NC 組所有研究對象的年齡、體質(zhì)量和身高，計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)(bodymass index，BMI)，同時(shí)測量血壓。禁食8 ～10 h 抽取靜脈血5 mL，檢測血糖、糖化血紅蛋白(hemoglobin A1c，HbA1c)、血清總膽固醇(total cholesterol，TC)和甘油三脂(triglyceride，TG)。HbA1c 測定采用HPLC 法并參照衛(wèi)生部規(guī)定的質(zhì)控。皮膚AGEs 測定［2］:患者站立位，將皮膚AGEs 熒光光譜儀(中科院安光所提供)探頭置左前臂內(nèi)側(cè)皮膚，掃描3 次，取平均值。

1.3 糖尿病合并神經(jīng)病變的診斷采用神經(jīng)缺陷評分(neuropathy disability score，NDS)判斷:根據(jù)溫度覺、針刺覺、大拇指振動(dòng)覺及踝反射進(jìn)行評分，溫度覺減弱或消失記1 分，正常記0 分;針刺覺減弱或消失記1分，正常記0 分;單側(cè)大拇指振動(dòng)覺(0.28 Hz 音叉)減弱或消失記1 分，正常記0 分;單側(cè)踝反射消失記2分，重叩擊出現(xiàn)記1 分，正常記0 分。總分≥6 分診斷為PPN［3］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 19.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以±s 表示，兩組均數(shù)比較采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以例表示，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson 相關(guān)分析，以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 DM 組與NC 組相關(guān)指標(biāo)比較兩組研究對象的年齡、BMI、TG 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)。與NC 組比較，DM 組空腹血糖(fasting blood glucose detection，F(xiàn)BG)、HbA1c、收縮壓(systolic blood pressure，SBP)、舒張壓(diastolic blood pressure，DBP)、TC 和皮膚AGEs 值升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)。見表1。

表1 DM 組與NC 組相關(guān)指標(biāo)比較(±s)

表1 DM 組與NC 組相關(guān)指標(biāo)比較(±s)

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2.2 DPN 組與非DPN 組相關(guān)指標(biāo)比較兩組患者的年齡、性別、FBG、HbA1c 水平、尿酸、TG、TC、BMI、SBP和DBP 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)。與非DPN 組比較，DPN 組患者糖尿病病程、皮膚AGEs 水平顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)。見表2。

2.3 DM 患者皮膚AGEs 水平與NDS 相關(guān)性分析

糖尿病患者皮膚AGEs 水平與NDS 評分呈顯著正相關(guān)(r=0.965，P ＜0.05)。

表2 非DPN 組與DPN 組相關(guān)指標(biāo)比較

3 討論

DPN 是慢性高血糖狀態(tài)及其各種病理生理改變引起的神經(jīng)系統(tǒng)損傷，可累及全身神經(jīng)系統(tǒng)任何部分，是糖尿病常見的慢性并發(fā)癥之一，累及超過50%的糖尿病患者。其發(fā)病機(jī)制目前尚不完全明確。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和軸突聯(lián)系異常、神經(jīng)元組織細(xì)胞的代謝異常、神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)因子缺乏、非酶糖基化產(chǎn)物增強(qiáng)氧化應(yīng)激反應(yīng)及蛋白激酶C 的激活等可能均參與其發(fā)病過程。王紹欣等［4］認(rèn)為晚期糖基化終末產(chǎn)物及其受體系統(tǒng)在DPN 中起重要的作用。

在機(jī)體的不同組織器官中，如肝臟、腎臟、血管和皮膚等均有AGEs 的存在。AGEs 是由蛋白質(zhì)和脂類等非酶糖基化反應(yīng)形成的終產(chǎn)物，其水平變化可反映患者長期的糖代謝控制狀態(tài)，并參與糖尿病慢性并發(fā)癥的病理過程。研究［5］證實(shí)糖尿病小鼠的神經(jīng)組織中AGEs 積聚可引起小鼠的脫髓鞘病變，繼而促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞和雪旺氏細(xì)胞的死亡，導(dǎo)致DPN 的發(fā)病。另有研究［6］表明AGEs 水平的升高可改變誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的表達(dá)水平并最終導(dǎo)致DPN。

皮膚熒光光譜法檢測AGEs 是一種無創(chuàng)光譜檢測技術(shù)，其利用AGEs 的熒光特性，首先由探頭發(fā)出激發(fā)光源，直接照射到測試者的皮膚組織上，通過收集被激發(fā)出的熒光，根據(jù)所測試數(shù)據(jù)結(jié)果計(jì)算皮膚AGEs 水平，可間接反映體內(nèi)AGEs 水平［7］。Araszkiewicz 等［8］應(yīng)用自體熒光光譜法對1 型糖尿病患者進(jìn)行皮膚AGEs 測定，結(jié)果提示合并周圍血管病變患者的皮膚AGEs 水平較未合并周圍血管病變者明顯增高，并與微血管并發(fā)癥發(fā)生率增加相關(guān)。目前國內(nèi)對皮膚AGEs與DPN 發(fā)生的相關(guān)性研究較少。本研究采用皮膚自體熒光光譜儀測定所有研究對象的皮膚AGEs 水平，結(jié)果顯示DM 患者皮膚AGEs 水平顯著高于糖代謝正常人群，且合并DPN 的患者較未合并DPN 患者皮膚AGEs 水平明顯升高，提示AGEs 水平升高可能與DPN的發(fā)生有關(guān)。本研究結(jié)果未顯示DPN 組與非DPN 組間HbA1C 存在明顯差異，可能與均為住院患者、血糖控制不佳有關(guān)。另外，本研究的樣本量較小，尚待大樣本量研究結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)。但兩組皮膚AGEs 水平存在顯著差異，提示AGEs 較HbA1c 更能反映長期的血糖控制情況。

綜上所述，糖尿病患者皮膚AGEs 水平升高在DPN 發(fā)生發(fā)展中可能起到重要作用，而有關(guān)AGEs 參與DPN 發(fā)病的深層機(jī)制有待繼續(xù)研究。皮膚熒光光譜法檢測AGEs 無創(chuàng)、快速、不需試劑，是一種簡單實(shí)用檢測皮膚AGEs 的方法。

［1］ Misur I，Zarkovic K，Barada A，et al.Advanced glycation endproducts in peripheral nerve in type 2 diabetes with neuropathy［J］.Acta Diabetologica，2004，41(4):158－66.

［2］ 葉成松，葉山東，王貽坤，等.皮膚晚期糖基化終末產(chǎn)物與糖尿病慢性腎臟疾病的相關(guān)性研究［J］.中國糖尿病雜志，2013，21(10):877－879.

［3］ 楊三梅，余峰，王貽坤，等.晚期糖基化終末產(chǎn)物熒光光譜檢測法在糖尿病篩查中的應(yīng)用研究［J］.生物學(xué)報(bào)，2011，20(1):66－68.

［4］ 王紹欣，謝云.AGE-RAGE 系統(tǒng)與糖尿病周圍神經(jīng)病變［J］.中國糖尿病雜志，2008，16(6):379－381.

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［6］ Samborski P，Naskret D，Araszkiewicz A，et al.Assessment of skin autofluorescence as a marker of advanced glycation end product accumulation in type 1 diabetes［J］.Polskie Archiwum Medycyny Wewntrznej，2011，121(3):67－72.

［7］ Papanas N，Papatheodorou K，Papazoglou D，et al.A comparison of the new indicator test for sudomotor function(Neuropad)with the vibration perception threshold and the clinical examination in the diagnosis of peripheral neuropathy in subjects with type 2 diabetes［J］.Exp Clin Endocrinol Diabetes，2008，116(2):135－138.

［8］ Araszkiewicz A，Naskret D，Niedzwiecki P，et al.Increased accumulation of skin advanced glycation end products is associated with microvascular complications in type 1 diabetes［J］.Diabetes Technol Ther，2011，13(8):837－842.